冻存对大量分离的人肝细胞色素氧化酶P4503A4活性的影响

成功的冻存使人肝细胞有可能用于暂时替代肝脏治疗急性肝衰竭和多次、反复治疗肝代谢性疾病.P4503A4是肝细胞色素P450氧化酶系中重要成分,在内外源化合物的代谢中起重要作用,包括环孢霉素、FK506[1].所以,该酶可衡量肝细胞冻存后功能保存,对肝移植后肝功能检测有重要意义.我们用高效液相色谱法(HPLC)测定P450A4酶活性,观察冻存对大量分离的人肝细胞P4503A4酶活性的影响.     

术前化疗后结直肠癌组织中Fas/FasL和survivin的表达

目的探讨化疗后结直肠癌组织Fas/FasL和survivin的表达情况及两者之间的相关性。方法采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL法)和免疫组化方法,测定化疗后和未化疗两组各16例结直肠癌患者肿瘤的原位凋亡(AI)、原位增殖(KI)及survivin表达,运用流式细胞仪测定肿瘤细胞的细胞周期、Fas/FasL表达,用双抗体ELISA法检测患者血清可溶性Fas/FasL(sFas/sFasL)表达。结果化疗组结直肠癌患者肿瘤细胞的AI及Fas/FasL均较对照组高,KI、G2/M期细胞、sFas及survivin较对照组低,差别有统计学意义(P<0.05)。结论化疗通过诱导结直肠癌细胞凋亡及阻止细胞进入G2/M期从而抑制癌细胞的生长。Fas/FasL系统与结直肠癌细胞凋亡、增殖调控有关。survivin阳性表达下降程度可作为化疗有效的标志之一。     

磷脂酶Cε1的过表达可抑制结肠癌SW6 20细胞的迁移并诱导其凋亡

目的:探讨磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1,PLCE1)基因过表达对结肠癌细胞迁移、细胞周期及凋亡等生物学特性的影响。方法:采用脂质体转染的方法建立PLCE1过表达的SW620细胞株,实验分为3组:亲本细胞组(未转染基因),对照组[转染含绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein,GFP)的空质粒],实验组(转染质粒pcDNA-DEST53-PLCE1)。分别采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQPCR)和蛋白质印迹法检测PLCE1 mRNA和蛋白在SW620细胞中的表达;Transwell小室法检测PLCE1过表达对SW620细胞迁移能力的影响,FCM法检测对细胞周期及凋亡率的影响,DNA Ladder法检测对细胞凋亡的影响。结果:PLCE1过表达可抑制结肠癌SW620细胞的迁移能力,实验组迁移细胞数为(8.80±1.72)个,而亲本组和对照组分别为(32.6±2.42)和(32.2±3.25)个,3组间差异有统计学意义(P<0.01)。PLCE1过表达可导致结肠癌细胞周期G1期延长,并出现凋亡。结论:PLCE1过表达可抑制结肠癌细胞的迁移能力,并引起细胞凋亡。PLCE1基因过表达使SW620结肠癌细胞恶性程度降低,该基因可能是新的结肠癌相关抑癌基因。     

结肠腺癌细胞株Fas／FasL的表达与凋亡的关系

目的研究结肠腺癌细胞株经不同化疗药物诱导后Fas/FasL表达与癌细胞凋亡的关系,探索敏感化疗药物的筛选.方法将顺铂、丝裂霉素、氟尿嘧啶、表阿霉素按PPC(血浆峰浓度)、1/10PPC、1/5PPC、5PPC、10PPC加入结肠腺癌LS174T细胞、LoVo细胞共孵,用流式细胞术(FACScan)检测癌细胞Fas、FasL表达率及细胞凋亡率,并提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳.结果FACScan检测显示LS174T细胞顺铂组、丝裂霉素组、表阿霉素组Fas表达率、细胞凋亡率在1/5PPC或PPC时最高,Fas表达率与细胞凋亡率呈正相关(P＜0.05).LoVo细胞经化疗药物诱导后Fas表达率与细胞凋亡率无显著相关(P＜0.05).结论FACScan检测的癌细胞凋亡率可用于敏感化疗药物及其合适剂量的筛选,Fas表达率可能仅适用于部分癌症病人化疗药物的筛选;LS174T细胞与LoVo细胞凋亡途径的不同说明化疗药物的个体化选择研究的重要性.     

