血液与非血液灌流行缺血预处理鼠心的电生理实验研究

本实验研究血液与非血液灌流条件下缺血预处理（ＩＰ）对心肌的保护作用。应用离体大鼠Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ灌流模型，分血液灌流ＩＰ组、非血液（ＫｒｅｂｓＨｅｎｓｅｌｅｉｔ液，ＫＨ液）灌流ＩＰ组及相应的对照组。测量心肌电生理特性等指标。结果与ＫＨ液灌流心脏相似，用血液灌流的大鼠心脏经ＩＰ后，在随后的停灌和复灌期间，心室颤动阈升高，心律失常发生率明显降低。实验结论为在用血液灌流离体大鼠心脏模型上，ＩＰ对心肌的保护作用与用生理溶液灌流的模型基本相同。     

茶多酚对正常大鼠及糖尿病大鼠右室乳头肌收缩功能的影响

目的：研究不同浓度的茶多酚（TP）对于正常大鼠及糖尿病大鼠成模后第6周、第8周右室乳头肌收缩功能的影响。 方法： 以四氧嘧啶复制糖尿病大鼠模型，将成模后第6周、第8周糖尿病大鼠右心室乳头肌游离，置于氧合台氏液中，电刺激状态下，记录乳头肌收缩功能，观察不同浓度的茶多酚的影响，并与对照组大鼠进行比较。 结果： 成模糖尿病大鼠第6周时舒张1/2间期延长（P<0.05），收缩速度:+dT/dtmax，-dT/dtmax均降低(P<0.01,P＜0.05)，至第8周张力增量，收缩速度:+dT/dtmax，-dT/dtmax降低（P<0.01）,舒张1/2间期延长（P<0.01）。正常SD大鼠和糖尿病大鼠右室乳头肌给予不同浓度的茶多酚，在15-120 mg/L的浓度范围内，茶多酚对于正常大鼠可以产生正性肌力作用;虽然糖尿病6周大鼠的右室乳头肌收缩功能有所降低,但对茶多酚产生与正常大鼠相似的反应，而糖尿病8周的大鼠对于茶多酚无明显反应。 结论： 茶多酚应用于早期的糖尿病性心肌病，可以产生正性肌力作用，但是对于有严重的心肌损害的糖尿病大鼠心肌，不能产生正性肌力作用。     

丹参注射液加强缺血预处理对大鼠心肌的保护作用

以整体麻醉SD大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎／松开作为缺血／再灌注动物模型，研究丹参注射液（SM）在加强缺血须处理（IP）的心肌保护中的作用。结果显示，IP能减轻复灌性心律失常的严重程度，缩小心肌梗死范围；SM能缩小心肌梗死范围；SM联合IP与单纯IP比较，心肌梗死范围进一步缩小；SM联合IP与单纯SM比较，心律失常严重程度减弱且心肌梗死面积进一步减小。结果表明，SM能加强IP的心肌保护作用，特别是加强IP的抗心肌梗死作用。     

基于压力相平面推导的τ和K在评价离体缺血/再灌注大鼠心脏左心室舒张功能中的作用

目的:应用分析和比较基于压力相平面(PPP)推导的心室等容舒张期时间常数)(和室腔僵硬度常数(K)在离体大鼠心脏缺血/再灌注过程中的变化,探讨其在评价左心室舒张功能异常中的价值。方法:采用SD大鼠心肌不同时程缺血/再灌注模型,分别计算出LVEDP、-(dp/dt)max、和K。同时,检测冠脉流出液中的乳酸脱氢酶(LDH),并进行心肌电镜观察。结果:在再灌注过程中,在各缺血组均明显高于空白对照组(P0.05),K在各缺血组均明显低于空白对照组(P0.05);而且,随着缺血时间延长,更高,K更低(P0.05)。除了缺血15min组,其余各组LDH含量在再灌注10min和20min时均高于空白对照组(P0.05);缺血45min组和缺血60min组LDH含量在再灌注10min和20min时均高于缺血30min组(P0.05)。随着缺血时间延长,心肌超微结构发生异常改变。结论:基于PPP推导的和K可以作为定量评价离体大鼠心脏缺血/再灌注过程中的左心室舒张功能的指标,还可以反映缺血/再灌注损伤的严重程度。     

缺血后处理对不同时程冷保存大鼠心脏的作用研究

目的:研究缺血后处理(postconditioning)对不同时程冷保存大鼠心脏的作用及其机制。方法:利用Langendorff离体鼠心灌注法,观察大鼠心脏在Celsior液(4℃)中保存3 h或5 h后,在其后复灌60 min期间血流动力学的恢复情况,并对复灌期间心律失常严重程度进行定量分析。缺血后处理采用全心停灌30 s,复灌30 s,循环3次。结果:(1)与3 h冷保存对照组相比,大鼠心脏冷保存3 h后给予缺血后处理,在多个复灌时间点上可明显降低左室舒张末期压力,而心率、左室发展压、左室最大收缩/舒张速率、冠脉流出量、心率与发展压的乘积等的恢复率在复灌期明显高于3h对照组。心脏冷保存3 h后心律失常的发生率在复灌第0~10min时最高,缺血后处理可明显降低心律失常的发生率。(2)在缺血后处理短暂复灌期的K-H灌流液中加入100μmol/L的5-HD(线粒体ATP依赖性钾离子通道的阻断剂),可取消缺血后处理降低左室舒张末期压力,增高心率、左室发展压、左室最大收缩/舒张速率、冠脉流出量、心率与发展压乘积的作用。心律失常评分亦明显高于3 h缺血后处理组。(3)大鼠心脏冷保存5 h后给予缺血后处理,在复灌期间各项动力学指标以及心律失常评分上与5 h冷保存对照组无明显差异。结论:缺血后处理对于3 h冷保存的大鼠心脏有显著的保护作用,其作用机制可能是部分通过激活线粒体ATP依赖性钾离子通道起作用,而缺血后处理对于5 h冷保存的大鼠心脏并无保护作用。     

