胰岛素样生长因子Ⅰ受体与细胞凋亡信号转导

胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)是一种跨膜受体,属于酪氨酸激酶受体家族,与胰岛素受体有高度的同源性.在接受其相应的配体刺激后,IGF-ⅠR可以激活包括IRS-1,IRS*2,shc和PI3-激酶等多种胞内亚单位,产生级联信号转导反应,通过启动相关的信号转导通路来发挥抗细胞凋亡的生物学作用.     

关节液中的梅毒螺旋体检测

为了解关节液中梅毒螺旋体感染情况,对两例骨关节置换的患者进行了梅毒血清和关节液检测。采用梅毒血清快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）及梅毒核酸DNA的PCR检测,现报告如下。     

荧光定量聚合酶链反应检测肺癌患者血清循环DNA的临床应用

循环DNA是指存在于血液、滑膜液等体液中的细胞外DNA ,主要以DNA蛋白质复合物的形式存在 ,部分为游离DNA。其在体液中处于一种动态平衡过程 ,由细胞受外源刺激后主动分泌或者细胞损伤或死亡后释放产生[1]。其变化与临床多种疾病 ,尤其是肿瘤有关。本研究用建立的循环DNA提取和定量检测方法 ,对临床不同疾病的血清中循环DNA水平进行研究。一、材料和方法1.标本来源 :随机选择 2 0 0 2年 4月至 6月本院经病理确诊为肺癌患者的血清标本 40份 ,年龄 52～ 84岁 ;肝癌标本 40份 ,年龄 46～ 76岁 ;门诊收集健康体检者血清 3 0份 ,年龄 50～…     

肺癌患者血浆中APC基因启动子甲基化定量检测研究

背景与目的：APC基因编码的蛋白参与信号转导途径,大量研究证实APC启动子区的高甲基化在肿瘤的发生发展中起重要作用。本研究建立血浆APC基因实时荧光定量甲基化特异性基因扩增（methylation—specific PCR,MSP）检测方法,并对临床肺癌患者血浆进行检测,以确定该方法在肺癌诊断中的应用价值。方法：将APC基因启动子甲基化阳性肺癌细胞株NCI—H460细胞用有限稀释法获取单个集落形成的细胞,以经典的酚一氯仿法提取细胞DNA,并用MSP对APC基因甲基化进行验证,紫外分光光度计定量并以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200μL健康人血浆中．得到模拟肺癌患者血浆,利用磁珠核酸提取方法从模拟肺癌及肺癌患者、肺部良性疾病患者和健康对照者血浆中提取DNA,对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰;以模拟血浆样品作为标准品,采用外标准曲线法对各种血浆样品中APC甲基化进行定量分析。结果：所建立的实时荧光定量MSP检测方法的线性范围为1．5×10^2-1．5×10^5拷贝／mL。用该方法检测甲基化肿瘤细胞的DNA其最低检测限为1．5×10^2拷贝／mL。78例肺癌患者有40例组织中检测出APC基因甲基化阳性．其中的19例（47．5％）肺癌患者血浆中APC基因启动子甲基化阳性,APC甲基化浓度为1．67×10^2-6．78×10^3拷贝／mL,中位浓度为1．60×10^3拷贝／mL。38例组织阴性的肺癌患者、31例肺部良性疾病患者和23例健康者的血浆APC基因启动子甲基化均为阴性。结论：实时荧光定量MSP检测血浆APC基因甲基化在肺癌诊断方面具有潜在应用价值。     

血培养阳性病原菌种类及耐药性监测

目的:监测南京医科大学第一附属医院2010年血培养阳性病原菌的耐药性,指导临床合理用药?方法:收集南京医科大学第一附属医院2010年3 625份血培养阳性病原菌鉴定结果;细菌及真菌鉴定采用API系统,细菌药物敏感性测定采用纸片扩散法,真菌药物敏感性测定采用Rosco纸片法,Whonet 5.5软件进行数据分析?结果:3 625例血培养标本中有419份阳性,革兰阳性细菌占57.8%,革兰阴性细菌占38.4%,真菌占3.8%?病原菌耐药性分析结果显示:葡萄球菌和肠球菌中均未发现对万古霉素和替考拉宁的耐药株;肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药高度敏感;非发酵菌对多种抗菌药耐药率高?结论:血培养中检出的病原菌种类较多,对多种抗菌药物的耐药率较高,应引起重视?     

生物发光成像对裸鼠肺部转移瘤的早期检测研究

目的:探讨生物发光成像早期监测裸鼠肺部转移瘤及定量评估肿瘤大小的价值?方法:利用生物发光成像检测含荧光素酶报告基因的人肺腺癌SPC-A1-luc细胞在体内外的生物发光活性?经尾静脉注射SPC-A1-luc细胞建立裸鼠肺部转移瘤模型,应用生物发光成像实时监测肺部转移瘤的生长状态并定量评估肺部肿瘤大小,同时用micro-CT检测肺部转移瘤?结果:SPC-A1-luc细胞能高水平并稳定表达荧光素酶,生物发光光子数与细胞量呈良好的线性相关(R2=0.996 6),且与皮下肿瘤体积呈良好的直线相关(R2=0.984 9)?生物发光成像监测裸鼠肺部转移瘤,在第1周即可检测到肺部弥漫分布的肿瘤细胞,第3周肺部生物发光信号降至最低,定量分析表明此时肺部约有600个肿瘤细胞?而第3周micro-CT未能检测到肺部肿瘤,直到第6周micro-CT才检测到肺部肿瘤?结论:利用生物发光成像能早期监测肺部转移瘤的生长并定量分析肿瘤大小,其灵敏度高于micro-CT成像?     

