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目的研究GLP条件下非实验因素(包括实验操作、不同笼养方式、对照组因素以及维生素C的添加等)对全身过敏实验中豚鼠质量及生理状况的影响情况,为探讨在GLP条件下如何有效的提高实验动物的质量以及规范过敏性反应的评价提供实验依据。方法实验采用计算机软件进行随机分组,雌雄各半。实验在GLP实验室进行,按要求对豚鼠饲养的环境温度、湿度和噪音进行严格的控制。实验按照SFDA颁布的指导原则推荐的全身过敏实验的程序和方案进行。结果空白对照组和溶剂对照组(生理盐水对照组)在致敏期,体重变化差异明显(P〈0.05);溶剂对照组与阳性对照组相比较,豚鼠的体重增长在实验的各阶段无明显差异(P〉0.05);对比托盘笼架饲养,大塑料盒饲养在检疫期更有利于雌性豚鼠体重的增长(P〈0.05);不添加维生素C组豚鼠在致敏期体重减轻明显(P〈0.05),并出现明显的脱毛症状。结论在GLP条件下,虽然环境条件得到了有效的改善和控制,但是一些容易忽视的非实验因素明显影响了豚鼠的质量及生理状况。 相似文献
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目的:建立爪蟾卵母细胞双电极电压钳记录技术。方法:在去除滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞上,建立双电极电压钳记录技术,并使用该技术观察爪蟾卵母细胞表达的内源性递质门控性和电压门控性离子通道电流。结果:灌流液中分别加入NMDA受体、γ-氨基丁酸和烟碱受体激动剂,均未能在爪蟾卵母细胞上诱发出电流。去极化刺激仅可诱发出一外向电流。此电流的幅度随细胞外液中Ca^2+浓度的增加而增大。当外液中无Ca^2+或无Cl^-时,电流消失。此电流不被TEA所阻断,但能被MnCl2可逆性阻断。结论:成功建立了爪蟾卵母细胞双电极电压钳记录技术。去极化刺激在爪蟾卵母细胞上诱发出的外向电流为钙依赖性Cl^-电流。 相似文献
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酸感受离子通道亚基1a敲减后的细胞抗酸性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:通过酸感受离子通道(ASIC)1a表达抑制的细胞模型,探讨在酸性条件下ASIC1a对细胞生长增殖的影响。方法:以大鼠神经胶质瘤(C6)为模型细胞,利用RNAi技术建立ASIC1a表达抑制的细胞模型。通过绘制细胞生长曲线、集落形成试验、MTT试验和乳酸脱氢酶(LDH)释放试验来观察不同pH条件下,ASIC1a表达抑制细胞和阴性对照细胞生长增殖能力的变化。结果:RNAi技术可明显抑制C6细胞ASIC1a蛋白的表达。在正常pH条件下,ASIC1a表达缺失对C6细胞的生长增殖没有显著影响。但在不同酸性条件下,ASIC1a表达抑制细胞与阴性对照细胞相比对酸的耐受性明显提高,表现为细胞损伤减轻,存活数目明显增多。结论:C6细胞中有ASIC1a,ASIC1b,ASIC2a,ASIC2b和ASIC3亚基的表达。抑制ASIC1a的表达不影响正常pH条件下细胞的生长增殖,但能明显提高细胞对酸的耐受性,提示ASIC1a可能是潜在的抗酸靶分子。 相似文献
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目的药物致QT间期延长的副作用已成为药物安全管理部门和药物公司广泛关注的药物心脏毒性问题。源于许多非抗心律失常药物能通过阻断hERG(huma nether-a-gogo related gene)钾离子通道使动作电位QT间期延长,进而导致尖端扭转性室性心动过速(TdP),甚至猝死。本研究基于hERG表达系统,通过膜片钳技术观察hERG通道的电生理学特性,构建药物致QT间期延长体外评价模型,同时观察中药成分三七总皂苷(PNS)对hERG电流的影响,为药物致QT间期延长的安全性评价提供技术手段。方法用WesternBlot方法对转染hERG通道蛋白的HEK293细胞株进行确证。使用膜片钳技术,通过全细胞记录模式,记录hERG电流,观察hERG电流的电生理学特性及PNS对hERG电流的影响。结果Western Blot结果表明,转染hERG通道的HEK293细胞在155kDa和135kDa处分别有两条明显的蛋白条带,而未转染的HEK293细胞未出现这样的条带,与文献报道一致。hERG钾离子通道特异性阻断剂E-4031能明显阻断hERG电流。实验结果证明hERG蛋白稳定转染于HEK293细胞上并能成功地记录到hERG特征性表达电流。通过膜片钳全细胞记录模式观察到hERG电流的内向整流特性及细胞外钾离子浓度对hERG电流的影响。初步观察了PNS对hERG电流的作用,100和300μg/mlPNS有明显增大hERG电流的作用,呈剂量时间依赖性,表现为PNS使hERG电流激活曲线左移,尾电流峰值幅度上升并延缓尾电流的失活过程。结论成功地建立了药物致QT间期延长体外评价hERG模型;中药成分三七总皂苷(PNS)对hERG电流具有兴奋性效应,提示PNS具有缩短心肌细胞动作电位时程的作用。 相似文献
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豚鼠耳蜗单离Hensen细胞钾电流特性及三磷酸腺苷对其影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究豚鼠耳蜗单离Hensen细胞的钾离子电流及其特性以及三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)对Hensen细胞电生理特性的影响。方法 采用传统全细胞膜片钳技术,对单离Hensen细胞进行记录。ATP通过压力注射仪对单离Hensen细胞给药。结果 Hensen细胞的钾电流呈明显的外向整流性,只有延迟整流性钾电流(delayed rectification potassiu mcurrent,IK),没有瞬间外向性钾电流(transient outward potassium current,IA)。低浓度(0.1μmol/L,1μmol/L,10μmol/L)ATP可以使Hensen细胞的钾电流的幅度明显降低,且呈浓度依赖性,浓度越高,降幅越大。高浓度ATP(100μmol/L,1mmoL/L,10mmol/L)可以引起Hensen细胞的内向离子流,呈浓度依赖性,浓度越高,升幅越大。ATP的这两种作用均可被ATP受体拮抗剂(100μmol/L舒拉明)所逆转。结论 对Hensen细胞不同电压的刺激可以诱发出延迟整流性钾电流,低浓度ATP对Hensen细胞的钾电流有明显抑制作用,且呈浓度依赖性。高浓度ATP可以引起Hensen细胞的非选择性内向离子流,为钾离子依赖性,而且是通过ATP受体起作用。 相似文献
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组胺H1受体阻断药及其对心脏影响的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
翁谢川 《国外医学(药学分册)》2003,30(1):14-17
组胺H1受体阻断药主要用于治疗过敏性疾病、晕动病和失眠等。随着该类药物的不断发展,其对中枢和外周神经的副作用越来越少,对心脏的安全性越来越高。但是,要完全消除它对心脏的副作用似乎是一个难题。目前,对组胺H1受体阻断药的评价逐渐集中到它对心脏功能的影响上,其研究越来越受到人们的重视。 相似文献
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