Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测肠球菌方法评估

目的用Phoen ix-100全自动微生物鉴定/药敏系统(简称Phoen ix-100系统)检测肠球菌并评估此检测系统。方法收集50株临床分离肠球菌,用Phoen ix-100系统进行鉴定及药敏试验,通过与API鉴定系统、药敏纸片法和E-test法[筛选耐万古霉素肠球菌(VRE)]比较,对Phoen ix-100系统进行评估。结果与API鉴定系统相比,Phoen ix-100系统鉴定肠球菌的一致率为90.0%。与药敏纸片法相比,Phoen ix-100系统检测肠球菌对庆大霉素(筛选耐高浓度氨基糖苷类抗生素肠球菌)、氨苄西林、环丙沙星、红霉素、呋喃妥因、万古霉素和肽可霉素药敏结果的完全符合率分别为94.0%、94.0%、88.0%、94.0%、70.8%、64.0%和92.0%。与E-test法相比,Phoen ix-100系统筛选VRE的完全符合率为84.0%;未出现极大错误,大错误率为12.0%,小错误率为4.0%。结论用Phoen ix-100系统检测肠球菌是一种简便、快速和比较准确可靠的方法。     

产AmpC酶革兰阴性杆菌的检测及院内分布

目的：探讨产AmpC酶菌在医院内的分布情况，为临床经验用药提供依据。方法：采用头孢西丁初筛试验筛选出符合AmpC酶表型筛选条件的菌株共245株，再用三维确诊试验确证产AmpC酶菌株并对其进行分析。结果：1437株革兰阴性杆菌中，筛选出产AmpC酶菌株118株，经三维试验确证阳性检出率为812％(118／1437)。其中阴沟肠杆菌检出最多为65株，占总确证菌株的55．1％(65／118)；其次为鲍曼不动杆菌13株(11．0％)。经医院内分布情况分析，检出率高的为ICU、外科、血液科，分别为19.5％、14.4％、14.4％。标本种类分析检出率最高为痰液57．6％。结论：产AmpC酶菌已成为医院感染的重要病原菌，且以阴沟肠杆菌为主，以第三代头孢菌素使用率高的ICU、外科、血液科分布最广，以下呼吸道最易感染，临床医师应引起高度重视。     

产OXA-23型碳青霉烯水解酶鲍曼不动杆菌基因研究

目的　了解临床分离 12株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的耐药情况、耐药株来源以及产碳青霉烯酶的类型。方法　收集本院对碳青霉烯类药中介或耐药的鲍曼不动杆菌 12株 ,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC) ,脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分析其同源性 ,并用聚合酶链反应 (PCR)检测分析其耐药基因。结果　 12株细菌均为多重耐药株 ,有 9株对亚胺培南耐药 ,6株对美罗培南耐药。对青霉素类、头孢菌素类、复方磺胺甲唑均耐药 ,对氟喹诺酮类和酶抑制剂复合物耐药率最低。 12株PFGE图谱分为A、B(B1、B2 ) 2型 ,以A型为主要流行株 (9株 ) ,主要集中在重症监护病房 (ICU)。PCR检出 12株菌株均携带OXA 2 3基因 ,未能检出OXA 2 4基因。结论　本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行主要为医院感染所致 ,该流行株呈多重耐药 ,12株菌株均产OXA 2 3型碳青霉烯酶。     

214株鲍曼不动杆菌最低抑菌浓度及耐药性

目的　了解我院和威尔斯亲王医院鲍曼不动杆菌对16种抗生素的耐药性。方法　收集我院和香港威尔斯亲王医院临床分离的鲍曼不动杆菌共214株,用琼脂稀释法检测鲍曼不动杆菌对16种抗生素的最低抑菌浓度。结果　214株鲍曼不动杆菌对16种抗菌药物的耐药率中以头孢哌酮舒巴坦、亚胺培南和美罗培南耐药率最低,其他抗菌药物耐药率达49. 5% ~73. 4%。上海菌株对替卡西林、哌拉西林、哌拉西林他唑巴坦、替卡西林克拉维酸、氨苄西林舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮、阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星和复方磺胺甲口恶唑的耐药率均高于香港菌株。其他抗生素耐药率相似。结论　本院鲍曼不动杆菌耐药性高于香港威尔斯亲王医院,需提醒临床医生慎用抗生素,避免多重耐药鲍曼不动杆菌在院内传播。     

