氧化修饰低密度脂蛋白对内皮细胞功能的影响

目的 观察氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）对内皮细胞NO／ET-1、t-PA／PAI-1合成、细胞表面细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响。方法 采用培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs），在分另0加入不同浓度ox-LDL（50、100、150、200mg／L）孵育24h后，观察培养液中NO、ET-1、t-PA、PAI-1水平及细胞表面ICAM-1的表达。结果 ox-LDL可显著抑制NO、t-PA的合成。ox-LDL还可明显增加ET-1、PAI-1的分泌及诱导细胞表面ICAM-1的表达。结论 ox-LDL对内皮细胞具有明显的细胞毒作用，它对NO／ET-1、t-PA／PAI-．1及ICAM-1表达的影响可能是其致动脉粥样硬化发生的重要机制之一。     

罗格列酮对apoE基因敲除小鼠血浆高敏C反应蛋白水平的影响

目的探讨罗格列酮对apoE基因敲除小鼠血浆炎症因子水平的影响。方法20只8周龄apoE基因敲除小鼠随机分为动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型组和罗格列酮干预组,另取10只8周龄野生型C57/BL小鼠作为正常对照组。3组均饲喂普通饮食,罗格列酮组给予10mg.kg-1.d-1,12周后获取静脉血和主动脉标本。分别用胶乳凝聚法、微量快速测定法及XO法测定高敏C反应蛋白(hs-CRP)、丙二醛(MDA)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性。HE染色后镜下观察主动脉病变。结果AS模型组主动脉形成明显的动脉粥样硬化斑块,罗格列酮干预组病变较AS组轻;AS组血浆MDA、hs-CRP含量均显著高于正常对照组,罗格列酮干预组MDA、hs-CRP含量均显著低于模型组。模型组血浆SOD含量活性明显低于正常对照组,而罗格列酮干预组活性显著高于模型组。结论罗格列酮具有抗AS作用,且其抗AS作用可能与其抗炎症相关。针对炎症有望控制AS的发生发展。     

罗格列酮对apoE基因敲除小鼠血清NOS/NO的影响

目的探讨罗格列酮对apoE基因敲除小鼠血清NOS/NO的影响.方法 20只8周龄apoE基因敲除小鼠分为动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型组和罗格列酮干预组,另取10只8周龄野生型C57/BL小鼠作为正常对照组,3组均饲喂普通饮食,罗格列酮组给予10 mg·kg-1·d-1罗格列酮,12周后获取静脉血和主动脉标本.用硝酸还原酶法测定NO及NOS.用全自动生化分析仪测定血脂水平.HE染色后镜下观察主动脉病变.结果 AS模型组主动脉形成明显的动脉粥样硬化斑块,罗格列酮干预组病变较AS组轻;AS组血浆NO、NOS含量均显著低于正常对照组(P<0.05),罗格列酮干预组NO、NOS含量均显著高于模型组.结论罗格列酮具有抗AS作用,且其抗AS作用可能与其逆转受损的内皮细胞功能有关.     

4-苯基丁酸对糖尿病肾病大鼠的作用

目的 探讨化学分子伴侣4-苯基丁酸（4-PBA）对糖尿病肾病（DN）大鼠的治疗作用及其机制。 方法 54只大鼠随机分为正常对照组（NC）、糖尿病肾病组（DN）和4-PBA治疗组（4-PBA）,每组各18只。在治疗第4、8及12周末分别检测各组大鼠肾质量指数（KI）、24 h尿蛋白排泄率（UAER）、血肌酐（Scr）、尿素氮(BUN)、尿丙二醛（MDA）含量和超氧化物岐化酶（SOD）活性;观察肾脏病理改变;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织p47phox mRNA的表达变化;Western印迹检测p47phox和硝基酪氨酸（NT）的蛋白表达变化。 结果 与NC组大鼠比较,在4、8和12周时,DN大鼠的KI显著增高（P < 0.05）,UAER（mg/24 h）也显著增高（4.92±0.70 比 0.26±0.07、 5.29±0.83 比0.28±0.08、5.54±0.81比0.29±0.04,均P < 0.05）。12周时病理显示DN大鼠肾小球系膜细胞增生,系膜基质积聚;而与DN组大鼠比较,4-PBA治疗组大鼠KI显著降低（P < 0.05）,UAER（mg/24 h）亦显著降低（4、8和12周分别为3.71±0.37、3.47±0.36和3.28±0.40,P < 0.05）,4-PBA能显著减轻肾脏的病理变化。在4、8和12周,与NC组大鼠比较,DN大鼠肾组织p47phox mRNA表达分别升高了154.72%、148.60%和91.95%（均P < 0.05）;p47phox蛋白表达分别升高了118.00%、140.10%和177.82%（均P < 0.05）;硝基酪氨酸蛋白表达分别升高了45.29%、59.13%和89.28%（均P < 0.05）;尿MDA含量分别增加了2.05倍、2.26倍和2.43倍;尿SOD活性分别下降了64.78%、71.29%和79.32%。与DN组比较,在8和12周时,4-PBA治疗组DN大鼠肾组织p47phox mRNA和蛋白表达均显著减少（均P < 0.05）;硝基酪氨酸蛋白表达显著减少（P < 0.05）,且与NC组差异已无统计学意义。另外,在4~12周,4-PBA治疗可显著减少DN大鼠尿中MDA含量,增加尿SOD活性（均P < 0.05）。 结论 4-PBA能显著抑制糖尿病大鼠肾脏病理变化,其机制可能与抑制肾组织氧化应激有关。     

