ICR胎鼠成纤维细胞培养方法的优化

目的确定胎鼠成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)最优制备方法,为MEF的制备节省时间与原材料。方法取胎鼠组织,采用组织块培养法、胰酶消化培养法、胰酶消后组织块培养法进行分离培养MEF,比较观察MEF纯度、生长速度、细胞形态等指标,筛选最节省时间与原料的一种培养方法。结果组织块培养法所得MEF生长速度慢,细胞体积小,杂细胞少,纯化所需传代次数少。胰酶消化培养法的MEF生长速度快,体积较大,杂细胞数量多,纯化所需传代次数较多。胰酶消化后组织块培养法的消化后组织块的成纤维细胞生长速度介于前两种方法之间,细胞体积和形态与组织块法培养结果相似,杂细胞数量较少,纯化所需传代次数少。结论胰酶消化结合组织块培养法能最大限度的利用材料,在短时间内可制备大量MEF,满足核移植试验与作为饲养层细胞的需求。因此,胰酶消化结合组织块培养法是MEF最优培养方法。     

PMSG或FSH同期发情处理对小鼠卵巢、输卵管和子宫中孕激素受体分布的影响

目的探讨孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)和促卵泡激素(folliclestimulating hormone,FSH)同期发情处理的小鼠卵巢、输卵管和子宫中孕激素受体(progesterone receptor,PR)分布的差异。方法 10只8周龄KM系雌鼠,随机分为PMSG和FSH两个组,第一次处理后48 h取其卵巢、输卵管、子宫进行固定,免疫组织化学法观察各组织中PR的分布。结果两组小鼠卵巢、输卵管和子宫内膜中均有PR表达;其中PMSG组初级卵泡、次级卵泡和输卵管的阳性率均显著高于FSH处理组(P<0.05);PMSG组各级卵泡的平均吸光度值均显著高于FSH处理组(P<0.05);PMSG处理组子宫内膜上皮与腺上皮中的阳性率显著高于FSH组(P<0.05),而基质和子宫内膜上皮中的平均吸光度值显著低于FSH组(P<0.05)。结论 PMSG和FSH同期发情处理不同程度影响小鼠卵巢、输卵管和子宫中PR的表达分布;其中PMSG处理组小鼠卵巢、输卵管和子宫上皮中PR表达普遍显著高于FSH处理组。     

PMSG和FSH同期发情处理对小鼠子宫、卵巢和输卵管中雌激素α受体分布的影响

目的研究拘束冷应激对大鼠血清中促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）、肌酸激酶（CK）和丙氨酸转氨酶（ALT）浓度的动态变化及可能的机制。方法50日龄清洁级大鼠56只,随机分为7组,即0、0．5、1．0、1．5、2．0、2．5和3．0h组。采用拘束冷应激法,在应激相应的时间后,检测大鼠血清中ACTH、CORT、CK、ALT浓度和胃溃疡指数的测定。结果①大鼠血清中的ACTH浓度随着应激时间的增加呈现迅速升高的趋势,0．5h达到最高值,之后又迅速下降,逐渐趋于平缓;②血清中的CORT浓度呈现逐渐升高的趋势。1．5h达到最高值,之后又迅速下降,逐渐趋于平缓;③血清中的CK和ALT活力显著升高,且随着冷应激时间的增加而递增;④大鼠胃溃疡指数在应激初期呈现迅速升高的趋势,2．5h时达到最高值。结论拘束冷应激可使大鼠血清中的ACTH和CORT的浓度上升,至最高值后迅速下降;而血清中CK和ALT的浓度则随着拘束冷应激时间的增加而递增。拘束冷应激导致大鼠发生急性胃溃疡,应激2．5h时最严重,提示拘束冷应激大鼠模型的造模时间以2．5h为最佳。