Pervanadate对大鼠类I型糖尿病的影响

钒盐衍生物 (ｐｅｒｖａｎａｄａｔｅ)在离体研究中表现出多种明显的类胰岛素效应 ,包括促脂质生成 ,促蛋白合成和抗脂质分解等 ,但其在体研究的报道并不多见。本研究旨在观察ｐｅｒｖａｎａｄａｔｅ对链脲菌素 (ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ ,ＳＴＺ)所致大鼠类Ｉ型糖尿病的血糖水平的影响 ,并探讨其可能机制 ,以期为糖尿病的研究和治疗提供新的资料。材　料　和　方　法1　动物模型雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,体重 1 4 0 - 1 60ｇ ,ＳＴＺ(Ｓｉｇｍａ)溶于 0 1ｍｏｌ/Ｌ柠檬酸缓冲液 (ｐＨ 4 5)中 ,按 65ｍｇ/ｋｇ体重尾静脉一次注射复制类Ｉ型…     

人α-防御素-1(α-HNP-1)基因乳腺定位表达载体的构建及表达

目的:将人α-防御素-1(α-HNP-1)基因与山羊β-乳球蛋白(Beta-Lac-toglobulin,BLG)基因5’调控区序列融合,构建α-HNP-1基因的乳腺定位表达载体并对其进行检测。方法:用PCR方法获得α-HNP-1基因片断并克隆于pMD18-T载体,经DNA测序证实α-HNP-1基因序列无误后,再将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1-HNP-1重组质粒。用PCR方法扩增出BLG基因5’区调控序列并克隆到pcD-NA3.1-HNP-1中,构建乳腺定位表达载体pcDNA3.1-BLG-HNP-1,该载体经脂质体包裹后,经乳腺导管注入妊娠中后期大鼠乳腺中进行表达。结果:经酶切鉴定和DNA测序分析证实重组质粒载体pcDNA3.1-BLG-HNP-1构建正确,经ELISA检测,大鼠乳汁中有α-HNP-1表达,其48h表达量为27.67ng/ml,72h表达量为49.00ng/ml。结论:成功构建了α-HNP-1基因乳腺定位表达载体并最终在乳腺获得一定量表达,说明乳腺导管注入法是一种较理想的评价乳腺特异表达载体的可行性方法。     

p62~(dok)蛋白氨基酸和cDNA序列测定和分析

目的 :分析p6 2 dok氨基酸和cDNA序列 ,探讨p6 2 dok酪氨酸磷酸化及其与p2 1ras鸟苷三磷酸酶激活蛋白(p2 1rasGAP)的关系。方法 :从过渡表达人类胰岛素受体的中国仓鼠卵巢细胞 (CHO/IR细胞 )中提取、纯化p6 2 dok,进行微肽序列分析 ,设计相应引物PCR、克隆cDNA并测序。利用免疫沉淀和蛋白免疫印迹检测p6 2 dok是否存在酪氨酸磷酸化及与p2 1rasGAP的关系。结果 :p6 2 dokcDNA由 186 3bp组成 ,编码 481个氨基酸 ,含 15个酪氨酸残基 ,富PXXP基序 ,并有一个pleckstrin同源区。当p6 2 dok酪氨酸磷酸化后 ,可与p2 1rasGAP相结合。结论 :p6 2 dok可能是一种新的信息分子 ,并通过p2 1rasGAP参与胰岛素信号转导系统中RAS/MAPK径路的调节。     

缺血预处理大鼠心肌MDA含量SOD和CAT酶活性的变化

实验采用雄性ＳＤ大鼠心脏缺血再灌注模,观察缺血预处理心肌组织ＭＤＡ含量、ＳＯＤ和ＣＡＴ酶活性的变经。结果表明：缺血预处理组大心肌ＳＯＤ、ＣＡＴ活性显著上升,ＭＤＡ含量显著减少。以上结果提示：缺血预处理对大鼠心脏的保护作用中能是通过提高ＳＯＤ、ＣＡＴ酶活性,减少脂质过氧化反应而实现的。     

大鼠心脏腺苷预处理—ATP酶活性及梗塞范围变化的图像分析

应用注人腺苷的前质－硫酸腺嘌呤复制的大鼠心肌预处理与经典缺血预自理的对比观察，探讨腺苷预处理效应。方法：实验采用体重为２５０－３００ｇ雄性ＳＤ大鼠４８只，分４组，每组１２只，即正常对照组，缺血再灌组；经典缺血预处理组；硫酸腺嘌呤预处理组。     