检测常见酵母菌耐药性的纸片法和微量稀释法比较

目的用纸片法和微量稀释法检测痰液标本分离酵母菌的耐药性并比较两者符合率,试找出一种适用于临床实验室的简便方法。方法采用丹麦ROSCO公司抗真菌药敏纸片法检测痰液标本分离的86株常见酵母菌对5种抗真菌药物的敏感性,同时用法国生物梅里埃公司ATB FUNGUS 2念珠菌药敏板条测定4种抗真菌药物的最小抑菌浓度,对结果进行分析。结果两性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑2种方法完全符合率分别为95.3%、95.3%和88.4%,未出现一种方法敏感而另一种方法耐药的严重错误现象;对86株痰液标本分离常见酵母菌的耐药性进行分析,两性霉素B、制霉菌素和氟胞嘧啶的敏感率高,分别为95.4%、98.8%、95.3%,伊曲康唑的耐药率最高(15.1%)。结论纸片法和微量稀释法相比有很好的一致性,且抗真菌药敏纸片种类多,便于随时根据临床所需增加单个药敏结果,易于在各临床实验室开展。酵母菌唑类抗真菌药物的耐药现象日益严重,应加强酵母菌的耐药性监测。     

耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌膜蛋白机制研究

目的研究耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌膜蛋白机制并了解其流行型别。方法收集仁济医院、瑞金医院和上海市第六人民医院鲍曼不动杆菌共85株,其中亚胺培南和美罗培南耐药菌49株,敏感菌36株。用细菌基因组回文结构重复序列-聚合酶链反应（REP-PCR）分析其流行型别,PCR扩增检测碳青霉烯类水解酶及金属酶,对阳性扩增菌株进行DNA测序分析,同时用超声波和超速离心法提取细菌的膜孔蛋白并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行分析。结果49株耐亚胺培南和美罗培南鲍曼不动杆菌中,REP-PCR分析结果以A型为主,与敏感菌株存在很大差异;耐药菌株中oxa-51均为阳性,45株为oxa-23阳性;36株敏感菌株中检测到1株oxa-58阳性,29株为oxa-51阳性;金属酶（VIM和IMP-1/4型）均阴性;膜蛋白分析显示,在36株耐药株中38 000附近条带缺失,而在30株敏感株中有17株在相应位置处表达该条带。结论耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌主要以A型流行,产oxa-23水解酶和38 000附近膜孔蛋白条带缺失可能是其主要耐药机制。     

IS256与医院感染表皮葡萄球菌耐氨基糖苷类抗菌药物的关系

目的了解医院感染表皮葡萄球菌对不同类型氨基糖苷类抗菌药物的敏感特征，分析插入序列（IS）256与表皮葡萄球菌耐氨基糖苷类抗菌药物的关系。方法收集2007年2月至2007年7月外科病区中引起医院感染的表皮葡萄球菌48株，利用纸片扩散法测定细菌对4种氨基糖苷类抗菌药物（庆大霉素、奈替米星、链霉素和阿米卡星）药敏特征；构建IS256特异性引物，利用聚合酶链反应（PCR）检测48株细菌中IS256分布状况。结果48株临床分离的表皮葡萄球菌对4种氨基糖苷类抗菌药物的药敏特征分别为：对庆大霉素的耐药率为69％，敏感率为31％；对奈替米星的耐药率为8％，敏感率为79％，中介率为13％；对链霉素的耐药率为42％，敏感率为35％，中介率为23％；对阿米卡星的耐药率为15％，敏感率为75％，中介率为10％。全部临床分离株中，有25株细菌检出IS256。在庆大霉素耐药菌株中，IS256检出率高达70％，与敏感菌相比差异具有统计学意义（P〈0．01）；而对其他3种抗菌药物耐药的菌株中，IS256的检出与耐药无明显相关性（P〉0．05）。结论表皮葡萄球菌临床分离株对氨基糖苷类抗菌药物存在不同程度耐药。IS256与表皮葡萄球菌对庆大霉素耐药密切相关。     

