心肌型脂肪酸结合蛋白在急性心肌梗死早期诊断中的应用

目的　评定脂肪酸结合蛋白 (H FABP)在急性心肌梗死 (AMI)早期诊断中的应用。　方法　采用自行开发的H FABP酶联免疫吸附试验一步夹心法对 12 6名健康体检者和 5 3例AMI患者血清H FABP进行检测 ,同时测定肌红蛋白 (MYO)、肌酸激酶同工酶 (CK MB)、肌钙蛋白I(cTnI) ,并对AMI进行动态观察 ,对早期诊断的敏感性、特异性、时效性等进行分析。　结果　H FABP在AMI后 (1 84± 0 6 4 )h血浆浓度即开始升高 ,比CK MB、cTnI早 (P <0 0 1) ;时间浓度动态曲线与MYO相似 ,与CK MB、cTnI相比曲线前移。AMI后 2h的敏感性和特异性分别为 76 4 7%、80 4 1% ;4h的敏感性和特异性分别为 89 16 %、91 2 6 %。　结论　AMI后 2、4hH FABP检测对AMI早期诊断具有较高的敏感性和特异性 ,可望成为重要的早期和排除诊断的血清心肌标志物的手段之一。     

白介素-6对人冠脉平滑肌细胞表达妊娠相关血浆蛋白-A的影响

目的探讨炎症因子白介素-6(IL-6)对人冠脉平滑肌细胞表达妊娠相关血浆蛋白A的影响。方法实验于2005年5月至2006年8月在解放军305医院老年病中心实验室完成。人冠脉平滑肌细胞37℃、5%CO2条件下常规培养。实验用5~7代的细胞,按2.5×105/mL密度接种于25cm2的培养瓶中,24h后换液,生长接近80%融合时进行如下处理:(1)应用质量浓度为10ng.mL-1的IL-6刺激人冠脉平滑肌细胞,分别在共同培养0,2,4,8,24,36h后收集细胞。(2)应用不同质量浓度的IL-6(0,5,10,50ng.mL-1)刺激人冠脉平滑肌细胞,共同培养6h后收集细胞。应用实时荧光定量聚合酶链反应的方法检测细胞内妊娠相关血浆蛋白A基因的表达量。应用SPSS10.0软件进行统计学描述与分析,所得数据用x-±s表示,多组间比较用onewayANOVA检验,两两比较应用SNK法检验,并进行pearson相关分析,P<0.05为差异有显著性意义。结果同剂量白介素-6刺激下,妊娠相关血浆蛋白A的表达量在2h时就开始发生上调,8h达高峰,而后开始下降;在不同剂量白介素-6刺激下,妊娠相关血浆蛋白A的表达量在实验剂量范围内随着白介素-6的剂量加大呈上升趋势。除5ng.mL-1和10ng.mL-1组之间差异无显著性意义(P=0.065),其余组间差异均有显著性意义(P<0.05)。结论炎症因子白介素-6能促进冠脉平滑肌细胞中斑块稳定相关标志物妊娠相关血浆蛋白A的表达,可能是炎症在急性冠脉综合征的发生发展中起重要作用的机制之一。     

改良液氮冻伤法建立易损动脉粥样硬化斑块模型

目的建立改良液氮冻伤法制作动脉粥样硬化(AS)易损斑块(VP)模型,验证改良法是否优于传统的造模方法。方法雄性新西兰白兔24只随机分为改良方法组(A组)和传统方法组(B组)各12只。分别按照改良方法及传统方法造模,6 w末各组随机抽取4只兔子(A1组=4只,B1组=4只)检测斑块形成状况。A组6 w末、B组10 w末剩余兔子(A2组=8只,B2组=8只)以液氮激发斑块破裂。激发48 h后取出右颈总动脉行HE染色及免疫组化检测斑块内基质金属蛋白(MMP)-1水平。不同时间点分别采集空腹静脉血检测兔血脂水平总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白(LDL)及血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果高脂3 d后兔血脂水平已明显升高,1 w后达基础水平的4¹5倍;血脂变化曲线可见第1周血脂上升最为明显。与基线水平相比,高脂喂养1 w后两组兔血清hs-CRP即明显升高,至激发前进一步升高,激发后hs-CRP较激发前明显升高;各时间点两组间比较无显著性差异。大体观察及HE染色可见6 w末A1组兔已形成明显的AS化斑块,而B1组兔斑块较小;激发后48 h两组兔子的右颈总动脉均可见AS表面内皮损伤,部分形成血栓;两组易损斑块在组织结构上无明显差异,免疫组化染色见两组斑块处均有MMP-1蛋白的大量表达。结论改良液氮冻伤法可构建易损/破裂粥样硬化斑块,较传统方法明显缩短成模时间,节约造模成本,更快速,更高效。     

