滨蒿内酯基于CAR调控CYP3A4转录表达的作用机制

目的探讨滨蒿内酯对CYP3A4转录表达的影响及机制。方法人张氏(Chang Liver)细胞中加入0.01、0.10和1.00μmol/L滨蒿内酯24、36和48 h后,用半定量RT-PCR和报告基因方法检测CYP3A4表达量的改变。结果 RT-PCR方法显示不同浓度滨蒿内酯分别处理Chang Liver细胞24和36 h可诱导CYP3A4的表达,48 h后却抑制CYP3A4的表达(P0.01)。不同浓度滨蒿内酯处理转入结构性雄甾烷受体(CAR)载体的细胞可激活CYP3A4的转录表达。结论滨蒿内酯可影响CYP3A的转录表达且这种作用随药物处理时间不同而表现出双向效应,其可能机制是通过CAR所介导。     

应用多种教学方法改善《药理学》教学效果分析

面对当前生物-心理-社会医学模式对医学人才培养的需求,作为一门重要的医学基础课程,药理学教学应从实际出发,明确培养目标,以高质量的教学效果,让学生扎实掌握药理学相关知识,为今后的临床实际工作打下良好基础.近年来,我教研室以学生为中心,遵循加强学生综合能力培养的理念,依据药理学的教学目的和任务,改革了教学内容和教学方法体系,实现了药理学教学质量的优化和提高,现报告如下.     

云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用

[目的]探讨云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用．[方法]采用MTT方法检测不同浓度云芝氯仿萃取物对肝癌HepG．2细胞生存抑制率的影响;应用HE染色方法观察不同质量浓度云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞形态学变化的影响．[结果]MTT方法观察结果显示,云芝氯仿萃取物可抑制肝癌HepG-2细胞的增殖,随着时间的延长和药物浓度的增加,抑制作用越明显,当药物浓度为200mg／L、作用时间为48h时对HepG-2细胞的抑制率为52．3％,接近半数抑制浓度．HE染色结果显示,云芝氯仿萃取物处理的肝癌HepG．2细胞,与对照组相比细胞间距增大、细胞变小、失去原有形态、细胞核皱缩、染色变深、细胞碎裂、可见凋亡小体,并且随着时间的延长和剂量的增加,凋亡程度越严重．[结论]云芝氯仿萃取物可促进肝癌HepG2细胞的凋亡．     

茵栀黄对结构性雄甾烷受体CAR介导CYP3A4的转录调节作用

目的:探讨茵栀黄对CYP3A4转录表达的影响及机制.方法:Chang Liver细胞中加入0.01、0.1和1μM茵栀黄分别作用24h、36h和48h,采用RT-PCR法和报告基因方法检测CYP3A4 mRNA的表达水平.结果:不同浓度茵栀黄分别处理Chang Liver细胞24h和36h可明显升高CYP3A4 mRNA的表达水平(P<0.05);转入CAR载体的Chang Liver细胞经不同浓度茵栀黄处理36h均可激活CYP3A4的转录表达.结论:茵栀黄可能通过CAR介导增加Chang Liver细胞CYP3A4的转录表达.     

异黏蛋白在宫颈癌中的表达及意义

目的：探讨宫颈癌组织异黏蛋白（metadherin,MTDH）的表达和意义。方法：应用免疫组化SP法检测50例宫颈癌组织和30例宫颈正常组织MTDH蛋白的表达情况,并分析MTDH表达与宫颈癌临床病理参数的关系。结果：宫颈癌组织MTDH蛋白的阳性表达率明显高于宫颈正常组织（P ＜0.05）;宫颈癌组织MTDH蛋白的表达与分化程度、淋巴结转移、浸润深度和临床分期有关（P ＜0.05）,与年龄、病理类型无关（P ＞0.05）。结论：MTDH与宫颈癌的发生、发展密切相关,可为评估宫颈癌的转移潜能和预后提供依据。     

多肽化合物urantide对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉和VSMC中Ⅳ型胶原表达的影响

