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1.
目的 采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建靶向KLF4的基因编辑质粒,建立CRISPR/Cas9-sgKLF4人正常胃黏膜GES-1细胞株,观察KLF4基因敲除效果及其对细胞生物学行为的影响.方法 设计靶向KLF4基因的sgRNA序列,将合成的片段插入到CRISPR/Cas9质粒骨架载体pX459中,再将重组后的质粒做转化,挑取克隆,扩增后提质粒进行测序验证正确性.将构建好的重组质粒体外转染入人胃黏膜细胞GES-1中,利用嘌呤霉素进行筛选获得KLF4敲除的克隆细胞,应用Western blot技术检测未转染细胞和克隆细胞中KLF4蛋白的表达情况,平板克隆实验检测KLF4敲低后克隆形成能力,MTT实验检测其增殖能力,Transwell实验检测其迁移能力.结果 经测序验证,成功构建了靶向KLF4的重组质粒pX459-KLF4-sgRNA,经Western blot方法验证,转染该重组质粒后人胃黏膜上皮细胞株GES-1的KLF4蛋白表达量明显降低,行为学实验结果表明,GES-1细胞敲低KLF4基因后克隆形成能力、增殖能力以及迁移能力都明显增强.结论 成功构建了靶向KLF4的CRISPR/Cas9基因编辑质粒载体及KLF4基因敲低的稳定细胞株GES-1,KLF4基因敲低后GES-1细胞生物学行为的改变证实其抑癌基因活性. 相似文献
2.
目的:探讨全程护理质控在冠心病介入手术患者中的应用效果,旨在提高介入手术护理质量。方法:选取2016年6月1日~2018年12月31日接受介入治疗的385例冠心病患者作为研究对象;按照护理措施方式分为全程护理质控组239例和对照组146例,对照组行常规护理,全程质控组在对照组基础上行全程护理质控措施;比较两组不良事件发生率、患者满意度、患者心理状况[采用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)]。结果:全程护理质控组并发症总发生率低于对照组(χ~2=11.898,P=0.001),患者对护理工作的满意度高于对照组(χ~2=4.346,P=0.037),术后SAS、SDS评分均低于对照组(P0.01)。结论:将全程护理质控措施应用于冠心病介入手术患者中,能够降低术后并发症发生率,提高满意度,改善心理状况。 相似文献
3.
心包疾病是一种常见疾病。据尸检统计发病率约为5%,Hiroki[1]及韩立宪等[2]经纤维心包镜检查统计,恶性心包积液约占心包积液病因的47.1%,且心包积液生长迅速,积液量多,患者常出现心包填塞的症状,有效的控制积液对改善病人症状、提高病人的生活质量尤为重要。我院自2002-01~200 相似文献
4.
5.
目的 探讨经皮冠状动脉介入术(PCI)中替罗非班冠状动脉给药对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者心功能、心肌再灌注、安全性的影响.方法 选取2019年1月—2020年4月收治的急性STEMI 135例,据治疗方法分为观察组71例和对照组64例.2组均行PCI治疗,观察组在PCI术中予替罗非班冠状动脉给药.比较2组术前及术后1个月左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)及左心室射血分数(LVEF)差异,术后2 h行冠状动脉造影观察2组心肌梗死溶栓治疗(TIMI)血流分级、ST段回落情况,检测术前、术后1个月中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,观察2组主要心血管不良事件及出血事件发生情况.结果 术后1个月,2组LVESD、LVEDD均较术前降低,LVEF均较术前升高,且观察组LVESD、LVEDD降低程度及LVEF升高程度均大于对照组(P<0.05,P<0.01).观察组术后2 h TIMI血流分级、ST段回落率均优于对照组(P<0.05).术后1个月,2组NGAL及TNF-α水平均较术前降低,且观察组低于对照组(P<0.05,P<0.01).观察组术后主要心血管不良事件总发生率低于对照组(P<0.05).2组住院期间出血发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 PCI术中替罗非班冠状动脉给药可改善急性STEMI缺血心肌再灌注水平,减轻心室重构,改善心功能,降低NGAL、TNF-α水平,保护血管内皮功能,且不会增加术后不良心血管事件及出血事件的发生. 相似文献
6.