肝移植治疗肝豆状核变性七例

肝豆状核变性又名Wilson病（WD），患者第13号染色体铜转运P型ATPase基因突变导致肝脏铜蓝蛋白合成障碍，体内过量的铜沉积于肝脏、脑、角膜和肾脏等部位，出现肝脏、神经系统、肾功能异常和角膜环等临床表现。如能早期行排铜治疗和低铜膳食，可获长期缓解，但对晚期患者，肝移植是目前最有效的治疗方法。     

肝移植治疗原发性胆汁性肝硬化的近期疗效

目的 分析肝移植治疗原发性胆汁性肝硬化(PBC)的近期疗效.方法 2001年10月～2006年2月,接受肝移植手术的PBC患者共17例,平均年龄(49.6±6.6)岁.回顾患者住院期间及随访期的资料,根据Mayo公式计算患者保守治疗的1 a预计生存率.观察患者术后临床特征、复发和生存情况,分析死亡原因;计算移植后患者实际生存率,并与1 a预计生存率比较.结果 本组患者平均随访时间(28.8±15.7)月; 移植后患者症状迅速缓解、肝功能改善.移植后0.5、1、2 a的实际生存率分别为100%、100%、83.3%.生存分析显示,本组患者1 a实际生存率显著高于保守治疗的1 a预计生存率(77%)(P=0.006); 17例中仅1例患者移植15个月后,经肝活检证实PBC复发,移植18个月后因继发胆管炎、感染性休克死亡.结论 肝移植可提高终末期PBC患者的生活质量,延长其生存时间.     

化疗后大肠癌细胞凋亡、增殖和Fas/FasL表达的改变

本研究从分子生物学角度解释术前化疗的机理 ,为临床制定合理的化疗方案提供理论依据。材料与方法1.材料 :32例大肠癌标本取自我院 1998～ 1999年间结直肠癌病人手术标本 ,男 18例 ,女 14例 ,年龄为 31～ 84岁 ,中位年龄 6 3岁。所有病例均经病理检查证实。依据Ｄｕｋｅｓ标准进行临床分期 ,Ａ1期 2例 ,Ａ2 期 3例 ,Ｂ期 8例 ,Ｃ1期 5例 ,Ｃ2 期 10例 ,Ｄ期 4例。其中 2 5例行根治术 ,7例行姑息性癌灶切除术。术前将患者随机分入化疗组及对照组。2 .化疗方案 :术前化疗组行ＭＦ方案化疗 ,5 氟尿嘧啶(75 0ｍｇ/ｍ2 )静滴 5ｄ、丝裂霉素 (15…     

猪肝细胞用于生物人工肝的安全性问题

人工肝为肝衰患者过渡到肝移植的桥梁,而生物人工肝更符合生理需要.目前进入临床实验的生物人工肝多以猪肝细胞为材料,本文对猪肝细胞源性生物人工肝脏辅助系统的概念,猪肝细胞应用的潜在危险,猪内源性逆转录病毒的相关问题,以及防止猪病原体传播的方式等进行了综述.     

血浆置换在肝移植围手术期的应用

目的：探讨人工肝支持系统在肝移植围手术期的应用效果。方法：采用人工肝支持系统治疗5例等待供肝患者，1例肝移植术后患者。5例等待供肝患者中3例成功过渡到肝移植。结果：人工肝支持后患者肝性脑病有所好转，血清胆红素明显下降。3例成功过渡到肝移植的患者中2例痊愈出院。已存活4～6个月。结论：术前使用人工肝支持系统能改善患者一般情况；原位肝移植加人工肝支持系统是治疗慢加急肝衰竭的有效方法。     

肝移植术后几种常见并发症的预防和处理

历经半个世纪的发展，肝移植已成为治疗终末期肝病的有效方法。因手术技术所致的并发症，如血管并发症、胆漏、胆道狭窄等已显著减少。但终末期肝病病人的凝血机制障碍、围手术期感染、肾功能衰竭及原发病复发等并发症是病人术后近期和中长期的主要并发症和导致死亡的主要原因，是比手术技术并发症更难解决的问题。