目的：探讨多肽化合物urantide对动脉粥样硬化（AS）大鼠胸主动脉和血管平滑肌细胞（VSMC）中Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）表达的影响,阐明其防治AS的作用机制。方法：180只Wistar大鼠随机分为正常对照组（n=30）和AS模型组（n=150）,采用高脂饲料喂养和腹腔注射维生素D₃（VD₃）的方法建立大鼠AS模型。150只AS模型鼠随机分为AS组、氟伐他汀（Flu）组和urantide组（3、7和14 d组）（n=30）。免疫组织化学法检测大鼠胸主动脉壁内Col Ⅳ的表达水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清和尿液中羟脯胺酸（HYP）水平。体外培养的VSMC随机分为正常对照组、尾加压素（UⅡ）（10^-8 mol·L^-1）组、Flu组和urantide （10^-10~10^-6 mol·L^-1）组,ELISA法检测各组大鼠VSMC培养上清中Col Ⅳ水平。结果：各组大鼠胸主动脉内膜下不规则斑块内Col Ⅳ表达水平比较差异有统计学意义（F=35.09,P<0.01）。与正常对照组比较,AS组大鼠主动脉中Col Ⅳ表达水平明显升高（P<0.01）;urantide组Col Ⅳ阳性染色强度和范围较AS组均减少（P<0.01）。各组大鼠血清和尿液中HYP水平比较差异有统计学意义（F=24.38,P<0.01;F=26.72,P<0.01）。与正常对照组比较,AS组大鼠血清中HYP水平明显升高（P<0.01）,尿液中HYP水平明显降低（P<0.01）;与AS组比较,urantide组大鼠血清中HYP水平均明显降低（P<0.01）,尿液中HYP水平明显升高（P<0.01）,接近或优于Flu组水平。各组大鼠VSMC培养上清中Col Ⅳ水平比较差异有统计学意义（F=31.04,P<0.01）。与正常对照组比较,UⅡ组大鼠VSMC培养上清中Col Ⅳ水平明显升高（P<0.01）;与UⅡ组比较,urantide组大鼠VSMC培养上清中Col Ⅳ水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论：urantide可抑制AS大鼠胸主动脉和VSMC中Col Ⅳ的表达,缓解AS病变程度,为临床应用urantide治疗AS提供了实验依据。     

异丙肾上腺素和卡巴胆碱对麻醉小鼠膀胱排尿功能的影响

目的：观察M胆碱受体激动药卡巴胆碱和β受体激动药异丙肾上腺素对麻醉小鼠膀胱排尿功能的影响。方法：应用八道生理记录仪记录麻醉小鼠膀胱排尿功能的变化情况。结果：6.0μg/kg、7.0μg/kg卡巴胆碱显著延长排尿间隔和排尿时间(P＜0.01,P＜0.05),7.0μg/kg卡巴胆碱显著升高排尿基础压(P＜0.01)。1000μg/kg异丙肾上腺素可显著降低膀胱排尿压(P＜0.05),300μg/kg、1000μg/kg异丙肾上腺素显著延长排尿时间(P＜0.01,P＜0.05)。结论：昆明种小鼠在麻醉状态下,激动M胆碱受体可显著减少膀胱排尿次数,增加膀胱储尿容积;激动β受体则主要降低膀胱排尿压并延长膀胱排尿时间。     

二氢杨梅素预干预对人肺癌A549细胞放射治疗的敏感性作用

目的探索二氢杨梅素(DMY)对人肺腺癌A549细胞放射治疗敏感性的调节作用,及新的肺癌放疗增敏剂。方法采用MTT法和集落形成实验分别寻找二氢杨梅素对A549细胞的短期和长期20%抑制浓度(IC20)作为放疗增敏浓度;流式细胞术周期实验检测二氢杨梅素(IC20)作用不同时间对A549细胞周期时相的改变;集落形成实验检测二氢杨梅素(IC20)预干预24h后再照射对肺癌A549细胞放疗敏感性的影响。结果 MTT和集落形成实验均显示,DMY对A549细胞以浓度依赖形式存在短期和长期的抑制作用,MTT实验时IC20为40mg/L,集落形成实验时IC20为7mg/L;流式细胞术周期实验结果显示,二氢杨梅素作用24h时G2/M期比率增高明显(P0.05);集落增敏实验结果显示,DMY预处理24h后对A549细胞的放射治疗并未见到显著增敏作用(P0.05)。结论二氢杨梅素体外存在抑制A549细胞增殖的作用,其效应与药物浓度和细胞初始接种密度有关;二氢杨梅素作用24h可以使A549细胞G2/M期比率明显增加,但是单纯通过调整放疗前细胞周期时相并未见到明显的放疗增敏作用。