重组人苗勒抑制物对2株卵巢癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨重组人苗勒抑制物(rhMIS)对人卵巢癌细胞株OVCAR8及SKOV3细胞生长的影响。方法:Western blotting检测细胞中MISII型受体(MISIIR)蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察MISIIR蛋白在细胞中定位。rhMIS分别干预2株卵巢癌细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖变化;软琼脂克隆实验检测细胞体外成瘤性;流式细胞术分析rhMIS对细胞凋亡和细胞周期影响。结果:OVCAR8细胞表达MISIIR蛋白,其定位于细胞表面及细胞质中,SKOV3细胞中MISIIR蛋白表达缺损。经rhMIS作用48h后,OVCAR8细胞的生长速率显著减慢、细胞体外成瘤性明显降低、细胞发生凋亡和G1期细胞增加,rhMIS(10mg/L)干预后细胞凋亡率和G1期细胞比率分别可高达(31.3±2.1)%和(70.4±3.0)%,与SKOV3细胞比较差异显著(P0.01)。结论:重组人苗勒抑制物可以抑制MISIIR蛋白表达的卵巢癌细胞增殖、诱导其凋亡、阻滞细胞周期,这有望成为治疗卵巢癌的一个新靶点。     

紫杉醇在子宫内膜癌中的研究进展

紫杉醇自1992年被美国FDA批准上市以来,由于它独特抗癌机理和广谱高效的抗癌活性,其在子宫内膜癌治疗中的作用日益突出,除了单线化疗外,临床上常用的联合化疗有TAP,AT和TP方案。随着科研工作的深入,针对该药不良反应上临床上也有对应的处理措施。     

子宫内膜癌的基因热点研究

<正>子宫内膜癌(endometrial carcinoma)为女性生殖道常见的三大恶性肿瘤之一,发病率逐年上升,全球每年约有142000位妇女患子宫内膜癌。在美国,子宫内膜癌与子宫颈癌的发病     

Survivin、ER、PR在子宫内膜癌组织中的表达及相关性分析

目的:研究子宫内膜癌中Survivin蛋白、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达情况及Survivin蛋白的表达与ER、PR表达的相关性,并探讨其临床病理意义.方法:应用免疫组化SP法检测26例子宫内膜癌组织、11例癌旁组织、30例正常组织中Survivin蛋白的表达情况及26例子宫内膜癌组织中ER、PR蛋白的表达情况,并结合,临床病理因素进行分析.结果:(1)Survivin在子宫内膜癌中的阳性表达率为92.31%(24/26),显著高于正常子宫内膜(26.67%)(P<0.001),但与癌旁组织中的Survivin表达量(81.82%)无统计学差异(P>0.05).(2)ER在子宫内膜癌中的阳性表达率为73.08%(19/26).PR的阳性表达率为80.77%(21/26),二者的表达存在正相关(r=0.619 4,P<0.001).(3)Survivin与ER在子宫内膜癌中的表达呈正相关(r=0.422 9,P=0.015 3<0.05),与PR的表达呈正相关(r=0.502 1,P=0.002 6<0.05).结论:Survivin蛋白在子宫内膜癌中的过表达是肿瘤发生、发展中的早期事件,Survivin、PR、ER水平的联合检测在子宫内膜癌的早期诊断方面有一定的指导意义.     

雷帕霉素增强子宫内膜癌细胞对阿霉素的敏感性

目的: 探讨mTOR抑制剂雷帕霉素联合阿霉素对子宫内膜癌细胞株的影响及其机制。方法: 选用2株不同 PTEN 状态的子宫内膜癌细胞株:HEC-1A( PTEN 野生型)和Ishikawa( PTEN 突变型),分别给予低浓度雷帕霉素预处理24 h,再使用阿霉素,MTT法检测联合用药前后阿霉素24 h IC₅₀及细胞生存率的变化,计算两药的联合指数;流式细胞术检测细胞凋亡率, Western blotting观察PI3K/Akt通路的蛋白磷酸化和凋亡蛋白caspase-3的变化。结果: (1)雷帕霉素或阿霉素单药使用时均明显抑制2株子宫内膜癌细胞的生长。抑制率与时间、剂量呈正相关。使用10 nmol/L雷帕霉素预处理24 h后,阿霉素作用Ishikawa细胞的IC₅₀由(21.3±3.8)μmol/L降到(11.9±1.2) μmol/L(P<0.05);而HEC-1A细胞的IC₅₀由(14.3±2.8)μmol/L降到(8.2±0.9)μmol/L(P<0.05);2株细胞中阿霉素与雷帕霉素的联合指数均大于1.15,提示在2种细胞株中两药均有协同作用;(2)联合用药后,凋亡率较单药使用组明显升高(P<0.05);同时,p-Akt蛋白表达下降,而活化的caspase-3表达上调。结论: 雷帕霉素能增加子宫内膜癌细胞对阿霉素的敏感性,从而降低肿瘤细胞对药物的耐药性,具有良好的抗肿瘤前景。     

CHFR基因在肿瘤中的研究现状及意义

肿瘤的发生是一个复杂的生物学过程,主要是由于细胞内癌基因、抑癌基因及其他相关调节基因突变,从而使细胞基因组失去稳定性,最终导致肿瘤的发生.正常细胞的生长和分裂是一个高度复杂和精细的过程,为了确保细胞分裂的正常进行,每个细胞内均有一套严格的精确调控细胞增殖过程的监控系统--检查点,以维持基因组的稳定性.人类肿瘤的相关研究发现基因完整性的改变与有丝分裂检查点的功能缺失有关.     

