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华南地区质粒介导超广谱β-内酰胺酶的基因分型研究 总被引:59,自引:4,他引:59
目的:了解华南地区质粒介导超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率及基因型特征。方法:收集2001年4月-9月革兰阴性菌临床分离无重复株共1184株,采用NCCLS表型筛选和确认试验进行了ESBLs产酶的识别,E-test法检测各亚型ESBLs的MICs值,质粒接合及电转化实验,耐药质粒提取及酶切指纹分析,等电聚焦电泳,PCR通用引物扩增TEM、SHV、CTX-M、VEB、PER、SFO基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果:革兰阴性苗ESBLs的检出率为14.6%(173/1184);获得产ESBLs接合子67株,电转化子11株,其中产CTX-M-14型ESBLs为33.3%(26/78)、CTX-M-3为23.1%(18/78)、CTX-M-9为14.1%(11/78)及SHV-2a为2.6%(2/78),未定型为5.1%(4/78);29.5%(23/78)野生株伴广谱酶TEM-1或SHV-1型;各型ESBLs基因约定位在35-190kb大小的可接合性低执行者拷贝数天然质粒上;CTX-M型ESBLs以对头孢噻肟高水平高耐为特征。结论:华南地区质粒介导的ESBLs以CTX-M型衍生酶为主,其次是SHV型酶。 相似文献
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌两种基因分型方法的对比研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)两种基因分型方法的特点,为MRSA流行病学调查选用合适的基因分型方法提供参考。方法用聚合酶链反应(PCR)扩增MRSA基因高变区(Hypervariable region,HVR),并根据扩增片段大小进行基因分型,同时与ERIC-2随机引物多态性DNA分型法进行比较,并观察不同退火温度条件下两种基因分型方法的差异。结果 50株MRSA以基因高变区(HVR)分型,可分为A、B、C、DE5种基因型,其中以B(47.3%)和D(32.1%)型多见,A(3.5%)、C(10.7%)、E(6.4%)型少见,当退火温度改变时,则不能分型;用ERIC-2随机引物对MRSA进行多态性DNA分型,在低退火温度下分为10种基因型,当退火温度明显改变时,仍能分型,但每型的扩增片断明显减少。结论随机引物多态性DNA分型和HVR基因分型两种方法均能用于MRSA感染的流行病学研究,HVR基因分型PCR反应温度控制严格,分型明确;而随机引物多态性ERIC-2的DNA分型随PCR退火温度的变化而变化,应用时需严格控制PCR退火温度等反应参数,否则重复性较差。 相似文献
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Study on the Genotype of Extended-spectrum Beta-lactamases Mediated by Plasmid in Southern China 总被引:1,自引:0,他引:1
Alongwiththewidespreaduseoftheextended spectrum beta lactamase(ESBL)antibioticswithinlast20years, theemergenceofESBLs producingstrainsamongmembers ofthefamilyEnterobacteriaceaehasbecomeaworldwide problem.TheESBLsdescribedtodatebelongtotheBush group2orAmbl… 相似文献
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万古霉素耐药肠球菌对院内肠球菌肺部感染预后的影响 总被引:4,自引:3,他引:4
目的 探讨万古霉素耐药肠球菌对医院内肺部感染预后的影响。方法 应用回顾性调查的方法对1993年1月~2001年12月96例医院内肺部肠球菌感染病人进行分析。结果 96例院内肺部肠球菌感染以粪肠球菌为多(73%),屎肠球菌次之(22%)。肠球菌对临床常用抗生素的耐药率高,对万古霉素的耐药率为12.5%,屎肠球菌的耐药率明显高于粪肠球菌。96例肺部肠球菌感染患者,病死率40%(38/96)。感染的肠球菌对万古霉素耐药的病人病死率最高,达92%,明显高于万古霉素敏感肠球菌肺感染的病死率(26%)(P<0.05)。结论 万古霉素耐药肠球菌肺感染发病率呈上升趋势,病死率高,需引起临床的高度重视。 相似文献
