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目的:通过噬菌体展示技术筛选iNOS特异性抑制肽。方法:将iNOSFAD结合区及其附近序列的基因片段装入pET-28A( ),在大肠杆菌BL21中表达,His.bind^TM亲和层析柱纯化目的蛋白,使用纯化蛋白筛选Ph.D.-12^TM噬菌体库,筛选iNOS活性抑制作用较高的噬菌体克隆,测序并合成其中具有一致序列的短肽。结果:得到具有较高表达量的目的蛋白,经His.Bind^TM柱亲和层析纯化后纯度大于95%,以纯化蛋白筛选Ph.D.-12^TM噬菌体库,经4轮筛选获得10株iNOS活性抑制作用较高的噬菌体克隆,测序发现其中5株序列完全相同,合成该12肽,初步研究表明其对iNOS表现为高浓度抑制,低浓度兴奋的作用,而对nNOS及eNOS则没有影响。结论:以iNOSFAD片段蛋白为靶蛋白筛选得到的克隆对iNOS活性具有特异性影响,可根据这些特征设计合成小分子前导药物,创造新的活性药物。 相似文献
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细胞性一氧化氮供体的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应 总被引:5,自引:0,他引:5
目的一氧化氮(NO)供体细胞系的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应研究。方法采用3H-胍氨酸转换法进行NO合成酶(NOS)活性测定;亚硝酸盐检测;DNA片段的提取及凝胶电泳分析;凋亡细胞的DAPI染色观察;Westernblot分析。结果将iNOS真核表达质粒、pCMV/iNOS转染至Sp2/0骨髓瘤的变异株中,并获得能稳定表达iNOS和合成NO的重组细胞系(SPmt/iNOS),表达iNOS的效率为每升培养物含400μg蛋白。利用该细胞作NO细胞性供体,成功地证实NO能诱导Sp2/0骨髓瘤细胞发生凋亡。结论所建细胞性NO供体应用于NO的生物学功能研究具有NO合成稳定;更能模拟体内细胞间NO的信息传递过程;不需任何外源刺激即可合成NO等独特优点。所建NO供体细胞可以用于肿瘤细胞凋亡的研究。 相似文献
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医疗机构微生物气溶胶与医务人员和患者的健康密切相关,吸入微生物气溶胶粒子不仅会引起感染性疾病,还会引起哮喘、神经退行性疾病等非感染性疾病。长期以来,国内对各医疗机构气溶胶污染状况多采用沉降法进行监测,对重点部门监测研究较多,但对医疗机构生物气溶胶的分布、组成和风险的评估不够,对候诊区、人员聚集场所和医务人员职业暴露研究较少。本文通过文献综述法,了解国内外有关医疗机构空气微生物气溶胶的特性,微生物气溶胶的健康风险和监测方法选用,以期进一步指出监测和评估医疗机构环境中生物气溶胶分布、组成的重要性,提高对医疗机构微生物气溶胶传播及健康风险分析研究的认识。 相似文献
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目的 了解临床护士重度职业倦怠发生的危险因素,并构建预测模型。方法 通过便利抽样法收集2021年10月至12月湖北、山西、四川等地区594名临床护士作为调查对象,采用一般资料调查表、职业倦怠量表、良心压力问卷、组织支持量表进行调查。将职业倦怠作为二分类资料处理,应用最优子集回归法筛选出预测因素并构建列线图模型,采用曲线下面积评估预测模型区分度,运用校准度曲线评价模型校准度。结果 594名护士检出重度职业倦怠181名,占30.47%。经最优子集回归法筛选出5个预测变量为妇产科、儿科(OR=0.399,95%CI[0.193,0.824])、轮值夜班(OR=1.637,95%CI[1.031,2.587])、加班频率3~5次/周(OR=0.383,95%CI[0.151,0.967])、良心压力(OR=0.236,95%CI[0.088,0.634])、组织支持感(OR=5.664,95%CI[2.326,13.796])。构建的预测模型AUC为0.709,校准曲线与理想概率曲线基本平行。结论 临床护士重度职业倦怠预测模型预测效果良好,可为评估护士职业倦怠严重程度提供借鉴。 相似文献