AT_2受体cDNA重组质粒转染入培养的大鼠VSMC

目的 :将构建的AT2 RcDNA重组质粒转染到培养的大鼠血管平滑肌细胞 ,为研究AT2 R对血管平滑肌细胞生长的影响提供实验基础。方法 :扩增、纯化重组质粒后 ,用脂质体介导法将重组质粒转染入培养的大鼠血管平滑肌细胞 ,分别用AT2 RmRNA原位杂交、AT2 R抗体免疫组化的方法从RNA和蛋白水平检测转染效果。结果 :原位杂交显示部分细胞浆棕黄色阳性反应 ,显示转染率为 9% ,免疫组化结果显示部分血管平滑肌细胞膜上有AT2 R蛋白存在。结论 :成功将AT2 RcDNA重组质粒转染到培养的大鼠血管平滑肌细胞中。转染后AT2 R能在大鼠主动脉平滑肌细胞表达的现象为进一步研究AT2 R对成年大鼠血管平滑肌细胞生长、凋亡的影响提供了实验基础     

硫酸腺嘌呤预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

观察大鼠心肌缺血预处理及硫酸腺嘌呤预处理心肌细胞色素氧化酶（ＣＣＯ）的活性变化，并探讨其心肌保护机理，用３，３’－二氨基联苯胺（ＤＡＢ）的Ｓｅｌｉｇｍａｎ法检测ＣＣＯ，依Ｒｉｄｉｔ值行显性检验，实验表明，心肌缺血再灌注组ＣＣＯ损伤性反应明显，经典缺血预处理组，硫酸腺嘌呤预处理组ＣＣＯ损伤性反应较之明显减轻（Ｐ〈０．０５）。结果提示：经典缺血预处理，硫到腺嘌呤预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作     

注重观察分析能力提高综合素质

在 3年的病理生理成人教育实验考核的教学实践基础上 ,针对护理专业成人教育的特点 ,形成了一套行之有效的短期病理生理实验考核方案。利用系列性缺氧实验 ,收到了良好教学效果 ,通过以学生为主体的启发式教学 ,达到提高学员观察、分析问题能力和综合素质的目标 ,为护理成人教育班学员适应现代护理模式的转变奠定了一定的基础。     

硫酸腺嘌呤预处理缺血再灌注大鼠心脏梗塞面积、心功能和心脏胶原的变化

探讨硫酸腺瞟呤心脏预处理的方法、效应。方法：采用雄性ＳＤ大鼠３２只,分为４组,即假手术对照组（ＳＣ）、缺血再灌组（Ｉ／Ｒ）、经典缺血预处理组（ＩＰＣ＋Ｉ／Ｒ）、硫酸腺瞟呤预处理组（ＡＳＰＣ＋Ｉ／Ｒ）。通过监测心肌梗塞面积、心功能和心脏胶原的变化评估预处理效应。结果：ＩＰＣ＋Ｉ／Ｒ、ＡＳＰＣ＋Ｉ／Ｒ与Ｉ／Ｒ组相比较,均能明显缩小梗塞面积（Ｐ<０．０１）,改善左心室功能（Ｐ＜０．０１）,使心脏胶原保存良好。结论：大鼠心脏硫酸腺瞟呤预处理能复制出与经典缺血预处理相类似的效应,其机制似与扩张冠状动脉、改善微循环有关。     

缺血预处理抗缺血再灌注心肌间质损伤的实验研究

目的：观察缺血预处理（ＩＰＣ） 对大鼠缺血再灌注心肌间质胶原及心肌功能结构关系的影响,以进一步探讨ＩＰＣ 对心肌的保护作用。方法：实验采用体重（２５０ ±３０）ｇ 雄性ＳＤ 大鼠２４ 只,分３ 组,每组８ 只,即假手术对照（ＳＣ）组;缺血再灌注（Ｉ／Ｒ） 组和缺血预处理（ＩＰＣ） 组。用超微结构立体计量及羟脯氨酸浓度测定观察心肌间质胶原变化,多道记录仪测量心功能指标,透射电镜观察心肌超微结构。结果：Ｉ／Ｒ 时心肌间质胶原浓度显著低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） ,心肌超微结构损伤严重,左室功能明显低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） 。ＩＰＣ 组心肌超微结构破坏明显低于Ｉ／ Ｒ 组。同时,心肌间质胶原浓度、胶原纤维线密度及左室功能指标明显高于Ｉ／Ｒ 组（ Ｐ＜ ０－０５ ,Ｐ＜ ０－０１） 。结论：ＩＰＣ 的心肌保护作用不仅表现在对心肌细胞上,而且对心肌间质也有重要的保护作用。