实时荧光定量PCR检测小鼠脑组织中3-羟基丁酸受体基因PUMA-G的转录表达

[摘要] 目的 检测小鼠海马、下丘脑、额叶皮质和颞叶皮质组织中的3-羟基丁酸和烟酸受体基因PUMA-G（protein upregulated in macrophages by IFN-g）的转录表达。方法 采用试剂盒法提取脑组织总RNA,分光光度法测定RNA的含量和纯度,变性凝胶电泳检测RNA的完整性,实时荧光定量PCR技术检测PUMA-G的转录表达。结果 与阳性对照组（心肌组织）一样,PUMA-G在小鼠海马、下丘脑、额叶皮质和颞叶皮质组织中均有转录表达,其循环阈值（cycle threshold, Ct）低于40个循环数。但是各种脑组织中的转录表达水平不同,其中下丘脑的表达量最高与阳性对照组（35.15±0.31）相似,其Ct值为35.39±0.57,而颞叶皮质中的表达最低,其Ct值为38.67±0.90,海马和额叶皮质的Ct值分别为37.59±0.60和37.75±0.51。结论 通过实时荧光定量PCR技术检测到PUMA-G在小鼠脑组织中的转录表达。     

3-羟基丁酸衍生物对PC12细胞凋亡的保护作用

目的：观察3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯对PC12缺血清诱导凋亡细胞的保护作用。方法化学法降解聚羟基丁酸酯制备3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯。培养PC12细胞,以含血清培养组细胞为阴性对照组,缺血清培养组细胞为阳性对照组,以在缺血清条件下添加不同浓度3-羟基丁酸甲酯或3-羟基丁酸乙酯细胞为样品组,通过形态学观察法、噻唑蓝（ MTT）法检测各组细胞形态及活性变化。结果与阴性对照组比较,阳性对照组细胞出现大量凋亡,形态变小变细,活性降低。样品处理组细胞活性不同程度提高,低浓度（0.01和0.001 mg·mL-1）3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯对凋亡细胞有保护作用,浓度为1 mg·mL-1时效果最好。结论通过化学法能够制备高纯度3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯,上述两种样品对缺血清诱导凋亡的PC12细胞有保护作用。     

番石榴黄酮提取液对HeLa细胞及Ec109细胞生长的影响

目的研究番石榴黄酮提取液对HeLa细胞和Ec109细胞生长的抑制作用。方法以番石榴叶和果实的粗黄酮提取液为受试液,采用体外细胞培养法,MTT法检测其对HeLa及Ec109细胞的生长抑制率。结果番石榴叶或果实的粗水溶性黄酮液和粗醇溶性黄酮液,均能较强抑制两种癌细胞生长。5.000 mg/L的番石榴叶粗水溶性黄酮抑制HeLa细胞生长作用最大,抑制率达70.84%;0.100 mg/L的叶粗醇溶性黄酮抑制Ec109细胞生长作用最大,抑制率达69.95%。结论番石榴粗黄酮液在体外可显著抑制HeLa细胞和Ec109细胞的生长。