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目的 探讨小规模限制性在线课程在科研初级班护士科研理论培训中的应用效果.方法 按照科研培训时间将195名初级班科研培训护士分为对照组92名和实验组103名,对照组科研理论培训采用传统线下讲座式培训,实验组采用小规模限制性在线课程培训,包括课前准备、课堂教学和课后反馈三个部分.结果 培训后,实验组7个培训主题及综合理论考核成绩显著优于对照组,实验组科研能力自评分显著高于对照组(P<0.05,P<0.01);实验组培训后1年内以第一作者发表科研论文、在省级会议进行壁报或大会发言、参与专利申报与研制、参与完成科研课题人次多于对照组.结论 小规模限制性在线课程用于科研培训初级班护士科研理论培训,有利于护士掌握科研理论知识,提高其科研自评能力,促进科研成果产出. 相似文献
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目的 对医疗机构消毒灭菌物品外包服务过程中的风险分析与评估,进一步规范消毒灭菌物品外包服务项目运行。方法 运用风险评估策略,对外包项目风险过程开展问卷调查,头脑风暴和实地考察,查找出消毒物品外包过程9个环节51项风险因素,采用矩阵法和Borda序值法对风险因素进行风险分级和风险排序。结果 风险主要来自于物流环节、消毒效果质量控制环节以及卫生计生行政部门政策和监管等环节。结论 将控制和减少风险作为项目管理的目标,提出相应对策和建议,为制定相关政策和标准提供依据。 相似文献
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逆行射精是指性交时有射精感觉,有性交快感,能达到性欲高潮,但没有精液自尿道口射出,而性交后排尿可在显微镜下发现尿中有大量精子,化验尿时还可见有大量果糖. 相似文献
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目的编制女性乳腺癌患者配偶需求评估量表,并检测其信度和效度,以便更好地评估乳腺癌患者配偶的需求。方法以马斯洛需求理论为依据,通过文献分析、质性访谈和专家咨询,形成"女性乳腺癌患者配偶需求评估量表"的初始量表,并进行两轮专家咨询。采用便利抽样方法选取169名乳腺癌患者配偶进行调查,对量表的信度与效度进行评价。结果本研究两轮专家咨询均发出15份咨询表,收回15份,专家的积极系数为100.0%;两轮专家权威系数Cr均为0.877。通过克伦巴赫a系数、相关分析、项目区分度、因子分析等方法分析后,最终形成了包括"生理需求、安全需求、爱与归属需求、尊重需求,自我实现需求"5个维度的23个条目的量表,量表总内容效度指数(content validity index,CVI)为0.99;提取特征值1的全部5个公因子,累积贡献率为68.317%;量表总体的克伦巴赫α系数为0.931,各维度的克伦巴赫α系数为0.684~0.925;量表总体的分半信度为0.877,各维度的分半信度系数为0.669~0.883。结论本研究基于马斯洛的需求层次理论编制的女性乳腺癌患者配偶需求评估量表,具有较好的信度与效度,可用于评估乳腺癌患者配偶的需求。 相似文献
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目的 从中药材中筛选具有开发潜力的有效成分并阐明中药作用机制。方法 参照国际植物样品库的建库方法,根据中药材的种属和药用部位不同,比较乙醇提取效率的影响因素,建立适合于植物中药材微量样品库的制备方法。结果 醇提和两步拆分法建立的样品库具有疾病特异性和微量特点,并初步成功地筛选到多个utrophin刺激剂。结论 本研究根据中医临床用药理论,建立的以单一疾病为基础的小样品微量样品库,适用于一般实验室对单一疾病的药物研究。 相似文献