点状掌跖角化病伴高血压-家系遗传分析

目的:对一伴高血压的点状掌跖角化病家系进行分析.方法:对患者家系进行家系调查和分析,观察患者症状,对患者进行医院常规检查.结果:家系中有11人为点状掌跖角化病患者,所有患者皮损均局限于手足部位,发病年龄28岁到55岁,5人伴有高血压及多汗.结论:点状掌跖角化病是一种具有高度外显率的常染色体显性遗传性皮肤病.发病年龄10...     

近亲婚配致视力残疾伴高血压一家系3例

1 病例介绍 患者,男,32岁,因视力极度下降乃至影响生活,于2009年9月26日在我市光明医院眼病中心就诊. 主诉症状:患者1岁时,父母发现其有斜视症状,当一只眼睛直视目标时,另一只眼便斜向一侧.3岁时,发现有近视倾向,看远方的物体时眼睛吃力;8岁上小学开始,发现视力低下,从未治疗.     

过表达miR-132改善阿尔茨海默病样学习记忆障碍

 目的: 获得过表达微小RNA-132(microRNA-132,miR-132)的慢病毒,并检测对Tg2576小鼠学习记忆损伤的改善。方法: 从小鼠脑组织中克隆miR-132成熟序列上下游各100 bp的基因,将基因克隆至慢病毒表达载体pLenti7.3,酶切鉴定并且DNA序列测定正确。 pLenti7.3-miR-132和ViraPower Packaging Mix 共转染293FT细胞。72 h后收获上请,采用超速离心和聚乙二醇法纯化病毒颗粒并分装保存。分别以病毒颗粒感染细胞系和小鼠海马组织验证病毒的感染能力。Tg2576小鼠海马区注射病毒,Western blot和Morris水迷宫分别检测记忆相关蛋白水平和空间学习记忆能力。 结果: 所包装的miR-132病毒颗粒能够高效地感染细胞系,并且在体内也有理想的感染效率。和对照组相比,过表达miR-132的Tg2576小鼠PSD95和GluR1明显升高,并且空间依赖的学习记忆能力明显提高。结论: 过表达miR-132通过影响突触相关蛋白PSD95和GluR1的水平改善Tg2576小鼠的空间学习记忆能力障碍。     

人源TRAIL胞外段基因的克隆、表达与功能的初步检测

目的 获得人源TRAIL胞外段结构域在大肠杆菌中可溶性表达，并初步鉴定其功能。方法 RT-PCR法从人外周血单个核细胞中扩增TRAIL胞外段基因，克隆入pGEM-T-Easy载体，DNA序列测定鉴定正确性。为了便于纯化目的蛋白，将其克隆入原核表达载体pET-30a，并在其氨基端加上组氨酸标签。采用E．coliBL21（DE3）表达，Ni亲和柱分离纯化目的蛋白。SDS-PAGE和Westernblot鉴定原核表达产物。MTT法、PI染色法及瑞氏．姬姆萨染色法观察TRAILHis蛋白的生物学活性。结果 所表达目的蛋白相对分子质量（Mr）与预期蛋白Mc相一致，该蛋白分别可以与抗TRAIL多克隆抗体及抗组氨酸标签抗体反应，并可抑制人淋巴瘤细胞系Jurkat细胞的增殖和诱导Jurkat细胞凋亡。结论 获得了具有生物学活性的TRAIL蛋白，为对其生物学功能及肿瘤治疗的进一步研究奠定了基础。     

DR5胞外段基因的表达及功能初步鉴定

目的：获得具有生物活性的人DR5胞外段蛋白。方法：通过RT-PCR从Jurkat细胞中钓取DR5的胞外段基因（55—183位氨基酸），克隆到pGEM-T Easy载体中，经核酸序列测定正确后，将其再次克隆入原核表达载体pET30a中，在Ecoli B121（DE3）实现蛋白表达。通过SDS—PAGE和Western blot鉴定表达产物。ELISA法分析其与抗DR5单克隆抗体（mAb）结合能力。结果：克隆到人DR5基因的胞外段基因，测序结果和报道的一致；构建了人DR5胞外段基因的原核表达载体并实现在E．coli B121（DE3）中大量表达；SDS—PAGE表明所表达蛋白与预期蛋白的相对分子质量（Mr）一致；Western blot及ELISA的结果表明该蛋白能与抗DR5抗体反应，竞争阻断试验表明DR5胞外段可阻断TRAIL对Jurkat细胞生长的抑制。结论：成功地制备了具有生物活性的DR5胞外区，为后续研究打下了基础。     

