神经管发育不良患儿及其核心家庭MTHFR基因A1298C多态性分布的研究

目的　通过对神经管发育不良 (NDTs)患儿及核心家庭MTHFR基因A1 2 98位点多态性分布的研究 ,探讨该基因多态性与NDTs之间的关系。方法　 2 0 0 0年 9月～ 2 0 0 2年 3月 ,40例 3～ 1 5岁NDTs患儿 (男 2 8例 ,女 1 2例 )及其中 2 6个核心家庭进行研究。应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析 (PCR RFLP)技术 ,分析MTHFR基因第 1 2 98位核苷酸基因型 (野生型、杂合型、突变纯合型 )的分布情况 ;并对 2 6个核心家庭进行以父母为对照的病例对照研究 ,计算传递失衡指数 (TDT)及基于单体型的单体型相对危险度 (HHRR)。结果　NDTs患儿、核心家庭与正常对照中均未发现纯合突变。基因型构成比采用 χ2 检验 ,NDTs患儿及患儿母亲野生型分别占 1 7.50 % ,1 1 .54 % ,杂合型分别占 82 .50 % ,88.46 % ,与正常对照之间差异无显著性意义 (分别为P >0 .2 5 ;P>0 .90 )。患儿父亲野生型占 30 .77% ,杂合突变型占 69.2 3 % ,低于正常对照 (P <0 .0 5)。等位基因频率比较采用u检验 ,患儿为 41 .2 5 % ,与对照间差异无显著性意义 (P >0 .0 5) ;患儿父母分别为69 .2 3 % ,88.46 % ,均高于正常对照 (P <0 .0 1 )。核心家庭分析结果 :TDT(χ2 ) =0 .36 ,P >0 .0 5 ;HHRR(χ2 ) =0 .369,P >0 .0 5。结论　MTHFR基因第 1 2     

喉鳞癌增殖细胞核抗原免疫组化研究

应用增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单克隆抗体Ｐｃ１０免疫组化ＡＢＣ法对８２例喉鳞癌的细胞增殖活性进行检测。结果表明，组织学恶性度高的肿瘤ＰＣＮＡ阳性细胞数明显多于恶性度低的肿瘤（Ｐ＜０．０１）。５年生存组的患者ＰＣＮＡ标记数明显低于５年内死亡组（Ｐ＜０．０１）。提示ＰＣＮＡ免疫组化标记可作为判断喉鳞癌恶性度及估计患者预后的指标。     

AgNOR计数与Wilms瘤临床分期、组织学类型和预后的关系

本研究证明AgNOR计数与Wilms瘤患者的预后有关。AgNOR值低于4者预后较好;高于6者预后极差。死亡组有22例(占44.9%)AgNOR平均值与存活组重叠,说明单纯用AgNOR计数来判断预后不十分可靠,因为临床分期和组织学类型也对预后有影响。AgNOR计数是一项有用的指标,但用于判断Wilms瘤患者的预后必须进行多因素分析。     

脑膜瘤第1、10、14和22对染色体的LOH和MI与相关因素分析

目的 研究脑膜瘤第1,10,14和22对染色体的LOH和MI及其相关因素,方法 对39例脑膜瘤用PCR方法检测D1S188,D10S187,D14S43和D22S1 4个位点的LOH和MI,探讨其与病理学表现,FCM及肿瘤复发等关系。结果 间变型脑膜瘤4个位点的LOH比率显著高于良性型;间变型D14S43 LOH也显著高于非典型型,4个位点LOH（＋）组DI均分别显著高于LOH（－）组,D1S188,D14S43和D22S1LOH（＋）组的超二倍体率均显著高于LOH（－）组,6例复发性脑膜瘤组,LOH（＋）者5例,显著高于初发性组,各组的MI未见显著性差异。结论脑膜瘤的D1S188,D10S187,D14S43和D22S1 LOH与肿瘤的发生和恶性生物学行为密切有关。     

凝血因子V基因Leiden 突变和凝血酶原基因G20210A突变与下肢深静脉血栓形成关系的探讨

目的 :探讨凝血因子V基因G16 91A突变 (Leiden突变 )和凝血酶原基因G2 0 2 10A突变与下肢深静脉血栓形成的关系。方法 :采用PCR RFLP技术对 86例下肢深静脉血栓形成患者和 10 0例正常对照的健康人群进行凝血因子V基因G16 91A突变和凝血酶原基因G2 0 2 10A突变检测。结果 :86例下肢深静脉血栓形成患者和 10 0例正常对照组中均未检出凝血因子V基因G16 91A突变和凝血酶原基因G2 0 2 10A突变。结论 :凝血因子V基因G16 91A突变和凝血酶原基因G2 0 2 10A突变可能不是中国汉族人群下肢深静脉血栓形成的主要风险因子     

