新单抗ZCH-7-2D3与白血病细胞的反应性及其临床意义

目的：观察新抗人白细胞分化抗原ZCH-7-2D3单克隆抗体（单抗）与白血病细胞的反应性及其在白血病免疫学诊断分型中的意义。方法：采用CD45设门和多色流式细胞术，对经30余种标准单抗业已定型的100例白血病患者新鲜的骨髓细胞或外周血标本进行流式细胞术分析。结杲：2D3抗原在急性淋巴细胞性白血病（ALL）病例中的阳性率（10／31）明显低于急性髓细胞性白血病（AML）（39／55，P〈0．01）；2D3在3例B系／髓系混合型白血病病例中均有表达，而在6例慢性粒细胞性白血病（CML）中不表达，在慢性淋巴细胞性白血病（CLL）中阳性率（3／5）与B系ALL病例中的阳性率（9／28）差异无显著意义（P=0．2389）。2D3在ALL各免疫亚型中的表达差异无显著意义（P=0．5632）；在AML各亚型中除2例AML—M6患者不表达外，其余AML亚型间无统计学意义（P〉0．05）。结论：单抗2D3主要与AML细胞反应，但在识别白血病细胞分化阶段上未发现特殊性。     

CAG方案在儿童急性髓系白血病中的应用

我院于2 0 0 1年4月～2 0 0 2年10月用CAG[阿糖胞苷(Ara C)、阿克拉霉素、G CSF]方案治疗儿童急性髓系白血病(AML) 6例(8例次) ,现报道如下。病例和方法1　病例　6例均为本院住院治疗的患儿,其中初治患儿3例,复发难治患儿3例,复发难治者均为经一线化疗药物按标准剂量[1] 2个疗程未获完全缓解(CR)或CR后12个月内复发者[2 ] 。为了探讨CAG方案治疗的机制,我们对该6例患儿CAG方案治疗前进行了细胞周期的测定。患者详细情况见表1。2　方法　Ara C 10mg/m2 ,每12h 1次,皮下注射,连用14d ;阿克拉霉素14mg/m2 ,每日1次,静脉注射,连用4d ;…     

非亲缘异基因脐带血造血干细胞移植治疗儿童白血病二例

造血干细胞移植(HSCT)是治愈血液系统恶性肿瘤的重要方法[1-3],异基因骨髓或外周血造血干细胞移植需要严格的HLA配型,否则,会导致严重的移植物抗宿主病(GVHD)而使移植失败[4];自体造血干细胞移植虽无GVHD的发生,但原发病复发的机会较高[4]。脐带血造血干细胞移植(CBT)是近年来应用的新的移植方法,由于脐带血中含有丰富的造血干细胞,因此,移植后能重建造血和免疫功能,从而达到治愈疾病的目的。此外,脐带血中的T淋巴细胞不成熟,对异基因组织细胞的耐受性较好,无需严格的HLA配型,且脐带血来源广泛,因此,特别适合于儿童移植[5-8]。最近…     

伴有t(5;11)的急性早幼粒细胞白血病一例

患儿,男,3岁7个月.于2006年7月因反复发热伴不规律腹痛1个月余入院.查体:体温37.2℃,心率128次/min,呼吸24次/min,血压110/68 mm Hg,神志清楚,呼吸平稳,面色稍苍白,皮肤无出血点及皮疹,全身浅表淋巴结未触及肿大,巩膜无黄染,咽部稍红,胸骨无压痛,心、肺未见异常,腹软,无触痛,肝、脾肋缘下未扪及,四肢关节活动正常,神经系统检查未见异常.     

