脊髓压迫症状为初发表现的急性非淋巴细胞白血病二例

目的 提高对急性非淋巴细胞白血病(ANLL)脊髓压迫症状的认识.方法 报道2例并发脊髓压迫症状的ANLL的诊断、治疗经过及预后并进行相关文献复习.结果 2例患者发病年龄小,均为难治性白血病,在化疗过程中均死于并发症.结论 对于考虑白血病或明确诊断白血病同时伴有腰背痛、下肢感觉活动异常等症状者要注意脊髓压迫症,对于ANLL鞘内注射化疗药物应同样得到重视.     

慢性淋巴细胞白血病遗传学异常及临床疗效和预后分析

目的:探讨应用荧光原位杂交技术(FISH)检测慢性淋巴细胞白血病(CLL)常见染色体异常,并分析其与临床治疗、预后的相关性。方法:对26例初诊CLL患者进行免疫表型及常规细胞遗传学(CC)检测,同时以4种序列特异性探针p53、D13S25、ATM、RB1和1种着丝粒探针CSP12,采用FISH对20例正常对照骨髓建立各探针的检测阈值,然后对26例CLL患者进行检测,检测结果大于阈值为阳性,小于阈值为阴性。结果:所有患者均表达CD19(100%),CD5阳性率为84.6%(22/26),CD23阳性率为65.4%(17/26),CD22阳性率为61.5%(16/26)。CC检测18.5%有核型异常(3/26),FISH检测出20例至少有1种基因异常,依次为D13S25缺失40.0%(8/20),RB1缺失25.0%(5/20),CSP12三体占15.0%(3/20),CSP12单体占5.0%(1/20),p53缺失10.0%(2/20),ATM缺失5.0%(1/20)。18例患者接受了含氟达拉滨的化疗(RF/F/FCR/FC),15例(83.3%)获完全缓解(CR)和部分缓解(PR),4例口服苯丁酸氮芥,4例接受CHOP方案联合化疗,1例获CR,2例PR。结论:FISH技术适用于CLL患者的细胞遗传学分析,提高了CLL遗传学异常检出率,FISH检测结果可为临床治疗方案选择提供一定的理论依据。氟达拉滨治疗方案能明显提高CLL患者长期生存率。     

WT1（+）急性髓系白血病M2型合并中枢性尿崩症1例并文献复习

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一类髓系造血干祖细胞的恶性克隆性疾病,以骨髓与外周血中原始和幼稚细胞异常增生为主要特征。尿崩症(diabetes insipidus,DI)是精氨酸加压素(AVP)又称抗利尿激素(ADH)分泌缺陷或肾脏对精氨酸加压素不敏感所导致的综合征,分为中枢性尿崩症(central diabetes insipidus,CDI)和肾性尿崩症(nephrogenic dia-betes insipidus,NDI)[1]。中枢性尿崩症是急性髓系白血病的一种罕见的并发症,目前全球仅有约100例已发布的病例报告[2]。近期我科收治1例WT1(+)急性髓系白血病M2型合并中枢性尿崩症患者,现报道如下。      

成人骨髓间充质干细胞对K562细胞生长的影响

目的：研究成人骨髓间充质干细胞（MSCs）对K562细胞生长的影响。方法：从成人骨髓中分离、培养MSCs，并通过其形态的均一性及流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度，观察其电镜下的超微结构。将分离培养的MSCs置于24孔板中，72h待其贴壁后，以丝裂霉素处理，与K562细胞共培养，计数法测定细胞增殖，观察成人骨髓MSCs对K562细胞生长的影响。结果：和单独的K562细胞生长曲线相比，与骨髓MSCs共孵育的K562细胞生长缓慢，无明显的指数生长期。结论：成人骨髓MSCs抑制K562细胞的生长，提示其可能有潜在的抗肿瘤作用，但其作用机制如何有待于进一步探讨。     

芍药苷对骨髓间充质干细胞增殖的影响

背景：研究显示芍药苷具有补血及治疗自身免疫性疾病的功效,骨髓间充质干细胞对机体的造血及免疫功能也起着重要的作用,但芍药苷对骨髓间充质干细胞的增殖及细胞因子的分泌和表达有何影响报道较少。目的：探讨芍药苷对人骨髓间充质干细胞增殖及白细胞介素6表达的影响。方法：采用密度梯度离心法和贴壁培养法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,用流式细胞术和成脂及成骨诱导法鉴定人骨髓间充质干细胞生物学特性, MTT法检测不同浓度芍药苷对人骨髓间充质干细胞增殖的影响, EL ISA 法测定芍药苷干预人骨髓间充质干细胞后培养上清液中白细胞介素6的分泌水平,RT-PCR 检测芍药苷干预后白细胞介素6 mRNA的表达情况。结果与结论：成功分离出骨髓间充质干细胞,具有成骨、成脂分化潜能。与对照组相比,芍药苷浓度为2μmol/L和10μmo l/L可明显促进骨髓间充质干细胞增殖。10μmol/L 芍药苷干预骨髓间充质干细胞后, G0/G1期细胞比例显著降低, S期细胞比例显著升高。10μmol/L 芍药苷干预组骨髓间充质干细胞白细胞介素6 的分泌和mRNA表达均显著高于对照组(P <0.01)。由此得出,一定浓度的芍药苷可促进骨髓间充质干细胞增殖,并提高骨髓间充质干细胞分泌白细胞介素6水平和基因表达。     