急性冠状动脉综合征患者外周血妊娠相关血浆蛋白A水平的变化

目的:分析外周血妊娠相关血浆蛋白A水平与急性冠状动脉综合征的关系。方法:选择解放军总医院2004-10/2005-02住院的急性心肌梗死、不稳定型心绞痛、稳定型心绞痛患者及同期在解放军第三○五医院门诊查体的健康志愿者各30例,应用酶联免疫吸附方法测定各组的外周血妊娠相关血浆蛋白A,同时测定各组超敏C-反应蛋白、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油及心肌梗死和不稳定型心绞痛患者的肌酸激酶、肌酸激酶同工酶和肌钙蛋白T水平。应用SPSS12.0软件进行直线回归和多元线性回归分析,分析妊娠相关血浆蛋白A、超敏C-反应蛋白水平与心肌酶学标志物的关系,以及妊娠相关血浆蛋白A与冠状动脉粥样硬化性心脏病危险因素的关系。结果:120例受试者全部进入结果分析。①心肌梗死组和不稳定型心绞痛组妊娠相关血浆蛋白A水平显著高于稳定型心绞痛组和健康对照组[(6.23±7.38),(5.74±7.45),(1.23±0.70),(0.87±0.57)mU/L,P<0.05],前2组组间及后2组组间比较差异不显著(P>0.05)。②在心肌梗死与不稳定型心绞痛患者,妊娠相关血浆蛋白A与超敏C-反应蛋白水平呈直线相关(R2=0.285,0.779,P<0.01)。③急性冠状动脉综合征患者外周血妊娠相关血浆蛋白A水平与年龄、体质量指数、血脂、白细胞、吸烟等危险因素无关(P>0.05),与冠状动脉狭窄病变支数无关(P>0.05)。④心肌梗死患者外周血妊娠相关血浆蛋白A水平与心肌酶学指标间无相关性(P>0.05)。结论:急性冠状动脉综合征患者外周血妊娠相关血浆蛋白A水平明显升高,其升高水平与炎症标志物超敏C-反应蛋白相关。提示妊娠相关血浆蛋白A与动脉粥样斑块的稳定性密切相关,对急性冠状动脉综合征诊断、预测以及危险分层可能具有重要价值。     

性激素与冠心病及超敏C反应蛋白关系的研究

目的:探讨性激素与hs-CRP的关系及对男性冠心病的发病影响。方法:根据WHO诊断标准选择了68例男性冠心病病人和15例健康男性,采用放射免疫法测定E2、T与hFSH,计算出E2/T比值。并用同一标本采用ELISA法测定hs-CRP。结果:发现男性冠心病E2,E2/T比值明显高于对照组,T水平降低(P<0.05～<0.01);在男性冠心病中E2与hs-CRP呈正相关(r=0.332,P<0.01),hFSH、T及E2/T比值与hs-CRP无相关性。结论:性激素平衡失调是冠心病的独立易患因素,性激素水平与炎症因子C反应蛋白有着密切互为因果的关系。     

白细胞介素-1β和白细胞介素-6对妊娠相关血浆蛋白-A表达的影响

目的探讨炎性因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)表达妊娠相关血浆蛋白-A(pregnancy-associated plasma pro-tein-A,PAPP-A)的影响。方法应用20μg/L的IL-1β、10μg/L的IL-6各自刺激HCASMC,共同培养0、2、4、8、243、6 h后收集细胞。应用不同浓度的IL-1β(0、5、20、40μg/L)I、L-6(0、5、10、50μg/L)刺激HCASMC,共同培养6 h后收集细胞。应用实时定量聚合酶链反应的方法检测细胞内PAPP-A基因的表达量。结果在同剂量IL-1βI、L-6刺激下,PAPP-A的表达量在2 h时就开始发生上调,8 h达高峰,而后开始下降;在不同剂量IL-1βI、L-6刺激下,PAPP-A的表达量在实验剂量范围内随着剂量的加大呈上升趋势(IL-1β:r=0.972,P=0.000;IL-6:r=0.941,P=0.000)。结论炎性因子IL-1βI、L-6能促进HCASMC中斑块稳定相关标记物PAPP-A的表达,可能是炎症在急性冠状动脉综合征发生发展中的重要作用机制之一。     

