四种中药对骨愈合过程中相关基因表达的影响

目的:探索中药水蛭、海螵蛸、阿胶、骨碎补在骨折愈合过程中的干预作用,了解它们各自的调节靶点,探索建构其基因组学的途径。方法:通过在大鼠胫骨打孔的方法建立单因素干扰模型,并将300只大鼠随机分为正常组、模型组和给药组(分别用4种中药给药),每组50只,分别在实验的第4、7、14、21、28天不同时间点采用原位杂交方法对各类mRNA的变化进行动态观察,分析骨愈合过程中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型前胶原mRNA、转化生长因子TGF-β1mRNA、骨形态发生蛋白BMP-2mRNA以及血管内皮生长因子VEGF-mRNA的表达情况。结果:不同中药对不同基因的作用不同,作用的时间点不同,作用强度也存在差异。其中海螵蛸在骨折早期对Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA、VEGF-mRNA、BMP-2mRNA的表达升高,后期Ⅱ、Ⅲ型前胶原mRNA表达水平下降,VEGF-mRNA、TGF-β1mRNA表达量维持于较高水平;骨碎补组较模型组在BMP-2mRNA、TGF-β1mRNA、Ⅰ型前胶原mRNA的表达上差异有显著性统计意义;阿胶对骨愈合早、中期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型前胶原mRNA和TGF-β1mRNA的表达与模型组比较差异存在显著性统计意义;水蛭对VEGF-mRNA的表达具有一定的促进作用。结论:海螵蛸、水蛭对血管形成有促进作用,阿胶、骨碎补和海螵蛸对骨折软骨形成早期具有促进骨诱导的作用,并对成骨细胞的增殖及合成活性有较大影响。     

虾青素对成骨细胞羟自由基氧化损伤的影响

目的：在H2O2胁迫下，研究虾青素增强成骨细胞抗自由基损伤的作用。方法：用H2O2作用MC3T3-E1成骨细胞，建立自由基损伤细胞模型。培养的成骨细胞分为对照组、模型组、虾青素低剂量组（1×10^-7mol／L）、虾青素中剂量组（1×10^-6mol／L）和虾青素高剂量组（1×10^-5mol／L）。测定不同处理组细胞活力、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、活性自由氧（reactive oxygen species，ROS）含量、脂质过氧化物（lipid oxygen，IJP0）含量，同时利用荧光偏振法测定细胞膜流动性。结果：模型组细胞活力、SOD活性、细胞膜流动性均比各剂量虾青素组显著降低（P〈0．01），而ROS、LPO含量均比各剂量虾青素组显著升高（P〈0．01）。结论：H2O2摄入会导致大鼠成骨细胞的氧化损伤，而虾青素可以预防或降低此类损伤对细胞的影响。     

葛根黄酮对D-半乳糖致衰老大鼠骨质的影响

目的研究葛根黄酮对D半-乳糖致衰老大鼠骨质的影响。方法用D-半乳糖注射Wistar雄性大鼠5个月,建立衰老模型,对青年对照组、致衰老模型组、葛根黄酮组和正常老龄对照组进行骨常规参数测定及比较。结果致衰老模型组骨密度、骨结构力学参数、生物力学参数、骨钙、镁、锰及羟脯氨酸含量均比青年对照组有所降低(P<0.01),而骨磷含量、骨和血清碱性磷酸转移酶活性均比青年组有所升高(P<0.01),这些变化与正常老龄对照组的变化趋势一致,并比后者变化得更显著。相比之下,葛根黄酮组在骨密度、骨结构力学参数、生物力学参数、骨钙、镁、锰及羟脯氨酸含量参数指标均比致衰老模型组增高(P<0.05)。结论长期摄入D半-乳糖导致大鼠衰老的同时,可诱发致衰老性骨质疏松,而葛根黄酮可以改善D-半乳糖致衰老性骨质的变化。     

