人巨细胞病毒UL32和UL44融合基因的表达及其抗原性分析

目的用聚合酶链式反应(PCR)扩增人巨细胞病毒UL32、UL44截短基因,构建pET-32a-UL32-UL44表达载体,转化宿菌大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,对目的蛋白进行纯化、标记HRP,用于检测IgM抗体。方法根据Gene-bank中HCMV的pp150、pp52蛋白序列,利用Protean计算机软件分析其亲疏水性和抗原性,选取适合的区段,根据其对应的UL32、UL44基因核苷酸序列设计合成引物,PCR扩增目的基因序列,经测序证明无误之后,克隆pET-32a-UL32-UL44重组质粒,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,进行诱导表达,纯化目的蛋白,标记HRP,用ELISA捕获法对目的蛋白-HRP标记物的灵敏性和特异性等指标进行评价。结果成功构建pET-32a-UL32-UL44重组质粒,导入在BL21(DE3)菌株中,经诱导后目的蛋白表达于上清中,经纯化、标记HRP,标记物用于ELISA捕获法能够准确、特异地检测HCMV血清标本,80份血清检测结果显示其灵敏度可达92.5%,特异性达97.5%。结论 HCMV基因工程重组蛋白具有较好的免疫活性,为研制以基因工程重组抗原代替传统全病毒抗原的HCMV检测试剂盒打下了基础。     

EB病毒NA1-IgA和VCA-IgA抗体与鼻咽癌的诊断和疗效的关系

目的探讨EB病毒NA1-IgA和VCA-IgA抗体与鼻咽癌的诊断和治疗效果的相关性。方法使用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定124例治疗前和治疗后鼻咽癌患者以及173例正常体检人群血清EB病毒NA1-IgA和VCA-IgA抗体。结果单项检测时EB病毒检测的敏感性和准确性分别为:NA1-IgA 88.7%、91.2%,VCA-IgA75.8%、84.8%,两者联合检测的敏感性和准确性分别为97.6%、93.3%。鼻咽癌患者血清EBNA1-IgA抗体rA值和阳性率在临床各期(Ⅰ期阳性率除外)治疗前后均无统计学差异(P>0.05),而鼻咽癌患者血清EBVCA-IgA抗体rA值和阳性率在临床各期(Ⅳ期除外)治疗后均比治疗前有显著下降(P<0.05)。结论两项指标联合检测可提高早期鼻咽癌诊断的敏感性和准确性。血清EB病毒NA1-IgA抗体水平和阳性率基本与治疗效果无关.VCA-IgA抗体水平和阳性率与治疗呈明显的相关性,可作为鼻咽癌疗效判断以及监测病情和预后的重要指标。     

血清中EBNAI-IgA和EBVCA—IgA检测对鼻咽癌的诊断价值

目的探讨检测血清中EB病毒NA1一IgA和VCA—IgA抗体在鼻咽癌诊断中的价值。方法采用ELISA法检测185例健康人群和93例鼻咽癌患者血清EB病毒NA1—IgA和VCA—IgA抗体,应用灵敏度、特异度、准确性和阴、阳性预测值等参数来评估它们在诊断鼻咽癌中的价值。结果单独检测一种抗体和联合检测两种抗体时EB病毒抗体的灵敏度、特异度、阳性预测值和准确性如下：NA1一IgA分别为：89．1％、94．6％、90．3％、92-8％,VCA—IgA分别为：87．1％、93．5％、88．6％、91．3％,联合检测两种抗体分剐为：86．0％、96．8％、93．9％、93．2％。结论EBNA1-IgA与EBVCA-IgA两种抗体联合检测时可显著提高检测的特异度、阳性预测值和准确性,同时在检测过程中可以起到互补作用,对鼻咽癌早期血清学诊断和筛查有重要的价值。     

