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目的建立人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR,研究其耐药机制,探讨小白菊内酯(PAR)逆转A549/GR耐药的机制。方法以吉非替尼为诱导剂,人肺腺癌细胞系A549为诱导对象,采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR。采用细胞毒实验(MTT)法测定细胞耐药指数,免疫印迹法(Western blotting)检测细胞耐药相关蛋白表达水平,进一步通过MTT法检测PAR对A549/GR的逆转倍数,Annexin V-FITC双标法检测PAR的促凋亡作用,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果所建立的人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR耐药指数为18.7。A549/GR细胞中MDR和ABCG2耐药相关蛋白表达水平较A549升高。MTT结果显示PAR对耐药细胞A549/GR的逆转倍数为8.66。Annexin V-FITC凋亡检测结果显示PAR能有效促进A549/GR细胞凋亡,Western blotting检测显示PAR能有效降低survivin、Bcl-2两种抑制凋亡相关蛋白的表达。结论成功建立了人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR;PAR通过促进A549/GR细胞凋亡有效逆转其耐药。 相似文献
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为了对人类第9号染色体进行 SCE 分析,我们参照 Bobrow 等、Gagne 等的 Giemsa-11染色方法和 Alvec(3)的碱性溶液直接姊妹染色单体差别染色 Sister Chromatid Differentiation,SCD),摸索建立了同时显示 G—11染色和 SCD 的新方法,现介绍于下。一、细胞培养和染色体标本制备 经肝素抗凝的外周血0.3ml 接种于5ml 培养基内(含 RPMI16404ml、小牛血清1ml、广州产 PHA 400μg、青霉素、链霉素各500国际单位),置37℃培养24~26小时,加入BrdU(最终浓度10μg/ml)避光继续培养44~46小时,培养终止前2小时加入秋水仙素(最终浓度0.8 相似文献
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人类染色体的多态性与主体异染色质有关。第9号染色体异染色质区的大小和位置的改变在人群中出现的频率很高,特别引人瞩目。迄今为止,已有大量的文献报道了9号染色体的这种多态现象。最近,我们在三例无血缘关系的家庭中发现了9号染色体一种新的变异:在增长的次缢痕异染色质区内,出现一条明显的深带。现将已做家系调查的两例报道于下。例1.王××(遗883号),男,18岁,因肌肉萎缩于1981年11月来遗传门诊。外周血淋巴细胞染色体 G 显带检查发现一条9号染色体 qh 增长,其中部有一条明显的深染带,其它染色体未发现异常。追查其家系,发 相似文献
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目的探讨丙戊酸盐对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/VCR耐药的逆转作用。方法 MTT法检测SGC-7901/VCR对VCR的耐药指数;MTT法检测丙戊酸盐对SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞增殖的抑制作用和对VCR耐药逆转的效果;用流式细胞术检测丙戊酸盐诱导细胞凋亡的作用,将SGC-7901/VCR细胞用VCR联合丙戊酸盐处理48h后,检测各组凋亡率的差别;用Western blot检测丙戊酸盐处理后蛋白质的表达水平,分别用不同浓度(0、0.5、1.0、2.0mmol/L)的丙戊酸盐作用于48h或同一浓度(1mmol/L)作用12、24、48h后,检测SGC-7901/VCR细胞中乙酰化组蛋白3(AcH3)表达水平对丙戊酸盐所呈现的剂量或时间依赖性变化。结果与亲代细胞SGC-7901相比,耐药细胞SGC-7901/VCR对VCR高度耐药,耐药指数为36.0(P<0.05);亲代细胞SGC-7901和耐药细胞SGC-7901/VCR对丙戊酸盐的敏感性相似,二者的IC50差异无统计学意义(P>0.05),丙戊酸盐与VCR联用能逆转SGC-7901/VCR细胞对VCR的耐药性,并增加细胞的凋亡(P<0.05);丙戊酸盐能增加SGC-7901/VCR细胞AcH3的表达,且具有浓度和时间依赖性。结论丙戊酸盐可通过诱导细胞凋亡和增加组蛋白的表达逆转SGC-7901/VCR细胞的耐药性。 相似文献
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目的建立稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为探讨Wnt/β-catenin信号在鼻咽癌发生中的作用提供细胞模型。方法于β-catenin CTNNB1基因编码区选择3个siRNA靶点合成3对shRNA干扰序列,分别与pLKO.1载体连接,构建pLKO.1-sh-β-catenin质粒(干扰组1)、pLVTHM-sh-β-catenin(干扰组2)和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒(阴性对照组);将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集含慢病毒颗粒的上清液感染人鼻咽癌6-10B细胞,感染pLKO.1-sh-β-catenin和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒的细胞经嘌呤霉素筛选并扩大培养后得到稳定克隆株。Western blot检测干扰组β-catenin抑制效率及下游基因c-myc蛋白的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测比较细胞增殖状况,Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移率。结果 Western blot检测结果显示pLKO.1-sh-β-catenin(干扰组1)干扰效率最佳,β-catenin及c-myc蛋白表达减少;MTT检测显示干扰β-catenin后细胞吸光度下降,细胞增殖受到抑制;穿过Transwell小室底膜的细胞数:干扰组1为(23.5±4.6)个,明显低于阴性对照组(50.3±5.3,P〈0.01)及空白对照组(54.3±5.6,P〈0.01)。结论成功构建了β-catenin shRNA慢病毒表达载体,建立了稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为进一步研究以β-catenin为靶点的鼻咽癌基因治疗奠定基础。 相似文献
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Lin Gui林贵 Han Xin-ye韩莘野 Gu Jin顾缙 Rong Du-shan荣独山Wang Shou-zhong汪守中 Wang Gong-xian王恭宪 Chen Xing-rong陈星荣 Xia Jia-hui夏家辉 Li Lu-yun李麓芸 Dai He-ping戴和平 Hu Shi-quan胡世泉 He Xiao-xuan何小轩 Xu Fa-ming许发明Xu Jia许嘉 Xiao Guang-hui肖广惠 Hu Xin-de胡信德and Lu Hui-lin卢惠霖 LaboratOT''y of Medical Genetics Hunan Medical Col lege Changsha 《中华医学杂志(英文版)》1982,95(9):667-673
Selective and superselective hepatic arterio-
graphy is valuable in diagnosing primary hepatic
carcinoma. Tumor vessels, tumor stain, vessel
stretching displacement, vascular encasement,
arteriovenous shunt, pool or lake-like collection
of contrast medium and tumor emboli formation
occurring during arterial phase and irregular
mottling during parenchymal phase are charac-
teristic manifestations. Amang them., tumor
vessels and tumor stain are the 2 pathognomonic
signs. After evaluating the correlation of the
arteriographic features., isotope scan, clinical
data and pathologic findings, it is obvious that
arteriography is superior to isotope scan in es-
tablishing a correct diagnosis. It can facilitate
treatment when the catheter is retained for drip
chemotherapy. 相似文献
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精神发育迟滞儿童的临床和病因探讨(附290例报告) 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报告290例精神发育迟滞儿童的临床及病因学研究。分析全组有遗传因素或遗传倾向者在半数以上,提示开展遗传咨询以减少或杜绝智力低下的儿童出生有重要意义。 相似文献
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利用寡核苷酸探针构建DNA指纹图 总被引:1,自引:0,他引:1
利用人工合成的寡核苷酸(CAC)5串连重复序列探针构建DNA指纹图。结果表明,每个个体平均显现出23.5条可分辨的杂交带,呈现高度多态性及个体特异性。文中对其优势与应用前景进行了讨论。 相似文献