人胚胎肾小球系膜细胞培养与鉴定

肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC) 是肾小球内具有活跃功能的固有细胞,多种刺激因素均可使肾小球系膜细胞增生, 构成各种肾小球疾病的病理基础,进而因系膜基质增多而导致肾小球硬化.自1975年Fish等[1]首次成功培养分离GMC以来,国内外学者已将肾小球系膜细胞的体外培养作为研究肾脏细胞生物学及细胞免疫病理学的常用方法之一.由于肾小球系膜细胞培养方法各异[2～4],难度较大.为此,我们在借鉴国内外学者研究方法的基础上进行探索,成功地培养了人胚胎肾小球系膜细胞,现报告如下.     

中药苦参汤中氧化苦参碱的含量测定

将苦参汤浸膏经索氏提取，硅胶预滤柱精制后，用ＴＬＣ－比色法测定其中氧化苦参碱的含量，测定波长λ＝４１８ｎｍ，回归方程Ｃ＝１５．８８４５ａ－０．０７５７８，ｒ＝０．９９９２，ｎ＝３。     

妇炎消泡腾片体外抑菌实验

妇炎消泡腾片是根据清·高秉钧的“苦参场”化裁，由苦参、蛇床子、黄柏等多味中药经现代科学方法研制而成的新型阴道用泡腾缓释制剂，已获卫生部批准现正进行Ⅱ期临床研究。     

三七总皂苷对大鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞周期的影响

目的:观察三七总皂苷(total Panax Notoginseng Saponins,tPNS)对体外培养的SD大鼠肾小球系膜细胞(Mesangial cells,MCs)增殖以及细胞周期的影响,以探讨tPNS在防治肾小球炎症和硬化中的作用及可能机理。方法:分离培养SD大鼠MCs,分为5组(n=8):空白对照组、血清刺激组、3个不同浓度(100,200,400μg/mL)的tPNS干预组。分别采用MTT法、细胞毒检测及流式细胞术观察大鼠MCs增殖及细胞周期的变化。结果:tPNS呈量效依赖抑制MCs增殖;降低S G2/M期细胞比例,且对MCs均无明显细胞毒性。结果:三七总皂苷通过减少DNA合成期(S期)细胞数量,抑制大鼠MCs增殖,而非依赖于诱导细胞凋亡和细胞毒性。     

HPLC法同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛

[目的]同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的含量。[方法]采用HPLC法,ODS色谱柱,流动相为乙腈∶水=27∶73,检测波长220nm。[结果]杠柳毒苷线性范围0.05～1.6μg,r=0.9994;4-甲氧基水杨醛线性范围0.23～7.4μg,r=0.9993;杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的精密度分别为1.2%、3.0%,重现性分别为1.4%、2.8%,加样回收率分别为100.2%、99.8%。[结论]本法简便、准确,可同时测定香加皮中的杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛。     

奥美拉唑四联短程根治幽门螺旋杆菌阳性消化性溃疡的临床分析

目的观察奥美拉唑四联根除幽门螺旋杆菌(Hp)阳性消化性溃疡的临床疗效及安全性。方法98例经14C尿素呼吸试验(14C-UBT)及血清Hp-Ab测定2项阳性并经电子胃镜证实为消化性溃疡的患者,采用奥美拉唑、丽珠得乐冲剂、克拉霉素和甲硝唑四联短程治疗。结果Hp根除率94.90%,溃疡愈合率90.81%,总有效率92.86%。结论奥美拉唑四联能有效的根除Hp,对消化性溃疡有较高的治愈率和症状缓解率,且副作用小的特点。     

雷公藤内酯醇对AngⅡ介导的大鼠GMC增殖的影响

目的:观察不同剂量雷公藤内酯醇对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的肾小球系膜细胞增殖的影响,探讨其可能机制。方法:分离培养大鼠GMC,用10-6mol/LAngⅡ刺激GMC,将培养的大鼠GMC随机分为5组:正常培养对照组、AngⅡ刺激组、AngⅡ和3种不同浓度(15、10、5μg/L)的雷公藤内酯醇共孵育组。分别采用MIT法及流式细胞术检测大鼠GMC增殖及细胞周期的变化。结果:雷公藤内酯醇能抑制AngⅡ介导的大鼠GMC增殖,降低S G2/M期细胞比例,其中以高浓度雷公藤内酯醇作用最强(P<0.01)。结论:雷公藤内酯醇可能通过减少DNA合成期(S期)细胞数量,抑制大鼠GMC增殖。     

HPLC测定退热颗粒中连翘酯苷含量

退热颗粒是由连翘、大黄、薄荷、厚朴、青蒿、藿香等中药组成,具有疏风解表、抗炎退热、健脾和胃、清热导滞之功效。经多年临床用于外感风寒食积内热所致的小儿发热,有显著的治疗作用。其中,连翘为方中君药,其活性成分含量直接关系到颗粒的质量。连翘化学成分主要为苯乙醇苷类的连翘酯苷、连翘酚;木脂素类的连翘苷;五环三萜酸类的齐墩果酸以及含量很高的挥发油类等[1]。以前在考察连翘的提取、分离、质量标准是以连翘苷含量作为....     

GC-MS鉴别清热抗感颗粒中青蒿、荆芥穗和薄荷

[目的]采用气相色谱—质谱法(GC-MS)同时鉴别清热抗感颗粒中的青蒿、荆芥穗和薄荷。[方法]采用SPB-5(30m×0.25mm×0.32μm)MS弹性石英毛细管柱,程序升温,以EI离子源和四极杆质量分析器进行分析。以清热抗感颗粒与青蒿、荆芥穗、薄荷的挥发油的总离子流色谱图(TIC)图谱相比较。[结果]从清热抗感颗粒中提取的挥发油中鉴别出来自青蒿的α-愈创木烯、金合欢烯、芹子烯等,来自荆芥穗的胡薄荷酮和来自薄荷中的薄荷醇等主要挥发性成分。[结论]GC-MS可同时鉴别复方中药制剂清热抗感颗粒中含挥发性成分的组成药味。     

厄贝沙坦对血管紧张素Ⅱ介导的大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的观察不同剂量厄贝沙坦(Irb)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的肾小球系膜细胞(MCs)增殖及细胞周期的影响,探讨Irb抑制MCs增殖的可能机制。方法分离培养大鼠MCs,用10-6mol/LAngⅡ刺激MCs,将培养的大鼠MCs随机分为空白对照组、AngⅡ刺激组、高浓度Irb组(10-5mol/L)、中浓度Irb组(10-6mol/L)、低浓度Irb组(10-7mol/L)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法及流式细胞术检测大鼠MCs增殖及细胞周期的变化。结果AngⅡ刺激组A值显著高于空白对照组,而高、中、低浓度Irb组A值均明显低于AngⅡ刺激组,且浓度越高作用越明显;AngⅡ刺激组较其他各组G0/G1降低,(S G2)/M升高,而高、中、低浓度Irb组较AngⅡ刺激组G0/G1明显上升、(S G2)/M明显降低,且浓度越高作用越明显;10-7～10-5mol/LIrb对MCs无明显细胞毒性作用。结论Irb可能是通过阻断AT1R介导的MCs的有丝分裂、增生及蛋白合成,从而抑制MCs的增殖。