粪便隐血试验几种常用方法的比较与分析

目的通过比较粪便隐血试验的3种常用方法,为临床医生正确评价粪便隐血试验结果提供参考。方法用联苯胺法、贝索试纸法和单克隆血红蛋白法对93例消化道出血患者以及51例对照人群进行同时检测和组合检测,同时对3种方法进行灵敏度和干扰性试验。结果灵敏度和抗干扰能力均是：单克隆血红蛋白法大于贝索试纸法大于联苯胺法,用化学法和免疫法联合检测的阳性例数低于单独用化学法而高于单独用免疫法。结论单克隆血红蛋白法灵敏度高,可靠性强,但易出现假阴性,贝索试纸法和联苯胺法都易受饮食、药物等影响而出现假阳性,联苯胺法敏感性高但灵敏度差,而贝索试纸法灵敏度适中,对人体无害,适于普查运用。对于有消化道出血的患者建议组合运用化学法和免疫法可以提高检测的准确性。     

TPPA与改进TRUST联合检测对梅毒诊治的临床价值

人体感染梅毒螺旋体后,可产生多种抗体,主要有IgM、IgG类两种特异性抗螺旋体抗体;另一类非特异性抗体又称反应素,是由螺旋体破坏的组织细胞所释放的类脂样物质以及螺旋体自身的类脂和脂蛋白刺馓机体产生的IgM、IgG类抗体。目前,常用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）检测血清中不同类型的抗体。     

改良梅毒检测常用方法对梅毒诊治的临床价值

目的探讨改良甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）联合捡，测在梅毒诊断中的应用价值。方法对61例梅毒患者用TRUST进行原倍和滴度试验，并采用比试剂操作要求多1倍的TRUST悬液进行检测，同时联合TPPA进行检测，并用97例非梅毒标本作对照。结果TPPA检出的阳性率明显高于TRUST，差异有统计学意义（经Х^2检验，P〈0．05）。采用改良TRUST即2倍TRUST悬液以及TRUST滴度试验对早期梅毒的检出率明显高于原倍TRUST，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用滴加2倍TRUST悬液以及进行TRUST滴度测定与TPPA联合检测可提高梅毒的检出率，为梅毒的诊治提供重要参考。     

18～25岁未婚青年阴茎包皮的解剖类型及临床分析

阴茎癌及阴茎包皮炎多发生于包茎或包皮过长的病人 ,随着社会的发展和性知识普及 ,许多青年担心阴茎短小包皮过长影响婚后性生活或引起癌症。国人体质调查对阴茎测量数值已有文献报道[1～ 5] ,但对包皮的解剖观察报道甚少。本文对 10 5 0例 18～ 2 5岁未婚青年的阴茎包皮进行了观测 ,对其临床病例进行分析 ,对 12具青年尸体阴茎进行观察 ,为临床治疗提供解剖学数据。1　临床资料和方法1.1　青年年龄组分布本组调查 10 5 0例 ,分 4个年龄组 (见表 1)。　　表 1　 10 5 0例青年年龄分布　　Tab .1　Thedistributionofageofyoungmenon 10 5 0c…     

蛋白质芯片检测法在过敏原特异性抗体检测中的应用

目的探讨蛋白质芯片技术诊断过敏性疾病的可行性。方法应用蛋白质芯片方法,将10种常见过敏原抗原集成到活化的玻璃芯片上,并保持蛋白质活性,通过与202例患者标本的反应,同时得到10种过敏项目的检测结果。结果蛋白质芯片法检测结果与对照方法间符合率较高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论蛋白质芯片方法可以高通量、即时地检测过敏原血清中IgE的变化,灵敏度达0.5IU/mL,可满足临床上对变态反应性疾病的诊断要求。     

人巨细胞病毒gB基因的构建、表达及鉴定

目的构建人巨细胞病毒（HCMV）gB基因,并对pET28a／gB重组质粒进行诱导表达,鉴定表达的目的蛋白。方法根据Genebank中HCMV核苷酸序列设计引物,并在引物的5’、3’端分剐加入BarnHI、EcoRI限制性内切酶位点。特异性扩增gB编码基因片段,同时构建舍HCMVgB编码基因的原核表达载体,对重组质粒进行诱导表达,用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）法对纯化的Ni／gB融合蛋白的灵敏度和特异度等生物活性进行鉴定,灵敏度可达95％,特异度达96．7％。结果目的蛋白经诱导后表达于上清液中,经鉴定,目的蛋白保留了天然蛋白原有的生物活性。结论Ni／gB融合蛋白的获得,为研制以重组蛋白代替传统全病毒作为检测抗原的新型HCMV特异性免疫学检测试剂盒奠定了基础。