不分泌型多发性骨髓瘤合并慢性肾衰竭1例

1临床资料患者,男,63岁,于2010年2月无明显诱因出现全身乏力,伴食欲不振、恶心、干呕、尿痛、尿中有泡沫,就诊于本院。血常规检查:肌酐637.1μmol/L、尿酸477μmol/L、血清蛋白41.0g/L;尿本周式蛋白阴性;免疫球蛋白:IgG 3.35g/L,IgM0.12g/L,IgA 0.13g/L、IgE 20IU/mL;血清蛋白电泳:血清     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠血浆resistin的影响及对肾小球硬化的干预研究

目的： 研究罗格列酮对糖尿病大鼠血清巨噬细胞因子resistin水平的影响,探讨该药物对糖尿病肾小球硬化的干预及可能的作用机制。方法： 20只10周龄Wistar大鼠随机分为糖尿病肾病（DN）模型组和罗格列酮干预组(DN+RSG),另取10只Wistar大鼠作为正常对照组(NC)。DN和罗格列酮干预组大鼠右肾切除后经过阴茎背静脉注射35 mg/kg链脲菌素（STZ）,罗格列酮组按照10 mg·kg-1·d-1的剂量给予罗格列酮灌胃,DN组及正常对照组喂饲普通饮食。STZ注射20周后留取静脉血和24h尿,后处死大鼠并取肾组织。ELISA法检测血浆白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及resistin水平,免疫比浊法测定高敏C反应蛋白(hs-CRP),并测定24 h尿微量白蛋白、空腹血糖及肾功能水平。光镜下观察肾组织的病理改变情况,免疫组化检测肾小球转化生长因子-β1(TGF-β1) 的表达,Western blotting检测Smad2磷酸化水平。 结果： 与NC组比较,DN组大鼠血浆炎症因子IL-1、TNF-α、hs-CRP及resistin的水平均显著升高;罗格列酮干预后血浆中上述指标含量均显著低于模型组。与DN组比较,罗格列酮干预组的空腹血糖无明显变化,但24 h尿微量白蛋白定量及肾功能水平均明显下降。罗格列酮干预后肾小球内TGF-β1蛋白表达及Smad2磷酸化水平较DN组显著降低,并且其肾小球系膜增生程度也较DN组明显减轻。结论： 罗格列酮具有延缓及改善糖尿病肾小球硬化的作用,该作用可能与其降低resistin及其它炎症相关因子的表达有关。针对炎症有望控制DN的发生发展。     

PBL教学法联合案例分析在肾内科见习教学中的应用

目的探索PBL教学法联合案例分析的新模式应用于肾内科见习教学中的效果。方法在肾内科见习教学中,选取16名学生进行PBL联合案例分析教学法教学,与经传统教学的另16名学生进行对比研究。结果实验组理论成绩和病历书写成绩均显著优于对照组(P<0.01)。结论 PBL教学法与案例分析相结合在肾内科见习教学中优于传统教学方法,值得进一步推广。     

