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目的: EB病毒 (Epstein-Barr virus,EBV)存在的变异影响到其生物学功能(如 LMP1基因)。 BamHI A区右向框 0( BamHI A rightward fram0, BARF0)是在鼻咽癌 (Nasopharyngeal Carcinoma,NPC)病人中检出率很高的一个 EB病毒基因,对其变异性的研究尚未见报道,本研究是为了明确广东鼻咽癌组织中 EBV-BARF0基因的序列及其变异。方法:应用 PCR技术从 20例鼻咽癌组织中,扩增 EBV基因 BARF0,并对它们的序列进行测定。结果:与标准株 B95-8相比,鼻咽癌组织中 EBV-BARF0均有 4个位点发生突变: 160473( G→ T)、 160545( C→ T)、 160701( C→ A)、 160707( G→ C),并导致相应的氨基酸的改变: 2( Ala→ Ser)、 26( Leu→ Phe)、 78( Arg→ Ser)、 80( Ala→ Pro)。结论:由于 EBV的 BARF0基因在鼻咽癌细胞株及活检组织中 100%表达,在淋巴瘤组织及淋巴瘤细胞株中表达较低或不表达,本研究首次报道鼻咽癌组织中 EBV-BARF0的序列分析,与 B95-8相比存在变异,并导致了蛋白质的一级结构的改变,推测该基因很可能在鼻咽癌变过程中起着重要的作用。 相似文献
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为了探讨人白细胞介素 18(hIL 18)的表达对鼻咽癌细胞体内致瘤性的影响 ,我们构建了hIL 18的真核表达载体pcD NA3/hIL 18,转染人鼻咽癌细胞株SUNE细胞 ;然后以转染阳性的SUNE细胞和未转染的SUNE细胞接种到用健康人外周血白细胞免疫重建的SCID鼠 (hu PBL SCID鼠 ) ,观察成瘤情况。结果发现 ,所构建的真核表达载体在鼻咽癌细胞中能高效表达hIL 18;ELISA法测得转染阳性细胞培养上清液中hIL 18的含量为 (85± 10 )pg/ml,而未转染的SUNE细胞的培养上清液中hIL 18的含量低于 5pg/ml。将转染阳性的细胞克隆和未转染的SUNE细胞接种hu PBL SCID小鼠后连续观察 5 0d ,发现前者形成的肿瘤其生长速度明显慢于后者 ,其平均瘤重也有显著性差异 (P <0 0 0 1)。说明在体内hIL 18的表达能有效地抑制鼻咽癌细胞的成瘤作用。 相似文献
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鼻咽癌裸鼠移植瘤及其相应体外细胞株的建立与特性研究 总被引:12,自引:7,他引:12
从新鲜鼻咽活检组织建立了一株鼻咽癌(NPC)裸鼠移植瘤株(SUNT一1)及其相应的体外传代上皮细胞株(SUNE一1)。证实SUNT一1和SUNE一1为典型低分化鳞癌细胞,染色体分析二者均为人类肿瘤核型。以PCR技术检测SUNT一1的P1~P18和SUNE一1直到第61代培养的细胞中的EBV一DNA均为阳性。用原位溶细胞电泳技术(Insitulyinggel)EBV探针Southernblot分析,亦显示相应的EBVDNA区带。EBV基因组为线性特征,且在SUNT一1P18和SUNE一1P53细胞的电镜检查中均发现直径为96一100nm的EBV样颗粒。用不对称PCR一SSCP检测,显示有P53第8外显子突变。带EBV基因的NPC瘤株及相应的上皮细胞株建立,为从分子水平、细胞水平上研究肿瘤的发生发展过程,以及治疗等方面提供了丰富的和更切合人体肿瘤的材料和模型。 相似文献
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鼻咽癌细胞系SUNE中EBV-LMP1基因对上皮细胞增殖的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
目的研究鼻咽癌细胞系SUNE中EBV┐LMP1基因对上皮细胞增殖的影响,探索LMP1在鼻咽癌发生中所起的作用。方法用LMP1基因真核表达质粒转染人胚肾上皮细胞,检测LMP1的表达,观察细胞在软琼脂中的集落形成能力,MTT吸收能力以及PCNA的表达情况。结果被LMP1基因转染的细胞生长旺盛,能在软琼脂中形成多个集落,MTT吸收能力增强,PCNA的表达水平增高。结论LMP1基因能明显改变上皮细胞的生物学行为,促进细胞的生长、增殖和转化,使转染的上皮细胞获得肿瘤细胞的生长特征。 相似文献
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为便于与WHO组织调查CMV抗体情况比较,采用AD169株作补结抗原,检测武汉地区各年龄组正常人血清中补结抗体595例,结果2~3月婴儿阳性率低(29.41%),与国外资料相近,但4~6月小儿阳性率(78.57%)显著高于国外大多数国家的。25岁以上年龄组阳性率显著高于以下的,P<0.001。男女性别间,5岁以前各年龄组差异不显,P>0.3。5岁以上各年龄组,女性均高于男性,P<0.001。女性15岁以上组阳性率显著高于以下者,P<0.001。脐血阳性率和女性15~39岁各年龄组,差异不显著,P>0.3。
本资料说明我国CMV感染较普遍,各年龄组均有,这对进一步探索CMV致胎儿畸形提供了依据。 相似文献
本资料说明我国CMV感染较普遍,各年龄组均有,这对进一步探索CMV致胎儿畸形提供了依据。 相似文献
7.
