ICR小鼠吸烟诱导肺部炎症模型的建立及其特征

目的：观察ICR小鼠对急性吸烟暴露的敏感性，建立ICR小鼠急性吸烟引起肺损伤的模型。方击：小鼠每天被动吸烟3次，一次暴露两支，持续20min，分别急性吸烟0d、1d、3d、7d，观察小鼠肺组织的支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数及分类计数、肺组织干湿重比，肺组织病理切片炎症情况、肺组织TNF—α含量、MMP-12含量，MPO活性，评价该品系小鼠对吸烟的耐受性与敏感性和适宜的暴露时间。结果：随着吸烟天数的增加，肺干湿重比、白细胞计数、MPO、MMP-12均呈时间依赖性上升（P〈0．01），以3d为最高。TNF—α吸烟1d即明显升高，吸烟7d时仍持续高水平。结论：ICR小鼠急性吸烟3d为急性炎症的高峰，之后迁延进入慢性炎症，本品系对于吸烟暴露的耐受性与敏感性均较佳，为急性吸烟建模的良好模型。     

乳腺癌根治术后早期化疗对患者临床预后的影响

目的:探讨乳腺癌根治术后不同时间开始化疗对患者临床预后的影响。方法:自2012年1月—2013年1月,前瞻性收集我院收治的乳腺癌患者100例,根据患者术后化疗时间,将患者分为观察组(开始时间3周)和对照组(开始时间3~8周)。主要观察指标包括临床疗效(无进展生存期、生存率和复发率)和安全性(治疗相关并发症和健康相关的生存质量)。结果:与对照组相比,观察组患者无进展生存期明显延长(P=0.049);3年复发率明显降低(20.00%vs.38.00%,P=0.047)。两组患者生存率无统计学差异(94.00%vs.92.00%,P=1.000)。观察组患者术后1年健康相关的生存质量显著高于对照组[(73.00±12.16)vs.(64.64±10.58),t=3.677,P=0.000]。两组患者主要治疗相关并发症包括骨髓抑制、贫血、腹泻、恶心和呕吐等差异均无统计学意义(P0.05)。结论:术后早期化疗有助于延长乳腺癌患者无进展生存期,改善患者术后生存质量。     

miR-4715-5p通过靶向MUC1基因对乳腺癌细胞迁移和增殖的影响

目的 分析微小RNA(miRNA,miR)-4715-5p在乳腺癌组织和细胞系中的表达水平,探讨其高表达对乳腺癌细胞迁移和增殖的影响及机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-4715-5p在乳腺癌组织和细胞系中的表达水平.在miR-4715-5p表达水平最低的乳腺癌细胞中,采用体外转染法分别转...     

长链非编码RNA DLG相关蛋白1-AS5在乳腺癌组织中的表达及对癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 分析长链非编码RNA(lncRNA)DLG相关蛋白（DLGAP）1-AS5对乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其分子机制。方法 采用癌症基因组图谱（TCGA）数据库分析乳腺癌组织及正常组织中DLGAP1-AS5表达水平,观察DLGAP1-AS5表达水平与乳腺癌患者生存期的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测4种乳腺癌细胞系：永生化乳腺上皮细胞(MCF-10A)、人乳腺癌细胞（MCF-7、HCC-1937）、人乳腺腺癌细胞(SK-BR-3)、人乳腺管癌细胞（BT-549）中DLGAP1-AS5表达水平。将DLGAP1-AS5过表达质粒或阴性对照质粒转染至MCF-7细胞,计为DLGAP1-AS5组和阴性对照组。采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）和Transwell实验检测MCF-7细胞的增殖和侵袭情况。采用starBase v3.0在线软件和双荧光素酶报告实验检测DLGAP1-AS5和miR-362-5p的靶向关系。qRT-PCR检测MCF-7细胞中miR-362-5p表达水平。蛋白质印迹实验检测MCF-7细胞中p38-丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路蛋白表达水平。结果...     

miR-5787通过靶向HSPG2基因对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响

目的:观察微小RNA(miR)-5787在乳腺癌组织及多种乳腺癌细胞系中的表达,分析过表达miR-5787对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响并探讨其可能的作用机制。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-5787在47例乳腺癌组织及癌旁组织、4种乳腺癌细胞系及正常乳腺上皮细胞中的表达。选择miR-5787表达...     