虾青素对骨关节炎软骨细胞氧化损伤及炎性的影响

目的研究虾青素对骨关节炎(OA)软骨细胞氧化损伤及炎性的逆转作用。方法选择15只5月龄新西兰兔,采用内侧副韧带、前后交叉韧带切断并切除内侧半月板的OA动物模型制作方法,体外分离培养软骨细胞。以假手术组细胞为正常对照组,造模组细胞为OA软骨细胞,分别加入10、20、30μg/ml虾青素(低、中、高剂量);从第9周开始,每周处死1组动物,分离培养软骨细胞。连续8 w,DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Griess法测定培养上清中氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,RT-PCR法检测各组细胞相关炎性因子(IL)-1β、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、转录调节因子p53基因mRNA的表达。结果 DCFH-DA法检测细胞内ROS水平,对照组与模型组差异显著(P<0.01);虾青素低、中、高剂量组与模型组差异显著(P<0.01)。模型组中NaNO2、SOD、GSH-Px与对照组差异显著(P<0.01);NaNO2、SOD、GSH-Px水平虾青素低、中、高剂量组与模型组差异显著(P<0.01,P<0.05)。模型组中IL-1β、iNOS、p53基因mRNA的表达量与对照组及各剂量虾青素组差异显著(P<0.01)。结论虾青素对OA软骨细胞的氧化损伤及炎性有逆转作用,具有研发成为OA治疗药物的潜能。     

虾青素对高脂血症大鼠脂代谢的影响

目的研究虾青素对高脂饲料喂养下大鼠诱发高脂血症过程中血脂代谢的干预作用。方法将60只SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、高血脂模型组、辛伐他汀阳性药组(200 mg/kg)、虾青素高、中、低剂量组(415、210、110 mg/kg),分别饲喂标准、高脂、高脂+辛伐他汀、高脂+虾青素,于实验开始前1 d和开始后第4、8、12周末取空腹血,检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果与高血脂模型组比较,虾青素组的TC、TG、LDL-C在8、12 w时降低,差异显著(P<0.01),而HDL-C升高,差异显著(P<0.01)。结论虾青素可以对高脂饲料喂养大鼠诱发高脂血症过程中的血脂代谢产生影响,改善血脂变化。     

刺老苞不同炮制品对成肌细胞C2C12增殖活性和成分的影响

目的：基于刺老苞不同炮制品对成肌细胞C2C12增殖活性的影响,利用UPLC-ESI-MS/MS方法探究不同炮制品存在药效差异的物质基础。方法：MTT法检测不同浓度（25、50、100、200μg/mL）刺老苞生品、清炒品、盐炙品对成肌细胞C2C12增殖的影响。采用UPLC-ESI-MS/MS方法分析3种刺老苞炮制品的化学成分,并对其进行主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析、聚类分析等多元统计分析,初步推断不同刺老苞炮制品的成分差异。结果：MTT检测结果显示,在一定浓度范围内3种刺老苞炮制品均促进成肌细胞C2C12增殖,除了50μg/mL刺老苞生品和清炒品外,其余各浓度刺老苞生品、清炒品、盐炙品两两比较均具有显著性差异（P<0.01,P<0.05）。多元统计分析显示,3种炮制品存在药效差异可能与酚酸类、萜类、生物碱、黄酮类等成分有关。结论：该研究从药物的药效差异出发,结合代谢组学,初步阐述了刺老苞不同炮制品存在药效差异的物质基础,为民族药的进一步开发和应用奠定理论基础。     