急性白血病细胞中CD19的表达

目的观察CD19在急性白血病(AL)中的表达与分布,为白血病的诊断、鉴别以及导向治疗提供依据.方法采用27个荧光直标单克隆抗体(单抗)及CD45/SSC双参数设门多色流式细胞术对321例AL细胞进行免疫诊断和分型,并对CD19在各类型AL细胞中的表达情况进行分析.结果在116例B细胞系急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者中,CD19的阳性率(99.1%)明显高于B细胞系其它相关性抗原的阳性率;CD19在17例含B细胞系成分的杂合型白血病(HAL)中全部表达,而在29例T细胞系ALL和7例T/My HAL则均无表达;在152例急性髓系白血病(AML)中,仅11例(7.2%)CD19阳性,明显低于其在B细胞系ALL中的阳性率(P=0.001);CD22在B/My HAL的阳性率(12/15,80.0%)明显高于CD19 -AML(0/11,0%,P＜0.001).结论 CD19对B系ALL细胞的特异性较好,敏感性较高,是诊断B细胞系ALL较为可靠的表面标记,也可作为导向治疗B细胞系ALL的理想靶点.     

用移植物细胞模型评价CD+34细胞选择的效果

目的用移植物细胞模型评价免疫磁珠法进行CD34阳性细胞选择的效果.方法用荧光素Calcein-AM标记靶细胞后分别种入细胞株、骨髓(BM)或外周血干(祖)细胞(PBSC)中以建立模型;用免疫磁珠法对模型进行CD34阳性细胞选择,以流式细胞仪(FCM)进行选择前后的效果评价.结果模型Ⅰ(靶细胞加细胞系)、Ⅱ(靶细胞加BM)、Ⅲ(靶细胞加PBSC)经选择后CD+34细胞纯度分别为(94.54±0.93)%、(68.15±23.53)%、(57.18±9.23)%;富集倍数分别为7.9±0.1、10.4±4.0、8.2±1.3;回收率分别为(27.6±3.8)%、(44.4±13.1)%、(66.4±13.9)%.模型Ⅱ中肿瘤细胞的清除率为(1.82±0.51)个对数级(log);模型Ⅲ中T细胞的清除率为(2.48±0.38)log.结论移植物细胞模型能简便、准确、快速地评价CD34阳性细胞选择时的富集和净化作用.免疫磁珠法进行CD34阳性选择具有良好的CD+34细胞富集效果及肿瘤细胞和T细胞的清除效率.     

Targeting and internalization of sterically stabilized liposome modified with ZCH-4-2E8

Sterically stabilized liposome （SL） modified with 2E8 monoclonal antibody （2E8-SL） was prepared in order to evaluate its targeting ability and internalization efficiency against tumor cells with high expression of CD19.2E8 was coupled to the surface of SL using post-insertion technique. The shape of liposomes was observed under a transmission electronic microscope. The average size of liposomes was determined by using the Zetasizer instrument. The binding and internalization of 2E8-SL against tumor cells with higher expression of CD 19 were tested by flow cytometry and confocal microscopy. The mean diameter of 2E8-SL was 121.25 nm. 2E8-SL was stable after up to 24 days in various buffers. 2ES-SL showed specific binding to tumor cells with high expression of CD19, including B cells in peripheral blood mononuclear cells （PBMCs）. 2E8-SL could efficiently internalize into Nalm6 cells with CD19 high expression. It is suggested that 2E8-SL may serve as useful delivery carrier of anti-cancer drugs targeting to hematological malignant tumors with CD 19 high expression.     

