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EGCG影响TNF-α诱导的NF—KB/p65入核及促凋亡效应 总被引:1,自引:0,他引:1
背景与目的:研究表明,表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)抗肿瘤作用机制尚不十分清楚,本研究旨在观察EGCG调节TNF—α诱导的胃癌SGC-7901细胞核转录因子KB/p65(NF—KB/p65)的入核并发挥诱导凋亡的作用。方法:Hoechst染色法检测EGCG处理SGC-7901细胞前后凋亡的形态学改变;Westemblot方法观察EGCG作用前后NF—KB/p65蛋白在胞质内及核内的变化;流式细胞术检测EGCG调节NF—KB/p65入核前后细胞凋亡的变化;DNA ladder方法观察EGCG诱导细胞DNA断裂情况。结果:Hoechst染色法显示EGCG处理后细胞形态改变:核致密浓染或呈碎块状、苍白色。Western blot方法检测发现,10ng/ml的TNF—d作为NF—KB/p65入核的诱导剂分别作用细胞30、60、90和120min后,核内NF—KB/p65明显增多并在60min达高峰;60斗g/ml的EGCG预处理细胞不同时间(0、12、24、36和48h)后,再以TNF—d处理60min,检测发现核内NF—KB/p65明显下降并在24h达低谷;不同浓度EGCG(40、60、80和100μg/m1)预处理细胞24h后,再加TNF—d处理60min,核内NF—KB/p65呈时间依赖性下降。流式细胞术显示,10ng/ml的TNF—α处理细胞60min后,细胞凋亡率为3.7%,60μg/mlEGCG处理细胞24h后再以TNF—α处理细胞,凋亡率为16.6%;NF—KB通路阻断剂吡咯啉烷二甲基硫脲(PDTC)100μmoL/L预处理30min后再以TNF—α处理细胞60min,细胞凋亡率为21.4%。EGCG60μg/ml处理细胞24h、PDTC处理细胞30min后再以TNF—α处理细胞60min,DNA凝胶电泳出现明显梯形条带。结论:EGCG能够抑制TNF—α诱导的NF—KB/p65入核,并可能通过此机制发挥诱导细胞凋亡的作用。 相似文献
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背景与目的探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)诱导人胃癌细胞裸鼠移植瘤凋亡及分子机制。方法建立人胃腺癌(SGC7901)细胞裸鼠异种移植瘤模型,用不同剂量的EGCG进行治疗,并设对照,用流式细胞分析术检测肿瘤组织中细胞凋亡情况,免疫组织化学方法检测肿瘤组织的凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况。结果裸鼠异种移植瘤治疗实验结果显示,EGCG对移植瘤生长有明显抑制作用(其中20mg/kg、EGCG抑制率54.64%与对照组比较P<0.05);PI染色FCM分析发现,EGCG20mg/kg能诱导移植瘤细胞凋亡率17.2%与对照组比P<0.05;SP免疫组织化学结果表明EGCG可上调移植瘤细胞中Bax、Caspase-3蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。结论表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有体内诱导人胃腺癌细胞凋亡的作用,其机制可能与Bcl-2/Bax比值降低导致Caspase-3的活化从而启动细胞凋亡有关。 相似文献
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目的 检测喉鳞状细胞癌中Bcl-2蛋白和Ki-67蛋白的表达水平并分析两者的相关性. 方法 收集54例喉鳞癌组织和42例正常喉粘膜组织的样本,采用SP免疫组化法观察石蜡切片中Bcl-2、Ki-67蛋白的表达,并结合临床相关病理因素分析在喉鳞状细胞癌中两者的相关性. 结果 在喉鳞癌组织中,Bcl-2蛋白高表达,阳性表达率70.37%(38/54),正常的喉粘膜组织中Bcl-2蛋白阳性微弱表达或不表达,阳性率9.5% (4/42)(P<0.05);Bcl-2蛋白表达水平与临床分期、淋巴结转移有明显相关性:在晚期(Ⅲ~Ⅳ期)的表达高于早期(Ⅰ~Ⅱ期)(P<0.05),而其在不同年龄、性别中的表达,差异无统计学意义(P>0.05).Ki-67蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达为81.48%(44/54),在正常组织中表达明显下调仅为16.67% (7/42);在喉鳞癌中Bcl-2蛋白与Ki-67蛋白的表达呈正相关(rs=0.317,P<0.05). 结论 与正常组织比较,在喉鳞癌中Bcl-2蛋白与Ki-67蛋白表达明显上调,并呈正相关,可能两者在喉鳞癌癌变中发挥了协同作用. 相似文献
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