慢性伤口感染病原菌分布与银离子抗菌敷料应用的研究

目的研究慢性伤口感染常见病原菌分布,并观察银离子抗菌敷料的治疗效果,为临床诊疗提供参考依据。方法选择2013年4月-2015年8月就诊的2 890例慢性伤口感染患者为研究对象,伤口包括:手术切口、外伤、糖尿病足溃疡、静脉性溃疡、压疮等常见伤口;运用BACTEC MGI 960系统进行菌种鉴定,分析病原菌种类及其耐药率,观察银离子抗菌敷料3周内的治疗效果。结果从2 890份标本中分离出病原菌1 846株,检出阳性率为63.88%,革兰阴性杆菌943株占51.08%,革兰阳性球菌835株占45.23%,真菌68株占3.69%;在治疗3周后,慢性伤口愈合1 480例愈合率为80.17%,随访期8周,慢性伤口愈合1 611例愈合率87.27%,愈合时间(6.1±2.5)周;与治疗前对比,治疗后的伤口面积、疼痛评分均明显降低(P0.05),且随着治疗时间的延长,两者均显著改善(P0.05)。结论慢性伤口感染率较高,以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌感染为主,经银离子抗菌敷料治疗后疗效明显。     

持续ALT正常的慢性乙型肝炎患者外泌体miRNAs表达谱

目的：通过分析持续丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)正常的慢性乙型肝炎(以下简称慢乙 肝)患者外泌体miRNAs的表达情况,试图找出更好反映肝组织炎症的外泌体miRNAs。方法：收集持续ALT正常并行 肝活检的慢乙肝患者,选取肝组织炎症分级≥A2和相似文献   

慢性乙型肝炎患者体内不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达

目的：通过检测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达, 了解不同来源标本中2种miRNAs表达的相关性,为研究miRNA在肝病中的作用机制提供标本选择的理论依据。 方法：采用real-time PCR对41例CHB患者核苷(酸)类似物抗病毒治疗基线期和第104周血浆、外周血单个核细胞和肝 组织中miR-146a和miR-155的表达进行检测,分析3种来源标本中这2种miRNAs表达的相关性。结果：治疗第104周时 血浆、外周血单个核细胞和肝组织miR-146a和miR-155的表达水平均较基线期显著下调(P<0.05)。基线期血浆和肝组 织(r=0.560,P=0.007)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.428,P=0.047)miR-146a的表达均相关。基线期血浆和肝组织 (r=0.587,P=0.004)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.483,P=0.023)miR-155的表达相关,miR-146a和miR-155在血浆中 的表达与外周血单个核细胞中的表达不相关(P>0.05)。结论：与外周血单个核细胞相比,血浆中miR-146a和miR-155的 表达能更好地反映和预测肝组织miR-146a和miR-155的表达,血浆可作为研究miR-146a和miR-155在肝病中作用机制的 标本来源。     

熔点曲线法研究HBV基因B型BCP区变异与临床表现的关系

目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)基因B型基本核心启动子(BCP)的变异及其临床意义.方法 收集HBV携带者、慢性乙型肝炎、慢性重型肝炎等3种临床类型的患者血清226份,采用巢式多聚酶链式反应(PCR)扩增HBV DNA,选取上述3种类型各50例B基因型患者,采用熔点曲线方法进行BCP区的变异检测.结果 226例患者中B基因型210例(92.9％),C基因型16例(7.1％)；150例不同病情的B基因型患者中,慢性重型肝炎患者的熔点曲线平均波峰数量多于慢性HBV携带者及慢性乙型肝炎患者,差异有统计学意义(P＜0.05),而HBV携带者与慢性乙型肝炎比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 B基因型患者BCP区变异与临床表现存在一定的关系,病情重者准种数量较多.     