维药无花果叶对抗大鼠泼尼松性骨质疏松的作用研究

目的：研究维药无花果叶醇提物对泼尼松致大鼠骨质疏松的对抗作用。方法：将50只大鼠随机分成正常对照组、泼尼松模型组和维药无花果叶醇提物高、中、低（10mg/kg、20mg/kg、30mg/kg）剂量组,每组10只。分别灌胃相应药物,每日1次,连续8周后取血清检测生化指标,对骨进行组织切片检查,长度、宽度以及骨质的测量。结果：泼尼松模型组大鼠股骨重量、尺骨羟脯氨酸和骨钙含量比正常对照组明显降低,胫骨骨髓腔中脂肪组织增多（P〈0．01）,血浆胆固醇（TG）含量上升、碱性磷酸酶（ALP）和高密度脂蛋白（吼）含量下降（P〈0．01）。维药无花果叶醇提组能有效提高骨的重量和骨质的含量（P〈0．01）,减少骨髓腔中脂肪的含量,升高碱性磷酸酶和高密度脂蛋白含量（P〈0．01）。结论：泼尼松可抑制大鼠的,肾生长及引起骨丢失,而维药无花果叶醇提物可有良好的对抗作用。     

维药阿魏菇对痴呆性大鼠学习记忆及Na^＋-K^＋-ATP、AchE酶活性的影响

目的：研究维药阿魏菇对老年痴呆性大鼠学习记忆及脑组织Na^＋-K^＋-ATP、AchE酶活性的影响。方法：将60只Wistar大鼠（雌雄各半）随机分为6组,每组10只。分别为正常对照组、模型组、脑复康组（15mg/kg）、阿魏菇低剂量组（10mg/kg）、阿魏菇中剂量组（20mg/kg）、阿魏菇高剂量组（30mg/kg）。正常饲养7天后,除正常对照组外其他各组均以60mg/kgAlCl3溶液背部皮下进行注射,造成慢性铝中毒老年性痴呆模型。给药2个月后进行学习记忆检测,脑组织Na^＋-K^＋-ATP、Ach酶活性测定。结果：与正常对照组相比,模型组在学习记忆能力与脑组织Na^＋-K^＋-ATP、Ach酶活性明显降低,而AchE酶活性明显升高（P〈0.01）;阿魏菇不同剂量水提物组均能提高学习记忆能力与脑组织Na＋-K＋-ATP、AchE酶活性,降低AchE酶活性（P〈0.01）,呈现一定的量效关系。结论：阿魏菇水提物可有效改善AlCl3导致老年痴呆性大鼠的学习记忆能力,同时可影响脑组织Na^＋-K^＋-ATP、Ach酶活性。     

β-隐黄质对糖尿病大鼠骨质影响的研究

目的:研究β-隐黄质对小剂量多次腹腔注射链脲佐菌素所致糖尿病大鼠骨质的影响。方法:用链脲佐菌素以30 mg/kg注射Wister雄性大鼠6周,建立糖尿病模型;测定并比较正常对照组、糖尿病模型组、β-隐黄质组和胰岛素治疗组的骨常规参数。结果:糖尿病模型组骨密度、骨结构力学参数、生物力学参数、骨矿物质及羟脯氨酸含量均比正常对照组有显著降低(P<0.01),而骨磷含量、骨和血清碱性磷酸转移酶均比正常对照组显著升高(P<0.01);β-隐黄质组在上述参数指标方面均与糖尿病模型组呈现显著性差异(P<0.01),与胰岛素治疗组呈现相同作用趋势,但效果不如后者。结论:长期摄入β-隐黄质可减少小剂量多次腹腔注射链脲佐菌素大鼠糖尿病的发病率,进而影响糖尿病大鼠骨质变化的发生。     

健骨生丸治疗股骨头缺血性坏死的临床修复过程及影像学变化

目的:观察健骨生丸治疗股骨头缺血性坏死的临床修复过程及影像学变化.方法:对7716例符合股骨头缺血性坏死诊断的患者给予健骨生丸口服治疗,3个月为1个疗程,观察治疗前后髋关节疼痛、屈伸不利、步履艰难等临床症状改善情况及影像学变化.结果:健骨生丸可使患者的临床症状明显减轻,改善坏死股骨头的血液供应,促进新骨生成,恢复骨小梁的结构,骨坏死不再继续和发展,并使坏死骨修复.7716例股骨头坏死患者经治疗后,显效5625例(72.9%),有效1 497例(19.4%),无效594例(7.7%),总有效率为92.3%.结论: 健骨生丸可有效促进股骨头坏死的修复.