四氢生物喋呤改善大鼠心脏冷保存12小时的效果

四氢生物喋呤(BH4)是一氧化氮合酶(NOS)的重要辅助因子[1],细胞内BH4的水平与一氧化氮(NO)的合成密切相关,而NO参与机体多种生理功能的调节,内源性NO可减轻心脏缺血再灌注损伤.     

葛根素对铝致痴呆模型小鼠学习记忆及海马SOD、MDA水平的影响

目的探讨葛根素（Pur）对铝中毒所致的痴呆模型小鼠记忆能力的影响及机制。方法给小鼠连续注射AlCl3建立AD模型,用Morris水迷宫法测试小鼠的空间记忆能力,用黄嘌呤氧化酶法测定海马SOD活力,以硫代巴比妥酸法测定海马MDA含量。结果与正常对照组相比,模型组海马SOD活力[（32．11±18．53）U／mg prot]下降（P〈0．01）、MDA含量[（3．94±0．61）nmol／mg prot]上升（P〈0．01）,同时伴有水迷宫成绩的损害。与模型组比较,Pur中、高剂量组海马SOD活力[（58．63±17．92）U／mg prot,（61．29±19．47）U／mg prot]上升（P〈0．01）、MDA含量[（2．93±0．31）nmol／mg prot,（2．89±0．45）nmol／mg prot]下降（P〈0．01）,Pur低剂量组海马SOD活力[（49．74±16．37）U／mg prot]上升（P〈0．05）,Pur中、高剂量组对水迷宫成绩的改善作用优于低剂量组。结论Pur能改善铝中毒所致的痴呆模型小鼠记忆能力,其作用机制可能与其抗氧化作用有关。     

高糖通过环加氧酶2依赖性途径诱导GRP78表达改变

目的： 观察高糖慢性处理对血管内皮细胞内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）表达的影响及其作用机制。方法：培养的HUVECs细胞用含正常糖（5.5 mmol/L）或高糖（30 mmol/L）的培养基处理不同时间后,用MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡,Western blotting法测定蛋白表达情况。结果：与相应对照组相比,HUVECs细胞经高糖孵育24-48 h 后,GRP78蛋白表达量先增加后减少;而环加氧酶-2（COX-2）蛋白表达量逐渐增加。COX-2选择性抑制剂尼美舒利与高糖共孵育后,可明显抑制高糖引起的GRP78蛋白表达改变;同时尼美舒利可抑制高糖孵育48 h 后诱导的细胞凋亡。结论：高糖慢性处理可诱导HUVECs细胞GRP78表达先增加后减少,此过程依赖于COX-2蛋白的上调。     

二氮嗪对冷保存诱导的大鼠供心Smac/DIABLO蛋白表达的抑制作用

目的： 探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道（mitoKATP）开放剂二氮嗪（DE）对离体大鼠供心不同时程冷保存时促凋亡蛋白Smac/DIABLO表达的影响及机制。方法：SD大鼠随机分为3组,包括空白对照组、单纯冷保存组、DE组（Celsior保存液中含30μmol/L DE）,后2组又按冷保存时程不同,分别分为3、6、9、12 h组。实验结束后采用原位末端标记染色法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡,采用Western blotting法检测心肌组织中caspase-3蛋白及胞浆Smac/DIABLO蛋白表达。结果：（1）在Celsior保存液中加入DE后,心肌细胞凋亡指数及caspase-3蛋白表达显著低于相应单纯冷保存组。（2）DE可使Smac/DIABLO蛋白表达高峰由冷保存6 h延迟至9 h。（3）DE的上述作用可被mitoKATP通道特异性阻断剂5-羟基葵酸盐（5-HD）所取消。结论：DE具有对抗冷保存诱导心肌细胞凋亡的作用,这种保护作用可能与其激活mitoKATP 通道和减少促凋亡蛋白Smac/DIABLO表达有关。     

κ阿片激动剂的致心律失常作用涉及百日咳毒素敏感的G蛋白机制

目的：探讨百日咳毒素（ＰＴＸ）敏感的Ｇ蛋白是否介导κ阿片激动剂的心脏效应。方法：应用离体大鼠心脏Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ灌流模型观察κ阿片激动剂Ｕ５０４８８Ｈ的心脏作用并探讨其可能机制。结果：研究结果表明，Ｕ５０４８８Ｈ可导致心律失常、降低心率、心肌收缩力量和冠脉流量；ＭＲ２２６６和百日咳毒素（ＰＴＸ）预处理后，可取消Ｕ５０４８８Ｈ的致心律失常作用，但不能取消其降低心肌收缩力量和冠脉流量的作用。结论：结果提示κ阿片激动剂的致心律失常作用涉及ＰＴＸ敏感的Ｇ蛋白机制。