时间分辨免疫荧光法定量检测血清HBeAg/HBeAb的可行性分析

目的：探讨国产时间分辨免疫荧光法(time-resolved immunofluorescence assay,TRIFA)是否与全自动化学发光免疫分析法(automatic chemiluminescence immunoassay,CMIA)在定量检测HBeAg/HBeAb中具有同样的准确性和特异性。方法：157份来自中南大学湘雅医院感染病科门诊的HBV感染患者的血清标本,分别用CMIA和TRIFA两种方法进行HBeAg定量及HBeAg/HBeAb定性检测,并对结果进行对比分析。结果：两种方法定量检测HBeAg的直线回归方程为：Y=0.72779X–4.0551(r=0.712,P<0.001)。与CMIA比较,TRIFA检测HBeAg定性结果的灵敏度和特异性分别为89.89%和100%,两种方法诊断HBeAg符合率为94.27%。TRIFA检测 HBeAb定性结果的灵敏度和特异性分别为100%和95.45%,两种方法诊断HBeAb的符合率为97.45%。结论：TRIFA在HBeAg/HBeAb定量检测上的准确性、灵敏度和特异性与CMIA基本相当,二者HBeAg/HBeAb诊断符合率高。     

A Novel Prognostic Score for Acute-on-Chronic Hepatitis B Liver Failure

Patients with acute-on-chronic hepatitis B liver failure(HBV-ACLF) show high morbidity and mortality. Independent prognostic predictors of short-term HBV-ACLF mortality include the Child-Turcotte-Pugh(CTP) score, the model for end-stage liver disease(MELD) score, other MELD-based indices and the dynamic changes in these indices. The aims of this study were to evaluate the existing prognostic scores in a large cohort of HBV-ACLF patients and create a new predictive model. We retrospectively reviewed 392 HBV-ACLF patients from December 2008 to November 2011 and evaluated their 3-month survival. The predictive accuracy of CTP, MELD and MELD-based indices and the dynamic changes in the MELD-related scores(Δ scoring systems) upon admission and after two weeks of treatment were compared using the area under the receiver operating characteristic(ROC) curve method. Life-threatening factors and a series of bio-clinical parameters were studied by univariate and multivariate analyses. Among the existing scores, MELD had the best predictive ability. However, our new regression model provided an area under the curve of 0.930±0.0161(95% CI: 0.869 to 0.943), which was significantly larger than that obtained with the MELD score at admission and after two weeks of treatment as well as with the dynamic changes of the MELD score(0.819, 0.921, and 0.826, respectively)(Z=3.542, P=0.0004). In a large cohort of patients retrospectively reviewed for this study, our prognostic model was superior to the MELD score and is, therefore, a promising predictor of short-term survival in patients with HBV-ACLF.     