人参皂苷Rh_2抗白血病多药耐药细胞K562/VCR作用研究

目的通过观察人参皂苷Rh2对人白血病多药耐药(MDR)细胞K562/VCR生长、凋亡的作用和逆转耐药的情况,探索该药在抗人白血病MDR方面的应用价值。方法将人参皂苷Rh2与K562、K562/VCR细胞共培养48 h后采用MTT法分析其对细胞生长的抑制率;将其与K562/VCR细胞于37℃孵育30 min后,采用An-nexin V和PI双染法在流式细胞仪上检测细胞凋亡情况;并观察其对K562/VCR细胞摄取柔红霉素(DNR)能力及细胞表面P-糖蛋白(P-gp)表达的影响;在DNR与K562/VCR培养体系中加入不同质量浓度人参皂苷Rh2,孵育48 h后观察人参皂苷Rh2对K562/VCR细胞耐药的逆转情况。结果人参皂苷Rh2可明显抑制K562和K562/VCR细胞的生长,并呈量效关系,人参皂苷Rh2对K562和K562/VCR的半数抑制浓度(IC50)分别为44.5、59.4μg/mL。K562/VCR经人参皂苷Rh2在37℃作用30 min后,细胞的凋亡明显增加,随人参皂苷Rh2质量浓度的增加,凋亡细胞的比例明显增加[人参皂苷Rh2300μg/mL,Annexin V+细胞(51.5±6.9)%]。K562细胞经长春新碱(VCR)诱导耐药后,P-gp表达率明显提高(从4.28%到93.80%),DNR摄取率减少,25μg/mL以上质量浓度的人参皂苷Rh2即可明显提高K562/VCR对DNR的摄取,但P-gp的表达无明显改变。同时,它可明显提高DNR对K562/VCR的杀伤率,50μg/mL人参皂苷Rh2可使K562/VCR对DNR的敏感性提高到原来的6.30倍。结论人参皂苷Rh2能抑制K562/VCR细胞生长,诱导其凋亡,还可以逆转K562/VCR的耐药,是一种具有广阔开发前景的抗白血病药物。     

急性白血病细胞CD19和CD20表达比较

本研究目的是观察CD19和CD20在急性白血病（AL）细胞中的表达与分布,为急性B系白血病靶向分子的选择提供合理依据.采用27个荧光直标单克隆抗体及CD45/SSC双参数设门多色流式细胞术对321例AL细胞进行免疫诊断和分型,并对CD19和CD20在各种类型AL细胞中的表达情况进行分析.结果表明,在116例B系ALL病例中,CD19持续稳定表达,其阳性率（115/116,99.1%）明显高于CD20（33/116,28.4%,P=0.001）;在17例含B系成分的混合型白血病（acute mixed lineage leukemia,AMLL）细胞中,前者的阳性率也明显高于CD20（P＜0.01）,而在29例T细胞系ALL和7例T/My HAL细胞中,两者均无表达;在152例急性髓系白血病（AML）细胞中,CD19和CD20阳性率均很低,分别为7.2%和2.0%;CD19和CD20在B-ALL及B/My AMLL组中的荧光强度差别有显著性（t=20.68,P＜0.001）;CD19和CD20的特异性分别为92.3%（132/143）和92.7%（38/41）,敏感性分别为99.2%（132/133）和28.6%（38/133）,前者敏感性明显高于后者（X^2=144.018,P=0.001）.结论：CD19在B细胞系细胞的各分化阶段上持续稳定表达,反应谱比CD20宽,特异性及敏感性均高,尤其是其敏感性显著高于后者.这提示CD19抗原分子可能成为治疗B系ALL的最佳靶点.     

自体外周血造血干细胞移植治疗小儿急性早幼粒细胞白血病二例

我们采用自体外周血造血干细胞移植 ( APBSCT )治疗了 2例急性早幼粒细胞白血病 ( APL )患儿 ,疗效较为满意 ,现报告如下。1　病例摘要2例患儿男女各 1,年龄分别为 8岁和 13岁 ,体重2 2 kg和 4 0 kg。确诊 A PL至移植时的时间分别为 7个月和 8个月 ,完全缓解 ( CR)时间 6个月和 6 .5个月 ,均经骨髓、免疫标记及染色体 [有 t( 15,17) ]检查确诊。采用全反式维甲酸 (分别服用 35d和 39d)加用柔红霉素(连用 2～ 3d)诱导缓解 ,随后予化疗巩固治疗 5～ 6个疗程 ,三联鞘内注射 3～ 4次。移植前均处于缓解状态 ,染色体检查未发现异常核型 ,骨…