大鼠脂肪肝模型的建立

目的：探讨脂肪肝动物模型的制作方法。 方法：用缺乏蛋氨酸和胆碱的饲料喂养大鼠,复制脂肪肝模型,并进一步研究门静脉压、肝重/体重比以及肝脏病理结构的变化。 结果：大鼠肝脏第14天出现较多的脂滴积累,第21天超过2/3以上的细胞内均出现脂滴,肝细胞形态不规则,肝窦变窄,不规则;门脉压较正常大鼠升高。体重和肝重均小于正常大鼠。 结论：用缺乏蛋氨酸和胆碱的饲料喂养大鼠复制脂肪肝模型,喂养时间短,价格低廉,是一种较好的脂肪肝模型制作方法。     

巧用一次性病理切片刀体会

一次性切片刀以其锋利的刀刃 ,能切出高质量的蜡片(甚而连续切片 )而深受广大病理技术人员的青睐 ,应用也日益普及。然而目前市场销售的进口刀片 ,价格仍较昂贵 ,一般每张刀片使用有效量又仅在３０～４０只蜡块 ,如何提高刀片使用效率 ,节省成本 ,已成为技术员关心的问题。我们多年来采用Ｌｅｉｃａ２０３５型切片机和其８１８型一次性刀片 ,结合切片技巧 ,提高了一次性刀片的使用率 ,并保证制片质量 ,现将体会介绍如下。不同组织蜡块切片时均采取将刀片移动分隔粗切区域和细切区域 ,以保护刀刃的锋利。因为粗切时进刀幅度相对较大而切下的…     

肺间质纤维化为主要表现显微镜下多血管炎二例

例1,男性,86岁,以“反复咳嗽、咳痰2年,加重2个月”于2006年5月入院,2年前因“咳嗽、咳痰、发热1周”曾住本院治疗。胸部CT检查:两肺弥漫间质性改变伴感染并右上肺及两下肺支气管扩张,尿常规和肾功能检查正常。治疗后病情好转出院。出院诊断为支气管扩张伴感染,中度贫血。1年后     

脂肪肝大鼠肝脏热缺血再灌注损伤过程中MDA、ET—1、TNFα及ALT的变化

目的；探讨脂肪肝热缺血再灌注损伤过程中丙二醛（MDA）、谷丙转氨酶（ALR）、内皮素（ET-1）及肿瘤坯死因子（TNFα）的变化。方法：首先通过给予实验动物改良的缺乏胆碱和蛋氨酸（CMDD）饲料制备脂肪肝模型。观察脂肪肝组和正常肝组门脉压的关系。以及在缺血前、缺血15或30min再灌注60min时，肝组织中MDA、血清ET-1、TNFα、ALT水平的变化。结果：脂肪肝组门静脉压高于正常肝组，缺血前后脂肪肝组肝组织中MDA含量以及血清ET-1、TNFα、ALT水平高于正常肝组，并随缺血时间延长耐 产高。结论：肝脂肪变性引起肝窦狭窄和不规则，门脉压增高，含大量脂肪的肝细胞对热缺血再灌注损伤敏感性增高。通过产生过多的MDA、ET-1、TNFα，导致肝细胞破坏，血清ALT升高。     

抗原特异性IgG在支气管哮喘中作用的初步研究

目的探讨抗原特异性IgG在支气管哮喘免疫学发病机制中的作用.方法复制采用通气功能作为判定指标的小鼠实验性支气管哮喘模型,用间接ELISA方法检测哮喘小鼠血清中特异性IgG、IgE,通过IgG与通气功能指标-气道阻力等的相关性检验,初步分析IgG在支气管哮喘中的作用.结果支气管哮喘小鼠血清中特异性IgG增高(t=4.537,P＜0.05),IgG与气道阻力呈负相关(r=-0.708,0.02＜P＜0.05),与IgE虽无明显相关, 但有负相关倾向(r=-0.452,0.10＜P＜0.20).结论初步分析认为抗原特异性IgG对支气管哮喘发作起抑制作用.     

新生小鼠皮肤成纤维细胞的分离培养与鉴定

目的：建立一种简单易行的自新生小鼠皮肤分离培养成纤维细胞的方法,并对分离细胞进行鉴定。方法：无菌取新生Balb/c小鼠背部皮肤,剪碎呈1 mm2大小,组织块均匀放置于培养皿并以DMEM（含10%胎牛血清）培养基对组织块进行培养;以胰蛋白酶消化分离细胞-重新贴壁法对分离培养细胞进行纯化;以NIH3T3细胞为对照,免疫荧光、流式细胞术、Western blot检测波形蛋白表达情况以对培养的成纤维细胞进行鉴定。结果：新生小鼠背部皮肤组织培养3 d时可见细胞呈细长梭形或呈多角形,组织培养5 d后可见大量细胞自组织块游离生长,组织培养7 d后可见细胞呈单层漩涡状排列或纵横交错,贴壁细胞团呈放射状生长。免疫荧光、流式细胞术、Western blot检测发现分离细胞和NIH3T3细胞均表达波形蛋白;流式细胞术证实分离的成纤维细胞波形蛋白表达阳性率和平均荧光密度分别为13.33%和9.89,而NIH3T3细胞波形蛋白阳性率和平均荧光密度分别为28.11%和14.16。结论：分离培养的细胞具有成纤维细胞的形态学特征,并表达成纤维细胞的特征分子波形蛋白。以组织块直接培养法成功自新生小鼠皮肤分离培养成纤维细胞,为建立肿瘤体外模拟微环境提供实验材料和研究基础。     

