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siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达,MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况。结果酶切电泳和测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。该质粒转染MCF-7细胞后,hTERT基因mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低,MCF-7细胞生长抑制。结论内源性短发夹状siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖生长,这也为肿瘤的基因治疗提供了实验依据。 相似文献
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[目的]对影响分裂相指数的各环节进行优化控制,分析该条件下染色体标本制备效果. [方法]在外周血淋巴细胞培养染色体标本制备的基本过程中,对细胞培养、细胞周期阻滞、细胞收获等步骤中与分裂相指数相关的各环节进行优化控制,采用显微镜下直接观察、计数及染色体分散面积测量等方法对控制后的标本制备效果进行分析.[结果]在优化条件下所得染色体标本分裂相数较多、染色体分散良好、制备效果稳定. [结论]该优化控制方案可获得理想的可供分析的染色体分裂相,效果稳定,保证了外周血淋巴细胞染色体制备及分析的成功率. 相似文献
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医学细胞生物学实验教学及考核方法改革 总被引:1,自引:0,他引:1
为了使医学细胞生物学实验教学更加符合理论教学的实际需要、充分配合课堂理论教学,从调整教学内容、改革教学方法、完善成绩评定体系三个方面的改革进行了探讨,以达到充分发挥实验课的作用、提高学生的创新意识和学习兴趣,从而达到培养新世纪复合型人才的目标。 相似文献
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目的:探讨应用非性别依赖的表观遗传学标记代替SRY基因检测孕妇血浆中胎儿游离DNA的可行性。方法:分别以SRY基因和不同甲基化状态的maspin基因序列为标记对孕妇和非妊娠女性血浆中的游离DNA进行PCR和甲基化PCR检测,并对结果进行统计学分析。结果:孕男胎孕妇血浆DNA标本中SRY基因的检出率为93.9%。u-maspin(maspin基因的非甲基化序列)仅在妊娠组中被检测出,检出率88.3%。两检出率间的差异不具有统计学意义。m-maspin(maspin基因的甲基化序列)在妊娠组和非妊娠组中的检出率无差异。结论:u-maspin基因可作为非性别依赖的胎儿DNA特异性标志物,相对于以SRY基因作为标志物有助于扩大非创伤性产前诊断的临床应用范围。 相似文献
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目的:构建人乳腺珠蛋白(hMAM)基因重组质粒pcDNA3.1-hMAM,并观察重组质粒在COS-7细胞中的表达,为肿瘤DNA疫苗研究奠定基础。方法:利用PCR方法扩增hMAM基因,酶切测序后克隆入真核表达载体pcDNA3.1,构建真核表达载体pcDNA3.1-hMAM。将重组载体脂质体转染法转染入COS-7细胞,间接免疫荧光法和ELISA检测目的基因的表达。结果:成功扩增hMAM基因,酶切测序表明,重组质粒含有hMAM基因,在COS-7细胞中可检测到hMAM表达。结论:hMAM基因疫苗构建成功,为进一步进行DNA肿瘤疫苗研究提供了实验依据。 相似文献
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现代医学认为,绝大多数疾病的发生、发展和转归都是遗传和环境综合作用的结果,人类所有疾病的发生、发展和转归都与遗传物质(DNA)的直接或间接变化相关。医学遗传学则是研究人类遗传性疾病的发生、发展和转归与遗传因素的关系,同时探讨疾病诊断、预防、治疗的遗传学方法及手段,以改善人类的健康水平的一门科学。由此可见,在现代医学的教育体系中,医学遗传学课程的教育、教学有着举足轻重的地位。 相似文献
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好的考试方式能更有效地发挥教学评价体系的作用,促进教学质量的提高。通过在临床医学专业本科学生中开展以能力培养为导向的医学细胞生物学考试改革的研究,认为考试改革是必要的,新的考试体系更有利于人才的培养。 相似文献