快速筛查革兰阴性杆菌β内酰胺酶

目的应用Cica-Beta-Test试剂盒快速筛查革兰阴性杆菌β内酰胺酶:超广谱β内酰胺酶(ESBILs)、金属β内酰胺酶(MBLs)和染色体介导头孢菌素酶(AmpC酶),为临床抗感染治疗提供耐药依据。方法收集2010年1月至2011年3月上海交通大学医学院附属仁济医院临床分离革兰阴性杆菌共110株,其中头孢噻肟和(或)头孢他啶不敏感大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌各20株,多重耐药鲍曼不动杆菌20株和阴沟肠杆菌30株。其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌用美国CLSI推荐方法确证产ESBLs;对鲍曼不动杆菌用聚合酶链反应(PCR)法检测其MBLs和AmpC酶耐药基因;对阴沟肠杆菌用表型筛选法(三维试验法)检测其AmpC酶;对所有菌株应用Cica-Beta-Test试剂盒快速筛查ESBLs、MBLs和AmpC酶。根据检测结果对试剂盒进行评估。结果应用Cica-Beta-Test试剂盒检测110株临床分离菌未发现假阳性,确诊试验总符合率为92.0%(92/100),其中与PCR法比较检测MBLs和AmpC酶结果符合率为100%;与CLSI推荐ESBLs双纸片确诊试验比较,符合率为86.7%(52/60)。30株阴沟肠杆菌用AmpC酶表型筛选法比较符合率为86.7%(26/30)。结论 Cica-Beta-Test试剂盒可对各种革兰阴性杆菌产生的β内酰胺酶进行筛查及初步分型,简便、快速,灵敏度高,准确率高,尤其能对CLSI未推荐方法的耐药革兰阴性杆菌进行β内酰胺酶快速筛查意义更大。     

十一种中草药对细菌的体外抑菌作用分析

对黄连、黄芩等十一种中草药的体外抑菌作用作了测定，其中清热凉血、清热解毒的中草药黄连、黄芩，金银花、四季青抑菌效果较好，而生晒参、生姜、蒜的抑菌效果差。从抑菌种来看，对亲水气单胞菌的抑菌效果较好，对粘质沙雷菌的抑菌效果较差，用十一种中草药对十一株耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）做了抑菌作用分析，同时用三株标准金葡萄作了比较。结果发现十一种中草药对三株标准金黄葡萄和十一株ＭＲＳＡ的最小抑菌浓度     

IS256与院内感染金黄色葡萄球菌耐氨基糖苷类抗生素的关系

目的:分析院内感染金黄色葡萄球菌药敏特征及其对不同类型氨基糖苷类药物的耐药特征;分析插入序列IS256与院内感染金黄色葡萄球菌耐氨基糖苷类抗生素的关系.方法:收集2007年1月～2007年4月外科病区中引起院内感染的金黄色葡萄球菌75株,利用纸片扩散法检测细菌对3种氨基糖苷类抗生素(庆大霉素、链霉素和阿米卡星)药敏特征;构建IS256特异性引物,利用PCR扩增技术检测75株细菌中IS256分布状况.结果:75株院内感染金黄色葡萄球菌对氨基糖苷类抗生素存在较高耐药率,分别为庆大霉素:82.7%,链霉素:90.7%,阿米卡星:78.7%;插入序列IS256的检出率在金黄色葡萄球菌对庆大霉素不同药敏组中有显著差异(P＜0.01),在耐药菌中检出率为88.7%,而在敏感菌和中介菌株中检出率为8.3%和0%,IS256的检出率在链霉素和阿米卡星耐药菌株中差别无统计学意义(P＞0.05).结论:院内感染金黄色葡萄球菌有明显多重耐药特征,且对氨基糖苷类抗生素耐药率较高,插入序列IS256与金黄色葡萄球菌对庆大霉素耐药有关.