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目的:探讨miR-7抑制乳腺癌细胞骨转移的分子机制。方法转染含miR-7基因序列的GFP表达质粒进入MDA-MB-231乳腺癌细胞,荧光显微镜下检测外源基因的整合效率,Western blot方法检测PI3K、AKT-2、CXCR-4和MMP-9的蛋白表达量,Transwell体系检测乳腺癌细胞的迁移能力;建立乳腺癌骨转移模型,病理检查分析骨转移情况;miRNA靶基因预测软件分析miR-7潜在治疗靶点。结果荧光显示含GFP/miR-7基因的质粒被高效转入乳腺癌细胞,转染后癌细胞PI3K、AKT-2和CXCR-4的蛋白量均有明显降低( P<0.05, P<0.01),MMP-9无明显变化(P>0.05);体内外模型均显示miR-7可抑制乳腺癌细胞的远位转移;miRNA靶基因预测软件分析显示PI3K是miR-7的潜在沉默靶点之一。结论 miR-7可能通过靶向沉默PI3K/AKT-2通路途径间接影响CXCR-4/SDF-1轴进而抑制乳腺癌细胞的骨转移。 相似文献
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目的:观察活血通脉胶囊对冠心病心血瘀阻证患者血浆小分子代谢产物的调节作用。方法采用前瞻性研究方法,选择2009年1月至2013年12月在天津市大港地区就诊的136例冠心病心血瘀阻证患者,按简单随机抽样方法分成两组。对照组(68例)采用硝酸酯类、β受体阻滞剂、钙离子拮抗剂及肠溶阿司匹林等常规疗法;活血通脉胶囊组(68例)在常规治疗基础上给予活血通脉胶囊,每次4粒(每粒0.25 g),每日3次,30 d为1个疗程,共3个疗程。评定两组治疗后临床疗效和心电图疗效;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆和肽素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-10(IL-10)水平,计算TNF-α/IL-10比值。结果活血通脉胶囊组临床疗效及心电图疗效均明显高于对照组〔临床总有效率:89.71%(61/68)比80.88%(55/68);心电图总有效率:57.35%(39/68)比48.53%(33/68),均P<0.05〕。两组治疗后和肽素及TNF-α/IL-10比值均较治疗前明显降低,且以活血通脉胶囊组降低更显著〔和肽素(ng/L):0.22±0.04比0.31±0.05,TNF-α/IL-10比值:0.49±0.11比0.65±0.09,均P<0.05〕。结论在常规疗法基础上加用活血通脉胶囊能通过降低和肽素水平及TNF/IL-10比值来改善冠心病心血瘀阻证患者的治疗效果。 相似文献
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目的探讨通过诱导蛋白质广泛去类泛素化修饰途径抑制子宫内膜癌的干性维持潜能, 达到子宫内膜癌侧群细胞化疗增敏的目的。方法流式细胞术分选培养CD133+CD44+的KLE子宫内膜癌侧群细胞克隆球, Western blot法检测小泛素相关修饰蛋白1(SUMO1)及肿瘤侧群细胞干性维持基因八聚体结合转录因子4(Oct4)和性别决定区Y-box2(Sox2)蛋白的表达情况。慢病毒介导KLE侧群细胞稳定转染SUMO特异性蛋白酶1(SENP1)基因, Western blot法检测SENP1、SUMO1、Oct4和Sox2的蛋白表达;比较过表达与未过表达SENP1基因的KLE侧群细胞克隆形成率, 流式细胞术检测细胞周期变化, 四甲基偶氮唑蓝实验和流式细胞术检测子宫内膜癌侧群细胞对顺铂的化疗敏感性, 子宫内膜癌荷瘤鼠模型检测SENP1过表达对顺铂的化疗敏感性影响。结果 CD133+CD44+和CD133-CD44-子宫内膜癌KLE细胞克隆形成率分别为(23.64±5.03)%和(4.64±1.25)%, 差异有统计学意义(P=0.003), CD133+CD44+子宫内膜癌KLE细胞中SUMO1、O... 相似文献
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方剂(处方)的功效是药物配伍后综合作用的反映,当增加或减去某些药物时,全方的功效也随之发生变化。根据这种特性,通过某些药物的加减,使之更适合现证的治疗需要。兹结合导师蒋健教授的临床医案,探讨处方药物加减中的种种问题并加以讨论。 相似文献
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<正>半阻塞声道训练(semi-occluded vocal tract exercises, SOVTE)在国外被广泛运用于功能性发声障碍、单侧声带麻痹、声带小结等嗓音障碍的治疗[1,2]。SOVTE可以降低声带闭合的撞击力,减小或增加声带接触率(CQ),改善音质,提高响度等[3,4];同时,SOVTE也常用于歌手等职业用嗓者的日常“暖嗓”中,帮助形成更响亮清晰的声音[5]。SOVTE通过唇舌、鼻腔、管子等方式形成声道远端的部分阻塞, 相似文献
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目的利用半固体凝胶介质诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化,确立一种基于物理特性的心肌细胞诱导分化方法。方法原代分离培养和鉴定BMSCs。以DMEM培养基和低熔点琼脂糖按不同配比配制成6.4%、3.2%、1.6%、0.8%、0.4%和0.2%6种物理密度基质,将BMSCs培养于上述基质。RT-PCR方法检测细胞分化标记基因心肌特异性基因肌球蛋白重链α(α-MHC)和抗小鼠心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)的mRNA水平;细胞免疫荧光方法检测cTnT和α-MHC的蛋白质表达情况。结果 RT-PCR结果显示BMSCs中cTnT mRNA表达峰值出现在物理密度为1.6%的培养基质中,而α-MHC的峰值出现在物理密度为3.2%的培养基质中。细胞免疫荧光结果显示BMSCs在不同密度基质中培养时表达cTnT和α-MHC的总体趋势与RT-PCR结果一致。结论利用半固体凝胶介质可实现将BMSCs向心肌细胞诱导分化。 相似文献
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目的:研究温度敏感性猿猴病毒40大T抗原(ts-SV40LT)转基因干细胞增殖活性的温度调控机制。方法:用含ts-SV40LT抗原的表达质粒转染脐带间充质干细胞(UCMSCs),将其分别置于33℃和37℃培养,细胞免疫荧光方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)活性,PCR-ELISA端粒酶检测法检测端粒酶活性及细胞周期,WesternBlot法检测周期素(Cyclin)D1、CyclinE、周期素依赖性蛋白激酶(CDK)2、CDK4、CDK6、P16和P21的蛋白表达情况,免疫荧光方法检测巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:细胞在33℃时培养24、48、72h的PCNA阳性表达百分率均高于37℃时,差异有统计学意义(P<0.01)。转染tsSV40LT抗原基因后,细胞在33℃培养箱时的端粒酶活性和PIx值高于37℃时,差异有统计学意义(P<0.01)。33℃时的CyclinD1、CyclinE、CDK2、CDK4、CDK6及Nestin表达量高于37℃时,P16、P21、NSE和GFAP的表达量低于37℃时,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:通过tsSV40LT抗原基因的有效转染可实现干细胞在不同温度环境下的增殖调控。 相似文献