化学发光法在DNA杂交分析中的应用

化学发光法在ＤＮＡ杂交分析中的应用袁津玮，周宜开（武汉同济医科大学环境医学系武汉４３００３０）用于检测特异ＤＮＡ和ＲＮＡ序列的核酸杂交分析技术，作为分子生物学的最基本技术之一，已广泛应用在生命科学，尤其是医学的各个领域。传统的核酸分子杂交采用的是放射...     

化学发光方法检测培养细胞释放的一氧化氮

「目的」用化学发光法检测培养细胞释放的ＮＯ。「方法」ＮＯ２＾－是生物样品ＮＯ代谢产物的志物。在酸性条件下,用ＫＩ将ＮＯ２＾－还原成ＮＯ,ＮＯ和ｌｕｍｉｎｏｌ－Ｈ２Ｏ２体系产生化学发光。按照去细胞、去蛋白、加络合剂ＥＤＴＡ、将样品和ＫＩ溶液充氮气、把ＫＩ加到样品中、测化学发光值这几个步骤,我们检测了加脂多糖（ＬＰＳ）、加Ｎ（Ｇ）－甲基－Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）、不加任何物质作对照三组培养细胞释放Ｎ     

大鼠组织中超氧阴离子自由基的提取和化学发光测定

在通氮条件下,以四丁基氯化铵(TBAC)为稳定剂,用去水除氧的二甲基亚砜(DMSO),从大鼠新鲜组织中提取超氧阴离子自由基(O_2~-),并运用化学发光法进行检测.提取最佳时间为3min。发光体系pH为8。测定结果表明。大鼠不同组织中(O_2~-)含量(cpm/g·ml)顺序为肺>肾>肝>脑。     

应用化学发光自显影技术检测甲型肝炎病毒和人IgM

运用化学发光自显影技术和化学发光酶免疫分析法，可检出15．60pg辣根过氧化物酶；在甲型肝炎病毒和人IgM的免疫测定中，检出限分别为1：128（滴度）和6．4×104（人标准血清稀释倍数），较酶连接免疫吸附测定比色法灵敏4～8倍。     

核酸分子的化学发光标记和化学发光检测

非同位素标记是核酸分子杂交和检测的关键技术。在已知的各种非同位素标记检测方法中,化学发光标记和检测以其灵敏度高、安全无害和操作简便等优点,愈来愈受到重视。本文对核酸分子的化学发光标记和核酸杂交分子的化学发光检测作一简要介绍。     

生物发光法测定氯霉素和金霉素含量

氯霉素（CP）、金霉素（CTC）为临床上常用的广谱抗菌素，药典对其原料、制剂采用紫外分光光度法（UV）或微生物法测定含量［’］，近年来也有利用导数极谱法、高效液相色谱法（HPI，C）测定CP、CTC的含量。本大利用CP、CTC对发光细菌发光强度的抑制［’］，在一定条件下，发光抑制程度与CP（CTC）含量呈线性或对数线性相关的特点建立了测定CP、CTC含量的新方法。l材料与方法1．1材料：①仪器：DG3O3O发光光度计（华东电子管厂），721型分光光度计（上海第三分析仪器厂）。②试剂：CP、CTC标准品（湖北省药品检验所）；CP…     

聚合酶链反应-增强化学发光法快速检测结核杆菌的研究

目的　建立聚合酶链反应 -增强化学发光法 (polymerase chain reaction-enhanced chemilumine cence ,PCR-ECL)快速高灵敏度和高特异性检测结核杆菌的方法。方法 以结核分支杆菌、牛分支杆菌特异性抗原Pab基因的419bp片段为靶序列,PCR体系经优化,直接酶标法标记探针 ,增强化学发光检测(ECL)进行分子杂交。结果 PCR体系对结核分支杆菌、牛分支杆菌、卡介苗的扩增为阳性,PCR体系灵敏度为5fgDNA分子。ECL体系灵敏度为0.5pgDNA分子。采用模拟痰样,可检至10个以下结核杆菌。结论 建立了结核杆菌的PCR-ECL快速检测方法,整个过程可在一天半内完成。     

低氧对人胚肺成纤维细胞转化生长因子β1表达的影响

应用核酸原位杂交及增强化学发光免疫斑点法,观察常氧（Ｎ）、低氧（Ｈ）、常氧和低氧猪肺动脉内皮细胞条 件培养液（ＮＥＣＣＭ和 ＨＥＣＣＭ）对人胚肺成纤维细胞转化生长因子β_１（ＴＧＦβ_１） ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响。结果表 明：Ｈ组ＴＧＦβ_１ｍＲＮＡ表达为Ｎ组的１．３６倍（Ｐ＜０．０１）,同时在其培养上清液中,ＴＧＦβ_１蛋白含量也明显升高为Ｎ 组的１．８倍。ＨＥＣＣＭ组ＴＧＦβ_１ｍＲＮＡ和蛋白表达较ＮＥＣＣＭ组均下降,ｍＲＮＡ为ＮＥＣＣＭ组的９０％,Ｐ＜０．０１。蛋 白含量为后者的６２．２％。提示：（１）低氧促进入胚肺成纤维细胞合成和分泌ＴＧＦβ_１。（２）在低氧条件下,肺动脉内皮 细胞可能合成某种因子,抑制成纤维细胞ＴＧＦβ_１基因转录和蛋白表达。