点状掌跖角化病一家系遗传分析

本文报道一个点状掌跖角化病家系。该家系4代10人患有点状掌跖角化病,3人同时伴有多汗,高血压。经过遗传分析,认为该疾病属常染色体显性遗传,而且并具有遗传异质性、遗传早现现象。     

浅谈科研在基础医学教育中的作用

医学的发展必须以科研的提高为基础,对医学生加强科研素质和科研实践的培养,不但能够提高对专业的学习兴趣,也是现在医学发展的趋势。河南大学医学院利用现有的科研条件和设备以及获得的科研成果,积极对学生开展科研教育,加强科研实践,达到了科研促进教学的目的,取得了良好的效果。     

抗DR5单链抗体的构建与表达

目的:构建抗DR5单链抗体的真核表达载体,以实现真核表达。方法:RT-PCR法从分泌抗DR5抗体的杂交瘤细胞中合成第一链cDNA,用通用引物钓取单克隆抗体的轻、重链可变区基因。经测序和BLAST比对,证实为一株新的鼠源性抗体基因。利用overlapping PCR方法构建单链抗体真核表达载体pCMV-express-scFv,Lipofectamine2000法转染宿主细胞293T,72 h后ELISA法检测细胞培养上清,检测抗体表达。结果:经序列鉴定和BLAST比对证实克隆的抗体轻、重链可变区基因为新鼠源抗体基因。ELISA实验结果显示抗体有效表达在细胞培养上清中。结论:成功得到抗体轻、重链可变区基因,实现了抗DR5单链抗体的真核表达,为进一步的研究和开发奠定了基础。     

大蒜素减轻OSAHS模型大鼠学习能力下降及海马神经元凋亡

目的 探讨大蒜素对大鼠阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)学习能力下降及海马神经元凋亡的影响。方法 将大鼠分为对照组、模型组、大蒜素低剂量(10 mg/kg)和高剂量(40 mg/kg)组、阳性药物组(莫达非尼,20 mg/kg),各18只。Morris水迷宫法判断大鼠学习能力;HE和TUNEL染色观察海马组织病变和神经元凋亡指数(AI);ELISA检测海马组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、晚期糖基化终末产物(AGEs)水平;RT-qPCR检测糖基化终末产物受体(RAGE)、核转录因子κB(NF-κB)p65、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达;Western blot检测RAGE、NF-κB p65、p-NF-κB p65、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组逃逸潜伏期延长,标象限行驶时间缩短,跨平台次数减少,TNF-α、IL-6、AGEs、AI、RAGE、Bax mRNA和RAGE、p-NF-κB p65、Bax蛋白表达升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);与模...     

mDRA-6诱导Jurkat细胞凋亡的外源性机制

目的:探讨抗人死亡受体5(DR5)单克隆功能抗体(mDRA-6)对人白血病Jurkat细胞诱导凋亡的外源性机制。方法:用显微镜观察mDRA-6作用后的Jurkat细胞形态学变化,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析技术对Jurkat细胞的凋亡进行定量分析;利用免疫印迹技术检测凋亡细胞的Caspase 10、Caspase 9、Caspase8、Caspase 7、Caspase 3等凋亡相关蛋白的表达及活化情况。结果:mDRA-6在5 mg/L浓度作用Jurkat细胞30min时就出现典型的细胞凋亡形态改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测显示,Jurkat细胞在30 min、60min1、20 min的凋亡率分别为30.20%、69.03%、79.55%。免疫印迹技术检测显示Caspase 9、Caspase 8、Caspase7、Caspase 3均呈现活化片断的表达,而Caspase 10无变化。结论:mDRA-6可通过细胞膜表面死亡受体信号传导途径诱导Jurkat细胞的凋亡,本研究为mDRA-6的人源化改造及后续的实验研究打下了基础。