Mutations in the androgen receptor gene of seven Chinese patients with complete androgen insensitivity syndromes

Androgenplaysanimportantroleinthenormaldevelopmentofmalephenotypeandtheregulationofvirilization.Theseactionsofandrogenaremediatedbytheintracellularandrogenreceptor(AR)containingN--terminal,DNAuandsteroidbindingdomains.MutationsintheARgenecancausevariousdegreesofandrogenInsensitivitysyndromes(AlS)inpatientswith46,XYkaryotype.ThephenotypeofpatientswithAlSrangesfromcompletefemaleexternalgenitalia(completeAlS,CAIS)overgenitalambiguity(partialAlS,PAlS)totheinfertilewithnormalmaleornearlys…     

用PCR-SSCP分析检测睾丸女性化综合征患者雄激素受体基因突变

为进一步探讨睾丸女性化（Ｔｆｍ）综合征患者发病的分子机理，并为研究雄激素受体（ＡＲ）结构与功能关系提供资料，应用银染聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析方法对４例Ｔｆｍ患者的ＡＲ基因８个外显子中的７个（Ｂ～Ｈ）分别进行了研究。结果表明，所有患者ＡＲ基因的上述外显子经ＰＣＲ扩增后均出现与外显子相应长度一致的条带，表明没有明显的缺失或插入突变。２例患者外显子Ｇ片段在行ＳＳＣＰ分析时分别有泳动变位，经ＤＮＡ双链循环测序证实两外显子各有一点突变（Ｖａｌ８６６Ｍｅｔ，Ｔ２９１９→Δ），这些突变均位于ＡＲ的雄激素结合区内。其中的缺失突变为国际上尚未报道过的新突变。研究表明，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析是检测ＡＲ基因突变的快速、简便、可靠的方法。     

2例睾丸女性化综合征患者雄激素受体基因中的突变

目的：研究２例完全型睾丸女性化综合征（ＴＦＭ）患者的外阴部皮肤成纤维细胞（ＧＳＦ）中的雄激素受体（ＡＲ）。结果：发现两患者ＡＲ的数量无明显改变，但一患者的ＡＲ亲和力明显降低。用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（单链构象多态性）方法对两患者ＡＲ基因８个外显子中的７个（Ｂ－Ｈ）分别进行分析，发现两患者ＡＲ基因外显子Ｅ均存在着泳动变位，ＤＮＡ序列分析证实两患者外显子Ｅ各有一点突变，分别使得编码第７４３位和第７５２位的氨基酸发生了改变，后一突变还造成了一Ｓａｕ３ＡⅠ酶酶切位点的消失。结论：结合ＡＲ功能改变及临床表型可以认为，两患者的性分化发育异常是由于两位点的突变所致     

用PCR—SSCP分析检测睾丸女性化综合征患者雄激素受体基…

为进一步探讨睾丸女性化（Ｔｆｍ）综合征患者发病的分子机理，并主研究雄激素受体（ＡＲ）结构与功能关系提供资料，应用银染聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析方法对４例Ｔｆｍ患者的基因８个外显子中的７个（Ｂ－Ｈ）分别进行了研究。结果表明，所有患者ＡＲ基因的上述外显子经ＰＣＲ扩增后均出现与外显子相应长度一致的条带，表明没有明显的缺失或插入突变。２例患者外显子Ｇ片段在行ＳＳＣＰ分析时分别有     

地塞米松抑制卵巢癌HO-8910细胞增殖机制的研究

目的 探讨地塞米松（dexamethasone,Dex)抑制人卵巢癌HO－8910细胞增殖的可能机制。方法 采用细胞计数法检测细胞增殖、流式细胞术测定细胞周期，同位素掺入半定量RT－PCR检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21/WAF1的表达水平。结果 Dex诱导HO－8910细胞发生G0／G1期停滞，使p21/WAF1 mRNA表达上调；糖皮质激素受体拮抗剂RU486可逆转细胞增殖和p21/WAF1表达的变化。结论 Dex对HO－8910细胞增殖的抑制可能与诱导p21/WAF1表达有关。     

前列腺癌患者雄激素受体N端AF1区的突变研究

目的　探讨雄激素受体 (AR)N端转录活化功能区 (AF1)突变与进展的关系。　方法采用PCR SSCP(单链构象多态性 ) DNA双链循环测序法对 2 7例前列腺癌 (PC)石蜡切片组织的ARN端AF1区突变进行检测 ,用DNA测序法确定PC组织AR基因外显子A中的CAG重复数目[(CAG)n]。　结果　在ARN端的AF1区证实了 2种错义突变 (Gly142Val和Asp2 2 1His) ,均存在于低分化的PC组织。 2例突变AR基因外显子A的 (CAG)n均为 17。　结论　在国人PC组织ARN端AF1区发现了 2种新的AR基因突变型 ,突变AR的 (CAG)n重复数目均低于平均水平 ,提示AR突变可能与PC进展有关     

前列腺癌组织雄激素受体基因突变的检测

目的：探讨雄激素受体（AR）基因突变与前列腺癌（PCa)发生发展的关系。方法：采用聚合酶链式反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）和异常片段的双链DNA直接测序,对27例PCa患者石蜡切片组织AR基因的8个外显子（多态性片段除外）进行检测。结果：27例中3例在A、D、G外显子分别显示SSCP异常,测序证实1例A外显子存在一错义突变（C^966→A,Ser296Arg)。结论：突变位于转录激活区,推测可改变AR的转录活性,与PCa的发展有关。     

金雀异黄素对高糖培养下大鼠系膜细胞外基质产生及TGF-β分泌的影响

目的探讨金雀异黄素对体外高糖培养下大鼠系膜细胞（MC）、细胞外基质（ECM）的产生及转化生长因子β（TGF-β）分泌的影响。方法实验分组：对照组：低糖DMEM培养液（不含金雀异黄素）;实验组：高糖DMEM培养液（分别含金雀异黄素0、1μmol／L、5μmol／L、10μmol／L、30μmol／L、50μmol／L）,各组分别培养12、24、36、48h。ELISA法检测细胞培养上清液Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白及TGF-β的含量,RT-PCR法检测TGF-βmRNA的表达。结果在实验的48h内,高糖可促进MC合成Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白,分泌TGF-β;高浓度的金雀异黄素（≥5μmol／L）可显著抑制ECM的产生及TGF-β分泌,作用具有时间、剂量依赖效应;且可抑制MCTGF-μmRNA的表达。结论在体外高糖条件下,一定浓度的金雀异黄素可抑制ECM的产生,并从蛋白和基因水平抑制MCTGF-β的表达。     

七例睾丸女性化综合征患者雄激素受体基因突变的研究

探讨睾丸女性化综合征发病的分子机理。运用聚合酶链式反应－单链构象多态性分析结合双链ＤＮＡ循环测序法，对７例ＴＦＭ患者的雄激素受体基因外显子Ｂ－Ｈ进行突变检测。发现３例患者分别在ＡＲ基因外显子Ｅ或Ｇ有错义突变，导致ＡＲ雄激素结合区氨基酸的改变。