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1.
一株铜绿假单胞菌中检出两种新的整合子 总被引:11,自引:0,他引:11
目的研究铜绿假单胞菌多重耐药的临床分离株RJ217中发现的两个新整合子的结构,并分析其在多重耐药性中的作用。方法用改良三相试验分析RJ217产β-内酰胺酶的情况,用常规和长片段PCR法扩增耐药基因和整合子,并对PCR产物进行序列分析。结果发现铜绿假单胞菌RJ217携带两个新的整合子,其中一个携带veb-I型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因,这两个整合子的结构分别为IS10-like-veb-I-aadB-oxa10/aadA1和aadB-oxa10/aadA1。结论整合子介导的耐药基因在RJ217的多重耐药性中发挥了重要的作用。 相似文献
2.
目的 建立一种利用表型筛选的方法来测定整合子对耐药性基因盒的整合频率. 方法 将整合子和aadA2耐药性基因盒克隆到同一质粒pACYCl84的不同位点,该重组质粒和高表达整合酶的重组质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3),挑选阳性克隆过夜培养后,取适量菌液涂布含有链霉素的LB琼脂平板,同时取适量菌液涂布不含链霉素的LB琼脂平板,过夜培养后计数菌落个数,用以计算整合频率.同时以链霉素平板上的阳性克隆为模板,进行PCR扩增.对扩增产物切胶回收纯化,然后进行测序,以确定aadA2耐药性基因盒整合位点. 结果 在大肠杆菌BL21(DE3)宿主中,整合子对aadA2耐药性基因盒的整合频率为1.1×103,主要的整合位点为attI. 结论 该系统可以用于整合子对基因盒捕获频率的测定. 相似文献
3.
提高学生写作水平是语文教学的主要目标。语文教学应把“教”与“学”有机地结合起来,从两方面实现这一目标。1 实行“三导”,以教促写 一是写前指导。 对于尚未掌握写作技巧的学生来说,其写作观是一种“任务观”。对此,教师应在写作前传授给学生一些基本技巧,以增强兴趣,启发思维。如要学生写散文,可结合《荷塘月色》的教学,总结出 4条提示: (1)所写的景、事必须有一条线索 (情或物 )贯穿,以做到形散神聚; (2)所写的景、事必须为表情达意服务,即景、事等要成为作者情感的依托对象; (3)语言要有诗情画意,新颖为佳; (4)要注意… 相似文献
4.
OXA型β-内酰胺酶 总被引:6,自引:0,他引:6
OXA型β-内酰胺酶大多数出现在革兰氏阴性菌(主要为肠杆菌科菌和铜绿假单胞菌)中,通常介导耐氨基组和脲基组青霉素,强水解氯唑西林、苯唑西林和甲氧西林。克拉维酸仅能微弱抑制其活性,但它却被NaCl强烈抑制。OXA型酶相当于Ambler D类酶,和A、C类酶一样为活性一位点丝氨酸。OXA型酶的氨基酸序列与A、C类酶的一致性约为16%。至今已报道了33种OXA型酶,命名为OXA-1-31及Amps和LCR-l。大多数酶作了DNA序列分析,有的作了生化分析,对OXA-10和OXA-13还作了三维结构分析。根据氨基酸序列同源性可将OXA型酶分为6个群,群与群之间相关性很弱(约20%-30%)。OXA型酶耐药谱通常很窄,但现已发现OXA-2或OXA-10突变衍生酶的耐药谱已扩散到第三代头孢菌素和/或亚胺培南。编码OXA型酶的基因常位于质粒和/或整合子中,具有很强的扩散能力。 相似文献
5.
6.
7.
上海出现PER-1型超广谱β内酰胺酶 总被引:15,自引:1,他引:15
目的 分析多重耐药鲍曼不动杆菌148号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因及耐药性的转移能力。方法 用等电聚焦电泳试验和三相水解试验分析148号试验菌株所产β内酰胺酶,并进行初步分类,再用聚合酶链反应(PCR)扩增和PCR产物测序方法确认β内酰胺酶基因。结果 148号试验菌株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs),经分子生物学方法证实有blaPER—1基因,同时还有aacA4基因。结论 148号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因,可能是产生了可转移的PER—1型ESBLs,blaPER—1基因位于质粒上。 相似文献
8.
从肺炎克雷伯菌临床菌株中检出质粒介导的AmpC DHA-1型β-内酰胺酶基因 总被引:3,自引:0,他引:3
目的研究肺炎克雷伯菌的耐药机制,检测肺炎克雷伯菌中AmpC酶的基因.方法用纸片扩散法药敏试验和三相水解试验,从23株耐药的肺炎克雷伯菌临床菌株中初筛产AmpC酶的菌株;用PCR扩增耐药基因,将试验产物测序,并在Genbank中进行比对;用转化试验确证耐药基因是否通过质粒传播.结果发现3株肺炎克雷伯菌产诱导型质粒介导的DHA-1型AmpC β-内酰胺酶.结论国内首次发现肺炎克雷伯菌出现质粒介导的DHA-1型AmpC β-内酰胺酶. 相似文献
9.
10.
目的研究SHV-12型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的特性。方法将b laSHV-12基因连接至pET28 a载体上,并用重组质粒转化大肠埃希菌BL21进行克隆表达,挑选b laSHV-12阳性表达的菌落,提取其酶蛋白进行等电点测定和酶动力学分析。结果SHV-12型ESBL等电点为8.2。同时,在所测的几种抗生素中,该酶对头孢他啶和头孢噻肟的Km相同且最小;对头孢噻吩,有着最大的Vm ax/Km;而对阿莫西林,表现出最大的Km和最低的Vm ax。结论SHV-12型ESBL对头孢他啶和头孢噻肟具有高的亲和力,而对头孢噻吩有最大的催化效能。 相似文献