鼻咽癌中p53基因突变的研究 总被引:9,自引:2,他引:9
目的:探讨鼻咽癌中p53基因突变情况。方法:用非同位素不对称PCR-单链构象多态性技术(aPCR-SSCP),分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中p53基因第5、6、7和8外显子(exon)的基因突变,并对其中exon8突变的SUNE-1和SUNT-1进行DNA测序。结果:在20例鼻咽癌活检组织中没有发现突变;但在鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、SUNE-1和瘤株SUNT-1中存在第8外显子突变,而HK1为第5外显子突变。DNA测序发现SUNE-1和SUNT-1的突变点在exon8的密码子(codon)280上,由AGA(精氨酸)→ACA(苏氨酸)。结论:p53基因突变热点的exon5、6、7和8可能在鼻咽癌变过程中没有重要意义,而在裸鼠移植瘤和细胞株建立过程中起重要作用。EBV由于和鼻咽癌的关系密切,在鼻咽癌中可能存在EBV编码蛋白与p53结合或蛋白表达被EBV抑制等其他途径使p53失活。 相似文献
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应用补体结合试验(CFT)及免疫酶标玻片法(IPA)对宫颈癌高发区的正常妇女和宫颈癌低发区正常妇女,宫颈糜烂及宫颈癌病人血清人巨细胞病毒(CMV) IgG抗体进行了测定,并用过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)法检测了宫颈疾患活检组织中的CMV抗原;结果表明,宫颈癌高发区的正常妇女、低发区宫颈糜烂和宫颈癌病人血清CMVIgG抗体滴度的几何均数(GMT)均比低发区正常人高,经统计学处理差别具有高度显著性(P<0.01);IPA法与CFT法的检测结果相符,但IPA法较CFT法敏感;CMV抗原的检出率在宫颈糜烂为30%,宫颈癌为36%。实验结果提示,宫颈疾患中CMV感染较普遍,宫颈癌的发生可能与CMV有关。 相似文献
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唾液中EB病毒抗体检出用于早诊鼻咽癌的研究 总被引:9,自引:1,他引:8
目的:建立在唾液标本中检出 EB病毒 IgA抗体的方法,以快速、特异诊断鼻咽癌。方法:人工合成 EBV-DNA酶及 EA-D多肽片段,分别作为捕捉抗原,采用 ELISA法检测鼻咽癌患者和健康人血清及唾液中 IgA/ EBV-DNA酶和 EA-D抗体。结果:通过检出 O.D值,经统计学处理,选出鼻咽癌诊断阈值为:血清 O.D值≥ 0.3,唾液 O.D值≥ 0.45( DNA酶与 EA-D两者阈值一致)。鼻咽癌与健康者两组间 DNA酶与 EA-D的 IgA滴度均为 P< 0.0001,有非常显著性差异,与病理确诊相比,阳性符合率为 72.6%~ 77.3%。结论:证实 EBV合成肽链作为捕捉抗原,唾液为标本,用 ELISA法是可行的,方法简便,重复性好,价廉,但诊断符合率需进一步提高。 相似文献
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用抗补体免疫荧光法检测鼻咽癌患者和对照人群中EB病毒核抗原-1(EBNA-1)和EB病毒核抗原-2(EBNA-2)抗体的水平。鼻咽癌组中两种抗体滴度都升高,以EBNA-1抗体上升明显;且EBNA-1抗体与总EBNA抗体水平的变化趋势相一致。鼻咽增生性病变组中EBNA-2抗体略占优势,该组中EBNA-2抗体水平升高可能与潜伏状态的EB病毒激活或再感染的早期阶段有关。 相似文献