异源双链分析和单链构象多态性分析在基因突变检测中的作用

评价异源双链分析(HET)和单链构象多态性分析(SSCP)在基因突变检测中的作用。 方法同时应用两种方法检测23例肺腺癌标本中p53基因和p16基因突变情况。结果用HET法检出6例p53基因突变和5例p16基因突变,用SSCP法检出3例p53基因突变和1例p16基因突变,联合应用HET和SSCP方法检出7例p53基因突变和5例p16基因突变。结论检测基因突变HET优于SSCP,联合应用HET和SSCP能提高基因突变检出率.     

散发性非息肉性大肠癌微卫星DNA不稳定性分析

为分析Ｄ２Ｓ４４１、Ｄ２Ｓ１１９和Ｄ２Ｓ１２３３个微卫星ＤＮＡ标记位点不稳定性,研究ＳＮＰＣＣ发生机理的分子基础。应用ＰＣＲ－ＳＳＬＰ扩增微卫星ＤＮＡ,聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对３１例临床诊断为散发性非息肉性大肠癌的肿瘤组织及其相应的正常组织的Ｄ２Ｓ４４１、Ｄ２Ｓ１１９和Ｄ２Ｓ１２３３个微卫星ＤＮＡ标记位点进行分析。结果显示,３１例中,２例在所检测的３个位点均存在微卫星ＤＮＡ不稳定性。提示微卫星ＤＮＡ不稳定性与散发性非息肉性大肠癌发生有关,可通过检测微卫星ＤＮＡ不稳定性筛选大肠癌高危人群,以便早期预防。     

应用反向PCR方法进行YAC末端的分离分析

目的建立有效分离酵母人工染色体（ｙｅａｓｔａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ，ＹＡＣ）末端的方法。方法根据反向ＰＣＲ原理，在分析ＹＡＣ载体ＤＮＡ序列的基础上，选用ＹＡＣ载体上存在切点的限制性内切酶酶解ＹＡＣＤＮＡ，通过连接反应形成环状ＤＮＡ分子，再用与ＹＡＣ载体两末端互补的引物进行扩增，扩增产物经进一步纯化后测序，即可得到ＹＡＣ末端的序列。结果用反向ＰＣＲ方法，分别从７７６Ｅ２、９６４Ｃ５、１１Ｄ８和８Ｄ１共４个ＹＡＣ分离得到各自的左右末端。结论该方法简便、有效，适用于所有的ＹＡＣ克隆     

GSTM1空白基因型与喉癌遗传易感性的研究

目的 探讨谷胱甘肽－S－转移酶M1（glutathione S-transferase M1,GSTM1)空白基因型与喉癌遗传易感性的关系。方法 应用聚合酶链反应对62例喉鳞状细胞癌患者和56例住院非肿瘤患者为对照的GSTM1基因型进行了检测，近吸烟指数（smoking index,SI)不同分析患癌.喉癌组的GSTM1空白基因型频率为72．58％，对照组为50％，两者差异有显著性（x^2=6.36,P=0.012)，比值比值为2．65（95％）可信限区间1.24-5.57)。在高吸烟剂量组（SI＞400），具有GSTM1空白基因型的个体患喉癌的相对危险度是4．68（95％CI为1．51－14．51）。结论 GSTM1是喉癌的易感位点，GSTM1空白基因型个体患癌风险增加，在喉癌发生中与吸烟具有协同作用。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变与山东汉族人群深静脉血栓形成的相关性

目的 研究亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因C677T突变与中国人深静脉血栓形成的关系。方法 采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性方法对山东汉族63例深静脉血栓形成患者和80名正常对照进行了MTHFR基因C677T突变检测，计算患者组与对照组的基因型频率，以及该突变与深静脉血栓形成的相关性。结果 患者组与对照组C／T杂合子频率分别为41.27%和43.75%；T／T纯合子频率分别为52.38%和36.25%。患者组突变频率较高（x^2＝6.372，P＜0.01，ORT／T＝4.552,95%可信区间：1.440-14.398;x^2=6.742,P=0.009）。结论 MTHFR基因C677T突变与山东汉族人群深静脉血栓形成有相关性。