调节内质网应激对糖尿病小鼠肾脏SET7/9表达的影响

目的 探讨调节内质网应激对小鼠肾组织组蛋白甲基转移酶(HMT) SET7/9表达的影响及意义.方法 db/db小鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病(DN)组和甜菜碱治疗(DN+B)组;db/m小鼠作为正常对照(NC)组,每组各18只.实验第4、8、12周末分别采用实时定量PCR和(或)Western印迹法测定小鼠肾组织SET7/9、葡萄糖调节蛋白(GRP)78、H3K4me2和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达水平;ELISA法测定24 h尿蛋白排泄率(UPER)和尿MCP-1浓度;全自动生化分析仪检测血糖(BG)、血肌酐、血尿素氮的动态改变;PAS染色观察肾脏病理改变.结果 与NC组比较,DN组BG、BUN、UPER、MCP-1均显著升高(均P＜0.05),且呈时间依赖性.DN组小鼠第4周末开始出现肾小球基底膜增厚、系膜细胞增生改变,第12周末出现明显系膜基质积聚.与NC组比较,DN组肾组织GRP78、SET7/9的mRNA和蛋白质表达水平均显著升高,H3K4me2蛋白水平也显著升高,且呈时间依赖效应.与DN组比较,甜菜碱治疗组小鼠肾小球病变明显减轻,GRP78、SET7/9的mRNA及蛋白表达水平显著降低,BG、BUN、UPER、MCP-1、H3K4me2水平显著降低(均P＜0.05).结论 内质网应激可能是介导糖尿病小鼠肾脏SET7/9表达的上游机制.     

MG132可增强糖尿病大鼠肾脏抗氧化能力

目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病肾病（DN）大鼠的治疗作用及其机制。 方法 72只大鼠随机分为正常对照组（NC）、DN组和MG132治疗组（DN+MG132）,每组各24只。在治疗第4、8和12周末检测各组大鼠24 h尿蛋白排泄率（UPER）、24 h尿量和尿丙二醛（MDA）含量、肾组织26S蛋白酶体、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织SOD、GSH-PX和p47phox mRNA的表达变化;Western印迹检测p47phox的蛋白表达变化。 结果 与NC组大鼠比较,在4、8和12周时,DN大鼠的UPER显著增高（均P < 0.05）;12周时病理显示DN组大鼠肾小球系膜显著增生和系膜基质积聚增多。与同期DN组大鼠比较,MG132治疗组大鼠的UPER显著降低（均P < 0.05）,肾小球系膜增生和基质积聚均减少。在4、8和12周,DN组大鼠肾组织26S蛋白酶体活性比NC组分别增高了2.14倍、2.66倍和3.68倍（均P < 0.05）。与DN组大鼠比较,MG132治疗组大鼠26S蛋白酶体活性显著下降（均P < 0.05）。与NC组大鼠相比,DN组大鼠肾组织p47phox mRNA表达分别升高了155%、149%和120%（均P < 0.05）;p47phox蛋白表达分别升高了139%、152%和186%（均P < 0.05）;尿MDA含量分别升高了1.95倍、2.04倍和2.62倍（均P < 0.05）;而DN大鼠肾组织SOD活性分别下降23.09%、33.59%和53.31%（均P < 0.05）;GSH-PX的活性分别下降28.57%、33.06%和48.76%（均P < 0.05）;SOD mRNA表达分别下降38.09%、61.44%和76.53%（均P < 0.05）,GSH-PX mRNA表达分别下降29.16%、37.26%和62.40%（均P < 0.05）。与DN组大鼠比较,MG132治疗组大鼠肾组织p47phox mRNA和蛋白表达以及尿MDA含量则显著下降（均P < 0.05）,而SOD和GSH-PX的活性和mRNA均显著升高（均P < 0.05）。 结论 MG132对DN大鼠肾脏有显著的保护作用,其机制可能与增强肾组织抗氧化能力有关。     

内质网应激在尿毒症血清致内皮细胞功能异常中的作用

目的探讨内质网应激(ERS)在尿毒症血清致内皮细胞功能异常中的作用。方法采集尿毒症患者和正常健康人的静脉血血清。以不同浓度的尿毒症血清或正常血清(2.5%、5%、10%、15%、20%)刺激人脐静脉内皮细胞(hUVEC)24h后,采用MTT比色法检测细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期,Hoechst33342染色观察细胞凋亡,荧光定量RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)mRNA表达的变化。结果当浓度小于10%时,尿毒症血清对hUVEC细胞增殖率和S期百分比的影响随浓度增加而增大。当浓度大于10%时,hUVEC细胞增殖率和S期百分比逐渐下降,且细胞凋亡率逐渐增高。与正常血清组比较,10%尿毒症血清刺激后hUVEC GRP78和MCP-1 mRNA表达均显著升高(P<0.05)。应用分子伴侣4-苯基丁酸(4-PBA)干预,可显著抑制尿毒症血清诱导的GRP78 mRNA和MCP-1 mRNA表达(P<0.05),降低hUVEC的增殖率和S期百分比(P<0.05)。结论内质网应激可能是尿毒症血清诱导内皮细胞功能异常的重要细胞内机制。