骨髓间充质干细胞分泌基质细胞衍生因子1对异体T淋巴细胞和白血病细胞HL-60增殖的影响

背景：骨髓间充质干细胞持续分泌的基质细胞衍生因子1与其受体CXCR4的相互作用，不仅在细胞的炎症反应、造血干细胞的迁移与归巢等生物学过程中发挥作用，还在肿瘤的发生、转移、复发、免疫耐受及血管新生过程中扮演重要角色。 目的：探讨骨髓间充质干细胞分泌的基质细胞衍生因子1对T淋巴细胞及白血病细胞HL-60增殖的影响。 设计：细胞学体外对照观察。 材料：骨髓标本来自本院血液科异基因骨髓移植供者及骨髓象正常的非白血病患者，T淋巴细胞来源于健康志愿者，急性髓性白血病细胞株HL-60为本实验室液氮冷冻保存，CXCR4单克隆抗体12G5为eBioscience公司产品。 方法：应用Ficoll密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞，传至第3代后收集培养5 d的细胞上清，离心去沉淀后备用。应用尼龙棉柱法分离异体外周血T淋巴细胞，调整细胞密度为2×109 L-1备用。T淋巴细胞与骨髓间充质干细胞的共培养实验设立3组：T淋巴细胞组、T淋巴细胞+细胞上清组、T淋巴细胞+细胞上清+单抗组。HL-60细胞与骨髓间充质干细胞的共培养实验设立3组：HL-60细胞组、HL-60细胞+细胞上清组、HL-60细胞+细胞上清+单抗组。 主要观察指标：MTT法检测T淋巴细胞及HL-60细胞在应用单克隆抗体12G5前后的增殖情况。 结果：与T淋巴细胞组比较，T淋巴细胞+细胞上清组、T淋巴细胞+细胞上清+单抗组的吸光度值均明显降低（P < 0.05），后两组间比较差异无显著性意义（P > 0.05）。与HL-60细胞组比较，HL-60细胞+细胞上清组吸光度值明显升高（P < 0.05）；与HL-60细胞+细胞上清组比较，HL-60细胞+细胞上清+单抗组的吸光度值明显降低（P < 0.05）。 结论：加入单克隆抗体12G5阻断基质细胞衍生因子1的生物学效应后，不影响骨髓间充质干细胞上清液抑制T淋巴细胞增殖的效果，但可以抑制白血病细胞HL-60的增殖。     

脊髓压迫症状为初发表现的急性非淋巴细胞白血病二例

目的 提高对急性非淋巴细胞白血病(ANLL)脊髓压迫症状的认识.方法 报道2例并发脊髓压迫症状的ANLL的诊断、治疗经过及预后并进行相关文献复习.结果 2例患者发病年龄小,均为难治性白血病,在化疗过程中均死于并发症.结论 对于考虑白血病或明确诊断白血病同时伴有腰背痛、下肢感觉活动异常等症状者要注意脊髓压迫症,对于ANLL鞘内注射化疗药物应同样得到重视.     

应用逆转录病毒载体转染K562细胞株的实验研究

目的:探讨多种细胞因子联合刺激下,逆转录病毒载体对K562细胞的基因转移效率。方法:以PA317-GCGPXSN细胞制备病毒上清,NIH3T3细胞测定病毒滴度后,取经过SCF、IL-3、IL-6预培养刺激后的K562细胞,实施基因转移,流式细胞仪及PCR方法测定基因转移效率。结果:①病毒滴度为1.9×105CFU/m l;②对照组K562细胞测定的荧光强度数值为0.56%,实验组为77.16%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。PCR方法扩增到了NeoR基因的特异性片断。结论:细胞因子预刺激后实施基因转移,可有效地将外源基因转移进入K562细胞基因组中。     

细胞因子对逆转录病毒载体介导的小鼠骨髓造血干细胞基因转移效率的影响

本实验探讨细胞因子SCF,IL-3和IL-6对基因转移效率的影响,为临床基因治疗提供可靠依据。以小鼠造血干细胞为靶细胞,应用包装细胞株PA317-GCGPXSN制备病毒上清,实施基因转移,采用FACS,GM-CFU,PCR和Southern blot方法测定基因转移效率。实验结果为:SCF,IL-3,IL-6单用或联合应用后,FACS测定的基因转移效率为0.07％-0.20％,GM-CFU测定的结果为20.4％-46.40％,阳性对照组测定的结果则分别为0.06％和10.92％。结论提示SCF/IL-3,SCF/IL-3/IL-6联合应用能显著提高基因转移效率。     

移植物抗宿主病动物模型的研究现状

移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后影响患者生活质量和长期生存的重要因素,是导致allo-HSCT失败的主要原因之一.近年来,随着GVHD动物模型的长足发展,GVHD的病理生理学机制也有更深入的认识.笔者就近年来国内外GVHD动物模型研究进展进行综述.