肺癌中结肠多发性腺瘤样息肉基因启动子1A序列甲基化模式的研究

目的 探寻结肠多发性腺瘤样息肉（APC）基因启动子1A序列中肺癌甲基化位点及其存在模式。方法 用甲基化序列特异性引物，对阳性控制样品（CB＋）、阴性控制样品（CB-）、13份正常肺组织及19份肺癌组织进行APC基因启动子1A序列甲基化特异性扩增（MSP），其扩增产物直接测序和进行克隆测序分析。结果 在19份肺癌组织中，APC基因启动子1A序列的707、714、719和726位点发生高甲基化，甲基化率分别为95％（18／19）、74％（14／19）、74％（14／19）和74％（14／19），与正常肺组织比较，差异均有统计学意义（P〈0．001）。而679和687位点甲基化发生率均为11％（2／19），与正常肺组织甲基化发生率（0／13）接近（P〉0．05）。结论 在APC基因启动子1A序列中存在CpG胞嘧啶二核苷酸特定甲基化模式，其对肺癌早期诊断可能有重要意义。     

六家医院整合子介导宋内志贺菌多重耐药的形成和传播机制研究

目的 探讨我国多个地区宋内志贺菌的同源性与整合子介导其耐药的机制.方法 连续收集2010年我国六家医院分离的22株宋内志贺菌,采用纸片扩散法测定其对抗菌药物的敏感性.采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子同源性检测,PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)进行整合子检测及分类,联合RFLP和DNA测序技术分析整合子携带的耐药基因.结果 宋内志贺菌多重耐药率高达90.9％ (20/22),对四环素和复方磺胺甲噁唑耐药率最高,为95.5％,对青霉素类抗生素(氨苄西林、哌拉西林、阿莫西林)也呈高水平耐药,耐药率分别为86.4％,90.9％和90.9％.PFGE聚类分析结果显示,22株宋内志贺菌可分为10种PFGE亚型,且均属于同一群,其中优势型为F6型,在济南、长春和上海三市传播.59.1％(13/22)的宋内志贺菌中检出Ⅰ类整合子,其中7株Ⅰ类整合子阳性菌株可变区扩增阳性;86.4％(19/22)的宋内志贺菌检出Ⅱ类整合子,Ⅱ类整合子可变区扩增全部阳性;未检测到Ⅲ类整合子.22株宋内志贺菌中仅有1株(4.5％)检测到非典型Ⅰ类整合子,其可变区扩增亦阳性.DNA测序发现Ⅰ类整合子中携带耐药基因盒dfrA17-aadA5,Ⅱ类和非典型Ⅰ类整合子可变区分别携带耐药基因盒dfrA1-sat1-aadA1和bla oxa-30-aadA1.结论 多重耐药宋内志贺菌在我国不同地区间传播,整合子在宋内志贺菌中广泛存在,参与多重耐药的形成.     

乙肝患者血清中HBV DNA含量的测定及其意义

乙型肝炎病毒感染的诊断主要依赖于血清特异抗原抗体和ＨＢＶＤＮＡ的检测。我们用定量ＰＣＲ方法检测乙肝患者血清ＨＢＶＤＮＡ ,以探讨不同免疫标志的乙肝患者血清中ＨＢＶＤＮＡ含量及其意义。1　材料和方法1 1　研究对象　对象为本院 1999年 3月～ 1999年 5月住院及门诊的乙型肝炎患者 43例 ,全部乙肝病例均为临床确诊的乙型肝炎患者。年龄在 19岁～ 5 0岁 ,其中男 2 5例 ,女18例。另选择 7例体格检查后乙肝五项血清标志全阴性 ,肝功能正常作为对照。血清采用经高压灭菌的 1 5ｍｌＥｐｐｅｎｄｏｒｆ管分装 ,于 - 2 0℃冻存待检。1 2　…     

K-ras基因突变与大肠癌

在中国大肠癌的发病率在消化道肿瘤中占第二位。目前,大肠癌的发生发展机制仍未清楚,从分子水平上揭示基因变化,以阐明大肠癌的发病机制是大肠癌的研究重点。RAS基因是普遍存在的真核基因家族,在哺乳动物、鸟类、软体动物、植物、真菌和酵母中都已被确认。序列分析结果揭示,RAS基因和它们的表达产物高度保守,这就意味着它们在细胞增殖和分化过程中起重要作用。K-ras基因突变是最常见的大肠癌相关基因改变之一,本文着重介绍人类大肠癌中的RAS基因家族的突变。