王棕花粉过敏原基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

目的 克隆并表达王棕花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin).方法 利用RT-PCR结合RACE技术克隆王棕花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析.然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个王棕花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western blot检测其IgE结合活性.结果 克隆获得了王棕花粉profilin的全长基因,由675个碱基组成,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸.经分析,这个序列编码的蛋白为小分子质量酸性蛋白,等电点为4.86,相对分子质量(Mr)约为14.2×103.此序列已被GenBank收录,登录号为EF173599.重组王棕花粉profilin在大肠杆菌中高效表达,进一步经Ni2+亲和层析柱纯化后经Western blot检测具有良好的免疫学活性.结论 成功克隆和表达了王棕花粉profilin,为王棕过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础.     

白纹伊蚊AL-100 30 ku蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建

目的克隆白纹伊蚊主要过敏原AL-100 30 ku蛋白基因,并构建其原核表达载体。方法RT-PCR克隆白纹伊蚊主要过敏原AL-100 30 ku的全长基因,设计简并引物,扩增白蚊伊蚊30ku的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体。结果成功克隆白纹伊蚊主要过敏原30ku基因并构建其原核表达载体。该基因含有长度为816bp的开放阅读框,编码271个氨基酸。该蛋白质的分子质量单位为28.33ku,等电点为4.04,编码序列与数据库中已知的白纹伊蚊30ku基因的同源性为99％。结论成功克隆了白蚊伊蚊主要过敏原30ku基因并构建了原核表达载体,为白纹伊蚊主要过敏原30ku蛋白的重组表达和免疫活性鉴定等奠定了基础。     

动脉硬化分级与血压,血脂关系的探讨

动脉粥样硬化是诱发心肌梗塞、脑中风等严重疾病的主要原因。近年来,流行病学和临床医学研究结果均表明高血压、高血脂是动脉粥样硬化发生的主要危险因素。目前国内外均以眼底检查了解和判断动脉硬化的状态,为此本文选择963例动脉硬化Ⅰ级患者,292例动     

豚草花粉过敏原的分析、鉴定与纯化

目的：对豚草花粉变应原蛋白进行分析、鉴定与纯化。 方法：提取豚草花粉粗提液,SDS-PAGE分离其蛋白组份并测定分子量,Western-blotting鉴定其变应原组份,通过离子交换层析对花粉变应原进行初步纯化和免疫印迹鉴定。 结果：豚草花粉有30条蛋白带,其中主要条带有9条,70kDa、40kDa为其特异性变应原。经离子交换层析纯化出豚草花粉相对分子量为40 kDa的变应原主要分布在Ⅰ峰。 结论：豚草花粉粗提液中主要变应原为 70 kDa、40kDa蛋白组份。     

奶牛主要过敏原β-乳球蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建

目的 克隆奶牛主要过敏原β-乳球蛋白(BLG)基因及其原核表达载体的构建.方法 RT-PCR克隆奶牛主要过敏原BLG的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增奶牛BLG基因的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体.结果 克隆了奶牛主要过敏原BLG基因,且构建了其原核表达载体.该基因含有长度为537 bp的开放阅读框,编码178个氨基酸.该蛋白质的相对分子质量为19 883,等电点为5.14(GenBank数据库中的登录号为EU883598).序列同源性分析发现其与数据库中已知的BLG基因同源性很高.结论 成功克隆了奶牛主要过敏原BLG基因及其原核表达载体的构建,为进一步奶牛主要过敏原BLG的重组表达和免疫活性鉴定等奠定基础.     

黄玻璃眼镜治疗双眼功能性弱视

黄玻璃眼镜治疗双眼功能性弱视陆骏青牟莉邬玉兰尹建廷（附属医院眼科）（徐州市公费医院眼科）（徐州市鼓楼医院眼科）关键词双眼弱视黄玻璃眼镜治疗应用中图法分类号Ｒ７７８．１Ｒ７７７．４根据视细胞对５４０～５８０ｎｍ光敏感的特性，以及黄玻璃去掉蓝光，减少色象...     

Ca2+离子对榛子过敏原Cor h 1二级结构和抗原活性影响研究

目的:研究Ca2+离子对非CaBPs蛋白类过敏原二级结构和抗原活性的影响。方法:以重组榛子主要过敏原Cor h 1为研究对象,用圆二色谱(CD)研究了系列浓度的Ca2+和EDTA各自存在情况下,不同蛋白浓度溶液中rCor h 1二级结构的变化及规律,并以榛子过敏患者血清为一抗,用ELISA实验分析了Ca2+和EDTA对rCor h 1抗原活性的影响。结果:在高浓度rCor h 1溶液中Ca2+的加入可以引起椭圆率的增加,而在低浓度的rCor h 1溶液中则引起椭圆率的降低;EDTA在高浓度和低浓度的rCor h 1溶液中均能引起rCor h 1二级结构相对含量的降低;椭圆率增加(或降低)的幅度与Ca2+、EDTA终浓度成正比。ELISA实验表明Ca2+和EDTA都能显著降低rCor h 1的抗原活性。结论:Ca2+离子可以显著影响rCor h 1的二级结构,降低其抗原活性,为非CaBPs蛋白类低致敏原的研究奠定了较好的前期研究基础。     

小鼠晶状体和角膜对SOD吸收状况的实验研究

白内障在全世界致盲病中居首位 ,目前尚无特效药物 ,治疗仍以成熟期手术摘除为主。由于在许多发展中国家有大量白内障患者不能及时手术而出现白内障的高患病率[1 ] 。如果能用药物控制其发展 ,使白内障完全成熟推迟 10年发生 ,那么需要手术治疗的患者可明显下降。因此 ,抗白内障药物的研究已成为眼科防盲的重点之一。为寻找治疗白内障的有效药物 ,探索其作用机制 ,我们于 1998年 5月观察了超氧化物歧化酶 (SOD)滴眼液对ICR小鼠晶状体 ,角膜吸收状态 ,现将结果报告如下。材料和方法一、材料 :(一 )SOD滴眼液的配制方法 :磷酸二氢钠 16 0m…     

徐州市中学教师老年性白内障调查

随着感染性眼病的减少和人口平均寿命的延长,老年性白内障已成为主要致盲眼病。1989年10月至1990年6月,我们对徐州市部分41岁以上中学教师进行老年性白内障发病情况调查,现将结果报告如下。1对象和方法1．1对象为徐州市41岁以上中学教师,探眼视力7,眼部无其他病I卫改变者。受检者共2002人,其中男性1709人,文性953入。1．2方法询问病史,查双眼深眼视力,在原瞳孔下进行裂隙灯显微镜检查,观察晶体有无混浊,混浊形态及部位、颜色、大小,分别记录。常住查眼底,以排除眼底疾患所致视力障碍。老年性白内障的诊断以1982年世界卫生组织…