酵母双杂交方法筛选与NGF受体TrkA相互作用的新蛋白质

目的：寻找新的ArkA可能底物或调控蛋白，以深入认识TrkA下游信号转导机制，方法：将TrkA胞内域与LexA蛋白融合作为诱饵蛋白，应用酵母双杂交方法筛选人脑LexA cDNA文库，经β－半乳糖苷酶活性鉴定和测序分析进一步鉴别，获得阳性克隆。结果：明确阳性克隆中的TrkA^IC-BP1为一种新的TrkA结合蛋白，免疫共沉淀实验证实了TrkA^IC-BP1和TrkA在酵母中的相互作用，结论：首次筛选到TrkA结合蛋白－TrkA^IC-BP1，它可能在TrkA引起神经元分化的功能调控中起重要作用。     

脑胶质瘤患者的C型行为分析

目的：研究胶质瘤患者是否具有某些特殊的行为模式。方法：应用C型行为问卷对30例胶质瘤患者进行答题测量，并用相同的方式测量对照组。对测量结果统计分析。结果：胶质瘤组在焦虑、抑郁、愤怒、理智、情绪控制，乐观及社会支持各方面均与对照组差异有显著性。结论：研究胶质瘤患者具有显著的C型行为特征。     

特殊的颅内动脉瘤8例

<正> 我院自1990年至1995年收治8例特殊类型动脉瘤,治疗效果满意。现报告如下。 1 临床资料 1.1一般资料:在8例特殊颅内动脉瘤中,男性6例,女性2例。年龄最小21岁,最大68岁。病程最长2年,最短7天。8例中突发性头痛、呕吐、意识障碍4例;头痛4例。不完全性运动性失语2例,命名性失语1例,同侧海绵窦综合征1例,眼底水肿4     

整合子在鲍曼不动杆菌中的分布与结构分析

目的 了解我院临床分离的鲍曼不动杆菌的整合子携带情况,以及整合子与鲍曼不动杆菌的耐药相关性分析.方法 用VITEK2 compact全自动微生物分析系统及纸片扩散法检测临床分离的鲍曼不动杆菌对常用22种抗生素的敏感性.PCR扩增整合酶基因检测鲍曼不动杆菌携带整合子情况,同时对整合子可变区进行扩增及测序以其了解整合子耐药基因盒携带耐药基因的情况.结果 鲍曼不动杆菌呈多重酎药性.鲍曼不动杆菌对CPZ/SB酎药率为7.2%,对替加环素(15.4%)、左旋氧氟沙星(34.4%)、亚胺培南(54.3%)、比阿培南(49.4%)、阿米卡星(59%).对其他抗生素均在71%以上.104株中有73株菌株含Ⅰ类整合子(阳性率为70.2%).未有Ⅱ、Ⅲ类整合子扩增阳性菌株,且Ⅰ类整合子阳性株的耐药性均高于阴性株.Ⅰ类整合子基因盒序列分析表明我院鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合子携带aacA4、catB8和aadA1 3种耐药基因.结论 我院分离的鲍曼不动杆菌主要携带Ⅰ类整合子,且与多重耐药性密切相关.     

CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶的表达、定位及其抗药活性分析

目的:体外表达CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶(ESBL),并明确表达产物的分布及其抗药活性.方法:收集2006-2007年分离的产ESBL大肠埃希菌46株,采用PCR技术克隆目的基因,基因重组技术构建pET28a-CTX-M-38质粒,用BL21大肠杆菌作为宿主菌进行表达,测定培养基上清及菌体裂解液酶活性检测所表达ESBL的分布;采用液体稀释法检测所表达ESBL抗药活性.结果:PCR扩增条带约在900 bp位置处;测序结果与预测CTX-M-38相一致;菌体裂解液抗药活性较强;转化子对青霉素类、头孢一代、二代及多数三代药物均耐药;对碳青酶烯类药物稳定敏感;对头孢他啶及氨曲南体外敏感;对酶抑制剂除哌拉西林/他唑巴坦敏感外,其余表现为耐药;对庆大霉素、美满霉素、环丙沙星及左氧氟沙星亦具有耐药性.结论:CTX-M-38型ESBL表达成功,表达产物主要分布于表达菌体内,具有广泛抗药活性.     

CTX—M-14型超广谱β-酰胺酶原核表达载体的构建及其抗药活性分析

目的分析头孢噻肟-水解酶-14（CTX—M-14）型超广谱β-内酰胺酶（ESBL）型菌抗药活性,为临床治疗提供参考。方法收集分离产ESBL大肠埃希菌46株,采用PCR克隆目的基因,采用基因重组技术构建pET28a-CTX-M-14质粒,采用BL21大肠埃希菌作为宿主菌进行表达,采用液体稀释法检测其抗药活性。结果PCR扩增条带在约900bp位置处,序列分析结果显示其与目的基因符合;转化子对青霉素类、头孢一、二代及三代中头孢噻肟、头孢曲松耐药,对庆大霉素、四环素、喹诺酮类药物、碳青酶烯类敏感;对头孢他啶体外试验敏感,对加有酶抑制剂的抗生素稳定敏感。结论本研究成功构建了CTX—M-14型ESBL原核表达载体,且具有广泛抗药活性;此为临床合理选择治疗药物提供了理论依据。     

郑州地区ESBLs基因型分布研究

目的 明确ESBLs在郑州地区的基因型分布.方法 收集78株临床分离产ESBLs革兰阴性杆菌,混合后提取总质粒作为模版,用特异性引物进行PCR扩增.结果 显示TEM、SHV、OXA1、OXA20、CTX-M1、CTX-M14和CTX-M25的泳道有阳性条带.结论 郑州地区目前已有TEM、SHV、OXA和CTX-M四种亚型的ESBIs流行.     

颅脑损伤并发呼吸窘迫综合征19例

<正> 我科近6年来收治颅脑损伤763例,合并成人呼吸窘迫综台征(ARDS)19例,死亡10例,报道如下。 1 临床资料 本组中,脑挫裂伤并各型颅内血肿9例,脑干伤7例,合并胸外伤3例。本组均行手术治疗。早期呼吸频率平均22次/分,发生ARDS时增至41次/分。     

Dok4和Dok5 PTB结构域融合蛋白的表达和纯化

目的 :制备Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白。方法 :用PCR方法分别扩增编码Dok4、Dok5PTB结构域的cDNA ,并将其克隆入表达载体pGEX 4T 3中 ,转化大肠杆菌BL 2 1,构建成表达GST PTB融合蛋白的菌株。经IPTG诱导表达后 ,经Glutathion Sepharose 4B亲和层析柱纯化 ,用SDS PAGE进行分析 ,该融合蛋白的表达量超过菌体总蛋白的 2 5 %。结果 :获得重组的GST 4PTB和GST 5PTB融合蛋白 ,纯度在 95 %以上 ,产物得率约 75 %。结论 :成功制备高纯度Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白 ,为进一步研究磷酸化酪氨酸结合结构域 (PTB)的结构和生物学功能奠定基础