抗体依赖的细胞介导的细胞毒效应在哮喘发病机制中的作用

目的: 进一步探讨支气管哮喘发病机制。方法: 建立小鼠哮喘模型,分离哮喘鼠和正常鼠脾脏各种免疫细胞,包括单核/巨噬细胞(M)、树突状细胞(DC)、B细胞、CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞,并以细胞增殖法和改良的MTT比色法^[1]检测了上述各种细胞的抗体依赖的细胞介导的细胞毒效应(ADCC)。结果: 哮喘小鼠M自然状态下ADCC作用弱于对照组(P＜0.05);哮喘小鼠B细胞自然状态下ADCC作用弱于对照组(P＜0.05);哮喘小鼠T细胞及其亚群自然状态下ADCC作用弱于对照组(P＜0.05);哮喘小鼠树突状细胞自然状态下ADCC作用与对照组无显著差异(P＜0.05)。结论: 在小鼠哮喘模型中,多种免疫细胞的ADCC作用减弱可能在支气管哮喘免疫功能紊乱中起作用。     

完全失去动脉血供后大鼠肝门部胆管微血管数对胆管上皮细胞核增殖与ER表达影响

目的探讨完全失去动脉血供后肝门部胆管微血管数改变对胆管上皮细胞核增殖活性以及雌激素受体表达的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、实验组,应用免疫组化方法,观察肝门部胆管周围血管丛(PBP)内层微血管数改变、胆管上皮细胞核增殖指数(PI)和雌激素受体(ER)表达情况以及胆管壁组织病理学变化。结果与对照组相比,实验组肝门部胆管周围血管丛内层微血管总数和微动脉数均显著下降,胆管上皮细胞PI以及ER表达均显著升高,胆管壁组织呈慢性炎症增生性改变。结论一定流量与含氧量的血液对维持胆管周围血管丛灌注,保持胆管上皮细胞正常生理功能和胆管壁组织正常形态结构有重要的意义。     

动脉化门静脉胆管微血管数量对胆管上皮细胞核增殖与雌激素受体表达的影响

目的：探讨动脉化门静脉后,肝门部胆管周围血管丛（PBP）内层微血管数量改变对胆管上皮细胞核增殖活性和雌激素受体表达的影响。 方法：28只实验大鼠随机分为对照组（A组）、完全动脉化门静脉组（B组）、限流术后完全动脉化门静脉组（C组）、肝门部胆管完全门静脉供血组（D组）。应用免疫组化方法,观察在不同流量与含氧量血液灌流的条件下,PBP内层微血管数以及胆管上皮细胞增生和雌激素受体表达情况。 结果：与A组比较,C组、D组PBP内层微血管总数均降低,D组下降最为明显（P<0.01）;B组、C组和D组的微动脉数均有下降趋势,其中D组下降最为明显（P<0.01）。与A组相比,各组胆管上皮细胞核增殖指数及雌激素受体表达呈升高趋势,D组上升最为明显（P<0.01）。D组胆管壁组织呈慢性增生性炎症改变。 结论:一定流量与含氧量的血液对保证PBP灌注,满足胆管壁组织氧的需求有重要的意义。动脉化门静脉高含氧量与高流量的血液可通过侧支血管逆流灌注BP,是肝门部胆管壁组织维持正常形态的解剖学基础。     

脂肪肝大鼠肝脏热缺血再灌注损伤过程中MDA、ET-1、TNFα及ALT的变化

目的 :探讨脂肪肝热缺血再灌注损伤过程中丙二醛 ( MDA)、谷丙转氨酶 ( ALT)、内皮素( ET- 1)及肿瘤坏死因子 ( TNFα)的变化。方法 :首先通过给予实验动物改良的缺乏胆碱和蛋氨酸( CMDD)饲料制备脂肪肝模型 ,观察脂肪肝组和正常肝组门脉压的关系 ,以及在缺血前、缺血 15或30 min再灌注 60 min时 ,肝组织中 MDA、血清 ET- 1、TNFα、ALT水平的变化。结果 :脂肪肝组门静脉压高于正常肝组 ,缺血前后脂肪肝组肝组织中 MDA含量以及血清 ET- 1、TNFα、AL T水平高于正常肝组 ,并随缺血时间延长而增高。结论 :肝脂肪变性引起肝窦狭窄和不规则 ,门脉压增高。含大量脂肪的肝细胞对热缺血再灌注损伤敏感性增高 ,通过产生过多的 MDA、ET- 1、TNFα,导致肝细胞破坏 ,血清AL T升高。