信号通路抑制剂对PTEN基因不同表达状态子宫内膜癌细胞的作用

目的 比较相关信号通路抑制剂诱导PTEN基因不同表达状态子宫内膜癌细胞的增殖和凋亡情况.方法 以PTEN反义寡核昔酸及PTEN真核表达载体转染子宫内膜癌细胞(HEC-1A、Ishikawa)后,激光共聚焦显微镜观察PTEN蛋白的表达.表皮生长因子受体、丝裂原活化蛋白激酶及雷帕霉素靶蛋白信号通路抑制剂--RG-14620、SB203580(SB)及西罗莫司分别处理HEC-1A、HEC-1A-PTEN-null、Ishikawa、Ishikawa-PTEN细胞,荧光染色法、流式细胞仪、四甲基偶氮唑蓝比色法分别检测细胞凋亡时的形态学改变、细胞凋亡率、细胞周期分布、细胞存活率.结果 转染后,Ishikawa-PTEN细胞内PTEN蛋白表达增加,HEC-1A-FFEN-null细胞内PTEN蛋白表达受到抑制.RG-14620、SB及西罗莫司处理后,Ishikawa和HEC-1A-PTEN-null细胞荧光染色见核呈浓集周缩改变;细胞发生明显凋亡及G1期阻滞,尤以SB作用最为显著,Ishikawa+SB、HEC-1A-PTEN-null+SB的细胞凋亡率分别为(37.8±0.8)%、(31.6±0.8)%,G_1期细胞比例增加[分别为(87.5±1.9)%、(84.1±3.2)%];细胞增殖受到抑制,尤以SB处理后作用为显著,Ishikawa+SB、HEC-1A-PTEN-null+SB的细胞存活率仅为(49.0±1.7)%、(54.0±2.1)%.结论 PTEN基因缺失使相应信号通路抑制剂作用的子宫内膜癌细胞增殖明显受抑,细胞阻滞于G1期,细胞凋亡增加,对相关信号通路抑制剂的敏感性增加.     

紫杉醇对PTEN不同状态的子宫内膜癌细胞株的作用及其机制探讨

目的研究紫杉醇对不同PTEN状态子宫内膜癌细胞株中的作用及其相关机制。方法利用慢病毒载体系统,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ish-ikawa细胞,建立PTEN基因敲除(HEC-1-RNAi)细胞及过表达(Ishikawa-PTEN)的细胞模型。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot观察磷酸化AKT蛋白和Caspase-3蛋白的表达。结果紫杉醇对不同PTEN状态的细胞株均有明显的生长抑制作用,抑制率与时间、剂量成正相关。紫杉醇处理不同PTEN状态的细胞24h后,PTEN阳性细胞的IC50和磷酸化AKT蛋白水平明显低于PTEN阴性细胞,PTEN阳性细胞的凋亡率、Caspase-3的蛋白水平明显高于PTEN阴性细胞。结论 PTEN基因能增加子宫内膜癌细胞株对紫杉醇的敏感性,其可能与抑制PI3K/AKT信号通路,增强Caspase-3蛋白表达有关。     

PTEN基因对子宫内膜癌细胞PI3K/AKT通路的影响

 【目的】探讨PTEN基因在子宫内膜癌PI3K/AKT通路中的作用,评估PTEN基因在抗肿瘤治疗中的意义。【方法】利用慢病毒载体系统, 构建人PTEN基因RNA干扰慢病毒载体和PTEN基因过表达慢病毒载体,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ishikawa细胞, 建立PTEN 基因敲减及过表达的细胞模型,Western Blot方法检测PTEN基因敲减或过表达前后PTEN蛋白的表达和AKT通路的活化情况, MTT法检测慢病毒转染前后细胞增殖的变化,流式细胞术检测慢病毒转染前后细胞周期及细胞凋亡率的变化。【结果】1. HEC-1A细胞转染PTEN基因干扰慢病毒载体后,细胞的增殖曲线和细胞凋亡率与对照组比较无明显变化。但Ishikawa细胞转染PTEN基因过表达慢病毒载体后,增殖曲线和细胞凋亡率显示其生长呈明显抑制状态。2.当HEC-1A细胞转染了RNA干扰病毒后（HEC-1A-RNAi）,Western Blot 结果显示PTEN蛋白表达下调,其EGFR, p-EGFR, mTOR, p-mTOR, AKT, p-AKT蛋白表达增强,当Ishikawa细胞转染了过表达载体病毒后（Ishikawa-PTEN）,Western Blot 结果显示其PTEN蛋白表达上调,p-EGFR,p-mTOR,AKT,p-AKT蛋白表达减弱。3.HEC-1A-RNAi细胞周期中G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,Ishikawa-PTEN细胞周期中G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少。【结论】PTEN 基因可以抑制细胞增殖过程, 有可能成为子宫内膜癌患者基因治疗的选择之一。     

子宫颈癌患者人乳头状瘤病毒感染型别分布情况分析

 【摘要】目的 探讨子宫颈癌患者人乳头状瘤病毒（HPV）的感染情况及型别分布,分析其与子宫颈癌的相关性。方法 选取2011年1月至12月就诊的子宫颈癌患者67例,采用凯普HPV分型诊断系统进行HPV-DNA分型检测,分析子宫颈癌患者HPV感染状况。结果 67例子宫颈癌患者中HPV感染阳性率为68.66%（46/67）。其中感染HPV16型20例,18型11例,52型1例,53型2例,66型3例,11型1例,81型1例;16+18型3例,52+53型1例,59+11型1例;11+18+53型1例,16+45+66型1例。结论 高危型HPV持续感染是子宫颈癌发生、发展的首要条件,与子宫颈癌密切相关。高危型HPV16、18型是最主要的感染亚型。