丹参酮IIA对乳腺癌细胞MCF10DCIS.com抑制作用的实验研究

目的:研究丹参酮IIA(TSN)对乳腺癌细胞MCF10DCIS.com的抑制作用及其与AMPK通路的相关性。方法:培养乳腺癌细胞MCF10DCIS.com,给与不同浓度丹参酮IIA(0.0001～1.0 mmol/L)进行干预,通过MTT实验测定TSN对细胞活力的影响,细胞克隆实验测定TSN对细胞增殖的影响,通过蛋白免疫印迹法测定AMPK通路相关蛋白的表达。结果:0.1～1.0 mmol/L的TSN培养乳腺癌细胞MCF10DCIS.com的细胞活力值分别为(61.1±9.4)%和(21.7±4.3)%,克隆实验细胞团块数的相对比值分别为(58.2±8.7)%和(16.4±5.7)%,与对照组相比均有统计学意义(均P0.05)。0.01mmol/L丹参酮IIA处理后,Sestrin2与p-AMPK蛋白相对表达值分别为(30.4±4.7)%和(32.5±5.7)%,与对照组相比均有显著统计学意义(P0.01)结论:丹参酮IIA对乳腺癌细胞MCF10DCIS.com的增殖具有抑制作用,其机制可能与AMPK通路的激活相关。     

lncRNA VIM-AS5在人乳腺癌细胞系中的表达及对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)VIM-AS5在人乳腺癌组织中表达的临床意义及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法 利用Lnc2Cancer 3.0数据库分析VIM-AS5在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌患者临床分期、生存期的相关性。RT-qPCR检测乳腺癌BT-549、MDA-MB-435、MDA-MB-231、CAL-51细胞中VIM-AS5的表达量。通过脂质体分别将VIM-AS5过表达质粒和阴性对照质粒转染至CAL-51细胞,依次记为VIM-AS5组和NC组。采用集落形成实验、划痕愈合法分别检测CAL-51细胞的增殖活力和迁移率。双荧光素酶报告基因实验验证VIM-AS5与miR-500a的靶向关系。RT-qPCR检测CAL-51细胞中miR-500a表达。Western blot检测CAL-51细胞中JAK/STAT3分子通路蛋白表达。结果 乳腺癌组织中VIM-AS5表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。VIM-AS5表达量与乳腺癌患者的临床分期呈负相关(P<0.01)。VIM-AS5低表达乳腺癌患者的生存期明显短于VIM-AS5高表达乳腺癌患者(P&...     

长链非编码RNAAC003973.4对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响研究

目的检测长链非编码RNAAC003973.4在人乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中的表达,探讨其对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测20例乳腺癌组织及配对的癌旁组织,以及检测乳腺癌细胞株（BT-549、MDA-MB-231、MCF-7、T47D）和正常乳腺上皮细胞株MCF-10A中AC003973.4的表达。取AC003973.4表达水平最低的乳腺癌细胞株转染过表达质粒以上调AC003973.4的表达,分别采用MTS法、Transwell迁移和侵袭实验检测AC003973.4对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;生物信息学法预测AC003973.4互补结合的miRNA及下游靶基因,qRT-PCR法检测miRNA和下游靶基因mRNA的表达,Westernblot检测相关蛋白的表达。结果乳腺癌组织AC003973.4表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.01）。乳腺癌细胞株AC003973.4表达水平明显低于人正常乳腺上皮细胞（均P＜0.05）,MCF-7细胞中AC003973.4的表达水平最低（P＜0.01）。上调MCF-7细胞AC003973.4的表达后,细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显减弱（均P＜0.05）。AC003973.4可互补结合miR-224-5p,miR-224-5p可互补结合PTEN。上调MCF-7细胞AC003973.4的表达后,miR-224-5p的表达均下调（P＜0.01）,PTENmRNA和蛋白的表达均上调（均P＜0.01）,细胞增殖相关蛋白CDK4、CyclinD1与细胞迁移相关蛋白Zeb-1、N-cadherin表达均下调（均P＜0.01）。结论乳腺癌组织和细胞株中AC003973.4表达水平降低,上调AC003973.4表达可减弱乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与调节miR-224-5p与PTEN基因的表达有关。