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革兰阴性菌产CTX-M-3型超广谱β内酰胺酶分子传播机制的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 :了解革兰阴性菌产CTX M 3型超广谱β内酰胺酶 (ESBLs)的分子传播机制 ,为临床防治提供依据。 方法 :收集革兰阴性菌医院感染无重复株共 378株 ,进行药敏试验和ESBLs产酶株的检测 ;肠杆菌科基因组内重复一致序列 聚合酶链反应 (ERIC PCR)进行克隆株的DNA分型 ;质粒转移实验、质粒谱及耐药质粒酶切指纹分析、等电聚焦电泳、PCR扩增TEM、CTX M基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果 :ESBLs的检出率为 16 .9% (6 4 / 378) ,其中CTX M 3型产酶株占 2 0 .3% (13/ 6 4 ) ;CTX M 3基因定位在 6 6kb和 75kb 2种接合性质粒上 ,6 6kb的质粒同时携带TEM 1基因 ;从不同来源的CTX M 3产酶株中可以分离到同种耐药质粒 ,染色体DNA同源性分析显示其为不同的克隆株。结论 :CTX M 3型ESBLs产酶株的传播机制以质粒介导为主 ,并可能存在局部携带CTX M 3基因耐药质粒的爆发 相似文献
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下呼吸道感染细菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测 总被引:18,自引:1,他引:18
目的:了解临床下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检出情况。方法:通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株;采用美国国家临床实验室标准委员会(NC—CLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株。结果:从临床下呼吸道标本分离对第一、二代及一种以上第三代头孢菌素耐药的226株常见革兰阴性杆菌,包括阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中,分别检出单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs及单产ESBLs细菌34株、15株、109株,总检出率分别为15.0%、6.6%、48.2%。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高,为57.9%;ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高,其次为大肠埃希菌,分别为78.5%、77.8%。结论:下呼吸道产AmpC酶和ESBLs细胞感染常见,前以阴沟肠杆菌为主,后多见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。 相似文献
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目前白念珠菌的耐药表型与基因型的关系仍不清楚,寻找一种恰当的基因分型方法,探讨其与耐药表型的关系,对监测耐药株的分子流行病学以及深化耐药分子机制的研究有重要的临床意义。以我院近3年出现的8株耐药白念珠菌(MIC〉64μg/ml),及用体外氟康唑诱导的方法,诱导了2株耐氟康唑白念珠菌,同期选择了48株临床敏感白念珠菌,共58株采用AP-PCR(Arbitrary primod-PCR, AP-PCR)技术对其进行了基因分型。将其电泳图谱扫描入计算机后采用Lab-work 4.0软件转化为数值图表后进行聚类分析,以探讨耐氟康唑白念珠菌基因多态性是否与其耐药性相关。 相似文献
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溶葡萄球菌酶对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :探讨溶葡萄球菌酶对万古霉素低敏耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)的抗菌活性。方法 :琼脂稀释法测定万古霉素和溶葡萄球菌酶对MRSA的最低抑菌浓度 (MIC) ,棋盘法检测 2药联合抑菌作用。结果 :万古霉素对其敏感或低敏MR SA的MIC90 分别为 2mg·L- 1,8mg·L- 1;溶葡萄球菌酶对万古霉素敏感或低敏MRSA的MIC90 分别为 0 .2 5mg·L- 1,0 .5mg·L- 1;2药联合对其敏感株和低敏株的FIC90 (FIC为联合抑菌分数 )较万古霉素单独应用时MIC90 分别减少 4倍和 8倍 ,较溶葡萄球菌酶单独应用时均减少 4倍。FIC指数均小于0 .5。结论 :溶葡萄球菌酶对万古霉素敏感或低敏的MRSA均有良好的体外抗菌活性 相似文献
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铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制——耐药株外膜蛋白OprD_2缺失 总被引:3,自引:0,他引:3
目的;研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法:以亚胺培南为代表,应用十二烷酸磺酸钠-聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE)外膜蛋白图谱、凝胶分光光度扫描分析方法,分别研究临床分离的铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株和亚胺培南敏感株。结果:耐药组OprD2相对含量显著低于敏感组。结论:OprD2的缺失是铜绿假单胞菌对以亚胺培南为代表碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因。 相似文献