微小RNA在HBx缺失突变体致肝细胞增殖中的作用及其机制

目的 研究微小RNA (miRNA)在HBx缺失突变体致人肝细胞异常增殖中的作用及其相关机制. 方法 利用miRNA芯片技术检测稳定表达HBx-d382及HBx的L02(即分别含HBx基因缺失突变体HBx-d382及野生型HBx基因)细胞系中miRNA的表达,实时荧光定量PCR对上述miRNA进行验证.选取在L02/HBx-d382和L02/HBx细胞中均表达明显下调的两个miRNA:miR-338-3P、miR-551b进行功能研究,分为实验组(转染miRNA模拟物组)、阴性对照组(NC,转染miRNA阴性对照)及脂质体组(lipo,单加转染试剂),通过脂质体转染到细胞中,四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期,实时荧光定量PCR和Wstern blot检测细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白G1和E2F转录因子的改变.采用SPSS 16.0统计软件,数据均进行了正态检验并符合正态性,组间均数比较采用成组t检验. 结果 (1)与L02/pcDNA3.0细胞比较,L02/HBx-d382细胞有6个miRNA表达上调,5个miRNA表达下调; L02/HBx细胞有4个miRNA表达上调,12个miRNA表达下调.实时荧光定量PCR验证的结果与芯片相一致.(2)转染了miR-338-31p-模拟物和miR-551b-模拟物后,L02/HBx-d382及L02/HBx细胞增殖均受抑制,细胞周期均阻滞在G1期,细胞增殖能力减弱.L02/HBx-d382细胞中,细胞增殖能力:lipo组、NC组、miR-338-3p组和miR-551b组分别为90.0％±1.3％、88.0％±1.6％、56.0％±6.1％和62.0％±6.4％,miR-338-3p组与:lipo组、NC组比较,t值分别为10.402、9.133 ;miR-551b组和与lipo组、NC组比较,t值分别为8.763、7.403,P值均＜0.01.L02/HBx细胞中,细胞增殖能力:lipo组、NC组、miR-338-3p组和miR-551b组分别为91.0％±1.7％、89.0％±2.1％、60.0％±7.7％和66.0％±9.3％,miR-338-3p组与lipo组、NC组比较,t值分别为9.105、8.074;miR-551b组与lipo组、NC组比较,t值分别为7.673、7.52,P值均＜0.01.实时荧光定量PCR检测结果显示细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白G1和E2F转录因子的mRNA水平均无明显改变,但Western blot法发现上述基因的蛋白表达均明显下调,差异有统计学意义. 结论 ①HBx及其缺失突变体能影响L02细胞的miRNA表达谱;②在L02/HBx-d382细胞中下调更明显的miR-338-3p和miR-551b可能通过调控细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白G1和E2F转录因子的表达而调节了细胞的生长.     

HBx基因缺失突变体(HBx-d382)对L02细胞cyclinD1、cyclinG1和E2F1表达的影响

目的 前期的研究成功构建了稳定表达HBx基因及其缺失突变体( HBx-d382)的L02细胞,分别命名为L02/HBx和L02/HBx-d382,并证实其可导致肝细胞恶性转化.该研究进一步探讨HBx-d382对L02细胞G1期细胞周期调控相关基因cyclinD1,cyclinG1和E2F1表达的影响.方法 实验分为L02/pcDNA3.0(稳定转染pcDNA3.0)、L02/HBx和L02/HBx-d382(分别稳定转染质粒pcDNA3.0/HBx和pcDNA3.0/HBx-d382)3组.通过实时定量PCR以及wester-blot检测转染HBx基因及其缺失突变体HBx-d382后L02细胞cyclinD1、cyclinG1和E2F1表达的改变.结果 实时定量PCR以及wester-blot结果表明稳定表达HBx基因或HBx-d382的L02细胞cyclinD1、cyclinG1和E2F1表达上调,表达HBx-d382的L02细胞上调最为明显.结论 HBx-d382可能通过上调cyclinD1、cyclinG1和E2F1从而影响细胞G1期调控,进一步导致肝细胞恶性转化.     

肝纤维化分期与舌下络脉积分的关系

目的：探讨肝组织纤维化分期与舌下络脉变化的关系。方法：观察118例慢性乙型肝炎（CHB）及HBV携带者的舌下络脉，并采用细针穿刺术，取肝组织进行病理分析，研究肝组织分期与舌下络脉的关系。结果：①在行肝活检的88例CHB患者中，有不同程度纤维化改变的占86．36％（76／88），而其中已有43．18％（38／88）的患者组织学可见假小叶形成，S。期仅有13．6％（12／88）；30例HBV携带者中，s。期有30％（9／30），肝组织学异常者占70％（21／30），其中肝硬化者13．33％（4／30）；②S0～S。各分期95％的可信限（CI）分别为9．81～12．29，11．26～13．41，12．11～14．71，14．53～16．90，17．43～19．52。积分〉14者，86％肝活检分期≥S：，积分〉17者，肝组织多可见假小叶形成。组间比较，S。与S1期差异无显著性意义。结论：舌下络脉积分与肝组织学分期成正相关，积分越高，纤维化程度越明显，在判断肝纤维化的病程、动态跟踪的过程中，观察舌下络脉的变化是个安全、简单、科学而又行之有效的方法。