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PCR检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究快速、特异、灵敏的检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法,并比较单一PCR和多重PCR对检测灵敏度的影响.方法选择O157∶H7的O抗原、H鞭毛抗原及SLT1和SLT2毒素基因特异的4对引物,分别或共同进行PCR扩增,检测40株O157∶H7和非O157∶H7菌株,将细菌按10+1~10+6稀释后比较PCR的检测灵敏度.结果所有O157∶H7菌株均在497 bp和625 bp处出现O157抗原基因和H7抗原基因产物,其产毒株在484 bp和(或)210 bp处出现SLT2和(或)SLT1基因产物,非O157∶H7菌株PCR结果均为阴性;单一PCR检测灵敏度为150 CFU/PCR反应,多重PCR为>1 500 CFU/PCR反应.结论在经过增菌后,多重PCR比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便,为产毒和非产毒O157∶H7的诊断提供了新的手段. 相似文献
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肠出血性大肠杆菌O157:H7和霍乱弧菌的多重PCR检测 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 建立同时检测肠出血性大肠杆菌(O157:H7)和霍乱弧菌的多重PCR方法,为霍乱和肠出血性大肠杆菌感染的快速诊断提供实验依据。方法 首先选择O157:H7的O抗原(rfbE)、H鞭毛抗原(fliC)基因以及霍乱孤菌外膜蛋白(ompW)和肠毒素A亚单位(ctxA)基因特异的4对引物,分别或共同对O157:H7和霍乱孤菌进行PCR扩增,并以琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。结果 所有O157:H7菌株均在497bp和625bp处出现O157 rfbE基因和H7 fliC基因扩增产物;霍乱菌株均出现560bp、302bp的ompW和ctxA基因扩增产物,O157:H7和霍乱弧菌共同扩增可出现4条单一条带。结论 选择4对特异引物的多重PCR方法可简便、特异、快速、灵敏地对O157:H7和霍乱弧菌进行同时检测。 相似文献
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目的: 构建尼古丁诱导的小鼠生精细胞体外损伤模型,探讨小鼠骨髓间质干细胞来源的胞外囊泡(mouse bone marrow mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles, mBMMSCs-EVs)对于小鼠GC-1生精细胞损伤的修复作用。方法:采用不同浓度尼古丁(0、8、16、32 μg/mL)处理GC-1生精细胞24、48、72 h,通过MTT实验筛选尼古丁诱导GC-1生精细胞损伤的最适浓度和时间;将GC-1生精细胞分为对照组、尼古丁组、尼古丁+胞外囊泡组;通过MTT实验、Transwell实验和流式细胞术凋亡实验观察mBMMSCs-EVs干预前后受损生精细胞GC-1生物学特性的变化。结果:MTT实验结果表明,32 μg/mL尼古丁作用GC-1生精细胞24 h时,细胞增殖能力明显降低(P<0.05),mBMMSCs-EVs作用于尼古丁预处理后,细胞增殖能力明显增高(P<0.05);与对照组相比,尼古丁组GC-1生精细胞迁移能力明显降低,细胞凋亡能力明显升高(P均<0.01),与尼古丁组相比,尼古丁+胞外囊泡组生精细胞增殖和迁移能力明显升高,细胞凋亡能力明显下降(P<0.01或<0.05)。结论:mBMMSCs-EVs可以逆转尼古丁引发的GC-1生精细胞增殖、迁移能力的损伤以及细胞凋亡。 相似文献
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用抗人μ链单克隆抗体建立的ELISA法检测152例肝病患者IgM类抗HCV独特型抗体,甲肝阳性率0%(0/15),乙肝8.5%(4/47),丙肝32.1%(26/81),丙肝合并乙肝者22.2%(2/9)。丙肝组内频率为急肝0%(0/17),慢性迁延性肝炎38.1%(8/21),慢性活动性肝炎43.8%(14/32),肝炎肝硬化36.4%(4/11)。本法重复性好,批内变异系数4.6%,批间变异系数8.5%。用纯化人抗HCV抗体进行阻断,阻断率>85%,丙肝组与乙肝组有显著性差异(P<0.01),与各种自身免疫性疾病无交叉,有较好的特异性和精密度,且与血清中IgM抗HCV关系密切,提示丙型肝炎IgM类抗HCV-Ab2具有模拟抗原的作用,是慢性丙型肝炎的重要检测指标并与丙肝慢性化有关。 相似文献
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综述了纳洛酮对慢性Ⅱ型呼吸衰竭、颅脑术后呼吸监护、肺性脑病、急性呼吸窘迫综合征、急性呼吸衰竭、高原肺水肿和早产儿呼吸暂停的临床应用。 相似文献
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多数大肠杆菌 (Escherichiacoli,E coli)是人和动物肠道的正常寄殖菌 ,但也有部分对人和动物有害 ,病原性大肠埃希氏菌是最常见的致病性革兰氏阴性杆菌 ,几乎可累及全身任何部位与器官。根据毒力因子、致病机制和临床症状等不同 ,主要分为肠致病性 (EPE 相似文献
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目的:建立一种特异而敏感的检测乙型肝炎病毒(HBV)基因组nt551位A→G变异株的方法。方法:根据已知的HBV基因组序列,结合国内主要流行亚型adr和adw的特点,合成在nt55l位分别为A或G两对引物,建立了突变特异性聚合酶链反应方法。结果:利用该方法对由16份乙型肝炎患者血清扩增的HBVS基因片段进行了初步检测。结果14份样本nt55l为A,l份为G,l份nt55l非A非G。经核苷酸序列分析表明结果正确。结论:该法是鉴定HBV基因组nt55l位A→G变异株的特异而敏感的方法。 相似文献
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金属硫蛋白在心肌缺血再灌注损伤修复中的抗氧化作用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 探讨金属硫蛋白(MT)在心肌梗塞和缺血再灌注心肌损伤修复中与脂质过氧化的关系。方法 采用大鼠心肌梗塞/缺血再灌注模型,测定手术后24h和8周心肌组织的MT及脂质过氧化的中间产物丙二醛(MDA)的含量,结果:心肌梗塞和缺血再灌注24h后MDA含量均显著高于对照组(P〈0.01),8周后MDA显著降低(P〈0.05),而MT的含量在术后24h即升高,8周MT继续升高,缺血再灌注组MT达(314. 相似文献