IL-1β对人冠状动脉平滑肌细胞妊娠相关血浆蛋白A分泌的影响

目的探讨IL-1β对人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）分泌妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）的影响。方法培养HCASMC,至第5～7代时,分别加入20μg/L和0μg/L的IL-1β（0μg/L组为对照组）,分别孵育2、4、8、24、36 h后,收集细胞培养上清液;采用IL-1β（0、5、20、4μg/L）刺激HCASMC 6 h后分别收集细胞和细胞培养上清液。用ELISA法检测细胞培养上清液内PAPP-A的表达量。结果IL-1β组PAPP-A表达量在2 h时开始增加,8、24和36 h时其浓度显著高于对照组（P均〈0.05）;随着IL-1β剂量增加,PAPP-A的表达量不断升高,其中20μg/L和40μg/L组的浓度均显著高于0μg/L组的浓度（P均〈0.05）。结论IL-1β可使HCASMC分泌PAPP-A增加,并呈时间和剂量依赖性。     

白藜芦醇抑制大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌增殖

目的研究白藜芦醇对大鼠颈动脉内膜球囊损伤后血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 72只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、损伤组和干预组,每组各24只。干预组于手术前1周及术后给予白藜芦醇50 mg/kg灌胃,余两组用等量生理盐水灌胃。术后1、7和14天观察大鼠颈总动脉形态学变化并进行图像分析;免疫组织化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,RT-PCR检测血管平滑肌中妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的表达。结果与假手术组比较,损伤组和干预组7、14天管腔面积明显减小。与损伤组比较,干预组7、14天管腔面积明显扩大(P<0.01),内膜面积/中膜面积明显减小(P<0.01);干预组7、14天PCNA,PAPP-A表达较损伤组明显降低(P<0.01)。结论白藜芦醇可能是通过抑制血管内膜平滑肌细胞PAPP-A的表达,减轻大鼠颈动脉球囊损伤后血管内膜平滑肌的增殖,为临床白藜芦醇抗血管平滑肌增殖的治疗提供理论依据。     

白细胞介素-6对人冠脉平滑肌细胞妊娠相关血浆蛋白A分泌的影响

目的 研究炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)分泌妊娠相关血浆蛋白A(pregnancy-associated plasma protein-A,PAPP-A)的影响.方法 一期:培养HCASMC,至第5～7代时,分别加入10 μg/L和0 μg/L的IL-6,0 μg/L组设为对照组,均分别孵育2,4,8,24,36 h后,收集细胞培养液上清.二期:采用不同浓度的IL-6(0,5,10,50 μg/L)(0 μg/L组设为对照组)刺激HCASMC 6 h后分别收集细胞和细胞培养液上清.应用酶联接免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)方法检测细胞培养液上清内PAPP-A的表达量.结果 一期,PAPP-A的表达量在2 h时开始增加,4,8,24 h和36 h组浓度显著高于对照组(4 h:P=0.008;8 h:P=0.007;24 h:P=0.023;36 h:P=0.017),并随时间的延长而不断增加;二期,在实验剂量范围内,随IL-6剂量增加,PAPP-A的表达量不断升高,其中10 μg/L和50 μg/L组均显著高于对照组(10 μg/L:P=0.015;50 μg/L:P＜0.001).结论 IL-6可使HCASMC表达不稳定斑块标记物PAPP-A的升高,说明炎症可能是急性冠状动脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)发生发展的机制之一.     

PAPP-A、IGF-Ⅰ在非ST段抬高的急性冠脉综合征患者中的临床意义

目的探讨非ST段抬高的急性冠脉综合征（Non-ST elevation acute coronary syndromes，NSTEACS）患者血清妊娠相关血浆蛋白A（pregnancy associated plasma-A，PAPP-A）及胰岛素样生长因子I（insulin-like growth factor-1，IGF-I）浓度变化的临床意义。方法选择最终以出院诊断为标准NSTEACS患者65例，冠脉造影证实的稳定型心绞痛（stable angina pectoris，SAP）患者28例，正常对照30例。入院后12h内均抽取静脉血5ml，测定IGF-I、PAPP-A及C反应蛋白（C-reactive protein，CRP），常规测定肌钙蛋白T（cTnT）、血脂、血糖等，各组间进行比较并进行相关性分析。结果NSTEACS患者的PAPP-A、IGF-I、CRP明显高于SAP组和对照组（P〈0．01），IGF-I在SAP组明显低于对照组（P〈0．01），而PAPP-A、CRP在SAP与对照组中无显著差异（P〉0．05）。在NSTEMI组中PAPP-A与IGF-I呈正相关，PAPP-A、IGF-I与CRP均呈正相关，而与cTnT无明显相关性。结论PAPP-A、IGF-I对NSTEACS具有一定的诊断、预测价值。