目的 建立蚀斑法用于呼吸道合胞病毒的病毒滴度测定,并进行验证。方法 通过测定样品的病毒滴度,比较滴度结果,筛选最佳覆盖物、覆盖物浓度和病毒孵育时间,从而建立蚀斑法用于测定呼吸道合胞病毒滴度。根据国际人用药品注册技术协调会指导原则和《中华人民共和国药典》要求,验证该方法的准确性、精密性、线性和耐用性。结果 采用0.8%微晶纤维素作为覆盖物,病毒孵育2~3 h为建立蚀斑法的最优条件。该蚀斑法测定不同浓度样品病毒滴度的结果相对偏倚均小于10%;试验内和试验间精密性几何变异系数分别为11%和18%;本方法的线性斜率为1.004,相关系数为0.999 1;本方法中固定细胞的时间0.5~24 h均适用,差异无统计学意义(F=1.767,P=0.222 5)。结论 建立的蚀斑法具有较好的准确性、精密性、线性和耐用性,适用于呼吸道合胞病毒的滴度测定。 相似文献
7.
8.
9.
目的:探讨甘露聚糖肽联合5- 氟脲嘧啶(5-FU )对人肝癌HepG2 细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法:将HepG2 细胞分为对照组、5-FU 组、甘露聚糖肽组及联合用药组。利用MTT 法观察药物对各组细胞增殖的影响。流式细胞术检测各组细胞的周期时相变化、增殖指数(PI )及凋亡率。免疫细胞化学法分析各组细胞Bcl- 2 蛋白的表达情况。结果:甘露聚糖肽单独应用后对HepG2 细胞的增殖抑制作用较弱,与5-FU 联合使用后能明显增强对细胞生长的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性。药物作用细胞48h 后,与对照组及5-FU 组相比,联合用药组G0/G1 期细胞比率增加,细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。 免疫细胞化学法分析显示,两药联合使用可使细胞Bcl- 2 蛋白的表达明显下降(P<0.01)。 结论:甘露聚糖肽与5-FU 联合应用具有抑制HepG2 细胞的增殖及诱导其凋亡的作用,其机制之一可能与下调Bcl- 2 蛋白的表达相关。 相似文献
10.
目的:探讨晚期胃癌患者二线化疗的预后因素,筛选二线化疗的最佳人群。方法:回顾性分析256例接受二线化疗的晚期胃癌患者,采用Kaplan-Meier法计算生存率,Log-rank检验比较各亚组生存率,采用Cox比例分析模型作临床病理特征对生存率影响的单因素和多因素分析。结果:二线化疗的客观有效率18.0%,中位至进展时间(TTP)3.0个月,中位生存期(OS)8.1个月,1年生存率24.4%。多因素分析发现,分化程度(RR=1.33;95%CI:1.02~1.74;P=0.04)、一线化疗的TTP(RR=2.12;95%CI:1.59~2.83;P=0.00)、二线化疗前PS评分(RR=5.42;95%CI:3.65~8.05;P=0.00)和血红蛋白(RR=3.56;95%CI:2.49~5.09;P=0.00)是晚期胃癌二线化疗的独立预后因素。根据患者含预后不良因素的个数,分为低危(0)、中危(1~2)和高危(3~4)3组,3组的中位生存期分别为10.2、6.4和3.3个月,1年生存率分别为39.2%和8.5%,0,P=0.00。结论:影响晚期胃癌二线化疗的独立预后因素包括分化程度、二线化疗前PS评分、血红蛋白和一线化疗的TTP,可作为筛选晚期胃癌二线化疗适宜人群的有效指标。 相似文献