甘草地上部分不同提取方法提取物成分HPLC-MS/MS分析

[目的]对甘草地上部分的水提物、醇提物和CO_2超临界萃取物中黄酮类成分的组成进行分析。[方法]高效液相色谱法(HPLC)Agilent SB-C₁₈柱,乙腈-0.5%甲酸水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10μL,检测波280 nm。质谱使用电喷雾离子源,负离子模式。[结果]在水提物中共定性出9个化合物,主要为黄酮(醇)苷类物质;在醇提物中共定性出14个化合物,主要为黄酮(醇)苷元类物质和异戊烯基黄酮类物质;在CO_2超临界萃取物中共定性出10个化合物,主要为异戊烯基黄酮类物质。[结论]鉴定出甘草地上部分不同提取方法提取物中有不同性质的黄酮类物质,可以为后续提取富集研究提供依据。     

基于斑马鱼模型的防风多糖调节免疫作用机制研究

利用斑马鱼模型评价防风多糖的免疫调节作用，并利用转录组测序和实时荧光定量PCR技术探讨其作用机制。以免疫细胞荧光标记的转基因斑马鱼Tg(lyz:DsRed)为实验动物，选用长春瑞滨诱导免疫低下模型，评价防风多糖对斑马鱼体内巨噬细胞密度和分布的影响。以野生型AB系斑马鱼为实验动物，采用中性红和苏丹黑B染色法，检测防风多糖对斑马鱼体内巨噬细胞和中性粒细胞数目的影响；采用DAF-FM DA荧光探针法，检测各组斑马鱼体内NO含量的变化；ELISA法检测斑马鱼体内IL-1β和IL-6的含量变化。利用转录组测序分析空白对照组、模型组和防风多糖处理组斑马鱼的差异表达基因，通过Gene Ontology(GO)和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析其免疫调节作用机制，并利用RT-qPCR法验证关键基因的表达水平。结果显示，防风多糖能显著增加斑马鱼免疫细胞密度，增加巨噬细胞和中性粒细胞数目，并降低免疫低下斑马鱼体内NO、IL-1β和IL-6含量。转录组测序分析结果显示防风多糖通过影响Toll样受体通路和单纯疱疹感染通路上免疫相关基因的表达水平...