非对称PCR-FP技术同步检测HSV-1/-2、CMV和EBV

目的应用非对称PCR-荧光偏振(FP)技术建立一种同步检测全血中4种主要疱疹病毒(单纯疱疹病毒1/2型,巨细胞病毒、EB病毒)的新方法。方法以人疱疹病毒属通用引物行非对称PCR,扩增从179例样本中抽提的DNA。PCR扩增产物与特异性单纯疱疹病毒1/2型(HSV-1/-2)、巨细胞病毒(CMV)和EB病毒(EBV)寡核苷酸探针混合物温育杂交,荧光偏振检测技术检测杂交液荧光偏振值,据荧光偏振值判断病毒感染类型,并以DNA序列测定结果为参照。结果与DNA序列测定的阳性检测符合率为100%,但DNA序列测定检测均未检出多重混合感染。非对称PCR-FP方法对HSV-1/-2检测的灵敏度达到1.0×10~3拷贝/ml,对EBV和CMV检测的灵敏度达到2.0×10~3拷贝/ml。结论本法对于4种主要疱疹病毒感染的筛查及预防、预后判断具重要价值。     

TDI-FP法检测肿瘤患者ERCC1 Asn118Asn基因多态性

目的建立一种可靠、敏感、全面的ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测新方法,用于预测肿瘤患者对铂类的耐药性。方法以ERCC1基因第4个外显子Asn118Asn的一对引物行PCR扩增227例临床样本DNA,将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应(TD I-FP)结合,应用探针杂交延伸反应对临床样本扩增产物进行ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测,并以DNA序列测定验证检测结果。结果227例临床样本DNA中,119例(52.4%)ERCC1 Asn118Asn基因为C/C纯合子(AAC)基因型,88例(38.8%)为C/T杂合子基因型,20例(8.8%)为T/T纯合子(AAT)基因型。但DNA序列测定法检出杂合子基因型仅33例。结论本研究初步建立了特异性较好、操作简便、无需标记探针的临床标本ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测新方法,有望用于肿瘤患者铂类耐药性的检测。     

多重PCR快速检测血清中HAVRNA和HBVDNA

多重ＰＣＲ快速检测血清中ＨＡＶＲＮＡ和ＨＢＶＤＮＡ肖乐义，阎小君，李陕区，郭宴海，苏成芝，侯瑜，刘君，陈远鑫（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词多重聚合酶链反应；甲型肝炎病毒；乙型肝炎病毒中图号Ｒ５１２．６约７０％病毒性肝炎为甲肝病毒...     

多重斑点金免疫测定法快速检测HAVHBV和HCVIgM的初步研究

多重斑点金免疫测定法快速检测ＨＡＶＨＢＶ和ＨＣＶＩｇＭ的初步研究肖乐义，阎小君，陈远鑫，李陕区，郭宴海，苏成芝，侯瑜，刘君（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词斑点金免疫结合试验；甲型肝炎病毒；乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒；免疫球蛋白Ｍ中...     

孕期高ABO血型抗体效价孕妇的药物干预效果观察

目的探讨夫妇血型不合孕妇产前IgG抗-A(B)抗体效价测定结果,指导临床对高效价孕妇进行药物干预,以防治新生儿溶血病的发生。方法自2010年9月—2012年9月,对来该院妇科进行产前检查的1756例孕妇夫妇进行ABO、Rh血型检测,对夫妇血型不合的孕妇做血型抗体筛选和抗体效价测定,对抗体效价≥1∶512的孕妇(干预组)进行药物干预,产后婴儿做HDN三项试验,与抗体效价≥1∶512未实施药物干预的39例孕妇(对照组)出生的新生儿比较,比较干预前后新生儿溶血病发生情况。结果 1756例孕妇中夫妇ABO血型不合的孕妇有409例,其中IgG抗-A(B)抗体效价≥1∶512的46例,干预组新生儿发生溶血6例(13.04%),对照组新生儿发生溶血29例(74.36%)。结论新生儿溶血病发生率与孕妇IgG抗-A(B)抗体效价呈正相关,对抗体效价高的高危孕妇进行药物干预,可有效降低新生儿溶血病的发生率。     

pLXSN-HPVL2-Angiostatin的构建及转染T细胞淋巴瘤细胞系的体外杀伤活性研究

目的　探讨人乳头瘤病毒 (HPV)感染相关疾病既具靶向性又能阻断局部血管生长的基因治疗新途径。方法　将血管生长抑制因子 (angiostatin)及HPV抗原基因同时克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN ,用PA3 17细胞包装、筛选 ,建立高滴度的感染性重组病毒产生细胞系 ,以重组病毒转染T细胞淋巴瘤Hut 78细胞系 ,在体外观察其对HPV感染阳性宫颈癌细胞的杀伤活性。结果　PCR及RT PCR检测显示获得了 pLXSN HPVL2 Angiostatin ,并成功转染Hut 78细胞系 ,镜下观察及MTT检测 ,显示了其对HPV阳性宫颈癌细胞的特异趋向及高杀伤活性。结论　pLXSN HPVL2 An giostatin及其成功转染的Hut 78细胞系为进一步研究HPV感染相关疾病的基因治疗提供了新途径     

免疫金渗滤法检测人乳头瘤病毒抗体IgG

人乳头瘤病毒 (HPV)对人类健康有广泛及严重的影响 ,需引起医学界及全社会高度重视 ,尽可能做到早期、全面的诊断。该病毒感染可致多种增生性病变 :良性、癌前性及癌性病变 [1 ]。近年的统计表明 ,我国每年新增宫颈癌病人在 1 3～ 1 5万人 ,而且年轻宫颈癌患者的上升趋势明显。宫颈癌患者年轻化的原因 ,与人乳头瘤病毒感染的增加关系密切。人乳头瘤病毒感染在过去常被认为是性病的一种 ,研究已证实 ,HPV的感染 5 0 %是由于性接触传播 ,而另一半则是因为交叉感染。尖锐湿疣是目前最常见的由该病毒 6,1 1型所致性传播疾病 [2 ] ,由于该病发…     

多重免疫斑点金法快速检测血清中HBsAg和HBeAg

多重免疫斑点金法快速检测血清中ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ阎小君，肖乐义，陈远鑫，李陕区，苏成芝，郭宴海，刘君，侯瑜（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词免疫斑点法；乙型肝炎表面抗原；乙型肝炎ｅ抗原中图号Ｒ３７３．２检测乙型肝炎病毒感染的血清...     

医学研究生药物基因组学教学探讨

该文主要分析了药物基因组学在研究生医学教育中的重要性和特点,从教学内容、手段和教学考核方式,提高教学质量和水平,开展教学科研实践活动等方面,对医学研究生的药物基因组学教学进行了初步探讨.