人血清载脂蛋白A-I的分离、纯化及其测定

用超离心法制备人血清高密度脂蛋白(HDL);甲醇/氯仿脱脂;经Sephadex G-150层析及DEAE-纤维素(DE-52)离子交换得纯化载脂蛋白A-I(Apo A-I),免疫新西兰兔,获得效价为1:32的特异性抗人Apo A-I抗血清。用本室建立的单向火箭免疫电泳法测定了158名健康中年人与9名老人的血清Apo A—I含量,结果发现:β-脂蛋白<5g/L,总胆固醇<2mmol/L的人血清Apo A-I含量男女分别为2.06±0.16g/L和2.07±0.15g/L;而β脂蛋白≥5g/L,总胆固醇≥2mmol/L的人血清Apo A-I含量男女分别为1.75±0.15g/L和1.82±0.1g/L,由此可见,血脂正常的男性和女性的Apo A—I含量均显著高于血脂高的男性和女性。80岁以上老年人的血清Apo A-I含量为2.1±0.1g/L,也在正常范围。与文献报道比较,我国人的血清Apo A-I含量高于外国人,这与我国人HDL水平较外国人高一致。     

人肝癌SMMC-7721细胞受体介导内吞高密度脂蛋白-2的逆向胞饮作用

荧光素异硫氰酸酯标记高密度脂蛋白-2保持天然高密度脂蛋白-2的生物活性。人肝癌SMMC-7721细胞与荧光标记无载脂蛋白E-高密度脂蛋白-2在37℃培养3h左右,细胞结合与内吞的荧光强度分别为13.5±0.8和9.2±0.5(±s土)。细胞进一步在37℃培养2h细胞释放的三氯醋酸沉淀和三氯醋酸可溶性荧光强度分别为5.1±0.4和0.67±0.17.4℃培养2h,细胞释放三氯醋酸沉淀荧光强度为0.41±0.16。结果提示:①细胞内吞高密度脂蛋白-2没有经过溶酶体分解途径;②细胞释放高密度脂蛋白-2载脂蛋白是一种取决于温度的逆向胞饮机制。     

用BA-ELISA法测定载脂蛋白A-I

介绍一种高灵敏度的裁脂蛋白A-I(Apo A-I)的测定方法——生物素-亲和素酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA)。本法的工作范围为0.25～4ng Apo A-I,灵敏度约0.1ngAp0 A-I,较已报道的放射免疫法(RIA)和ELISA高3～5倍以上。热处理或加入变性剂均不影响人血清Apo A-I的免疫测定结果。组内和组间变异系数分别为4.55和8.04。经本法测定77名正常成年人血清Apo A-I为1.34±0.23g/L((?)±SD),而且正常成年人血清ApoA-I浓度与高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的浓度呈高度相关(r=0.83,p<0.001)。     

单向火箭免疫电泳测定大鼠血清载脂蛋白AI浓度

单向火箭免疫电泳测定大鼠血清载脂蛋白AI(Apo AI)浓度,操作简单,定量准确。待测样品采用9M脲致变性使抗原决定簇暴露,减少了样品处理时间,得到较好的测定结果。用此法测得雄性和雌性SD大鼠血清Apo AI浓度分别为45.76±6.0mg/dl(n=10)、60.60±9.4mg/dl(n=10)。批内CV为4％,批间CV为7％。正常大鼠注射胰岛素,血清Apo AI浓度明显降低。     

利用生物素－亲合素酶联法研究大鼠肝细胞膜上HDL受体特性

用生物素－亲合素酶联法（ＢＡＥ）测定正常大鼠肝细胞表面ＨＤＬ受体的特性。实验结果表明，无载脂蛋白Ｅ高密度脂蛋白（ａｐｏＥＨＤＬ）与大鼠肝细胞具有高亲和力、高专一性结合，其平衡解离常数Ｋｄ＝５．５２ｍｇ／Ｌ，最大结合量Ｂ（ｍａｘ）＝１７３μｇ／ｇ细胞蛋白。本法灵敏度高、反应温和，不影响ＨＤＬ与其受体的结合能力。     

乙酰咪唑修饰对高密度脂蛋白(HDL)结合人肝癌SMMC-7721细胞的影响

我们以前的研究显示人肝癌SMMC—7721细胞具有HDL_3高亲和力结合部位。FITC标记无ApoEHDL_3(FITC—HDL_3)和天然HDL_3与肝癌细胞结合具有竞争性。本研究HDL_3乙酰咪唑修饰降低它的竞争结合作用。这一押制作用取决于乙酰咪唑浓度,在1mol/L时达最大抑制。我们结果提示HDL_3中酪氨酸残基存在于HDL_3结合确认部位,参与HDL_3的受体结合过程。     

载脂蛋白E多态性与心肌梗死的关系

研究载脂蛋白Ｅ多态性与心肌梗死（心梗）发病之间的关系。方法采用ＰＣＲ结合限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ），检测４４例心梗幸存者及１９１例体检者的载脂蛋白Ｅ的基因型。结果心梗幸存者中携带ε４等位基因的百分数及Ｅ３／４基因型的百分数高于对照组（Ｐ＜０．０５）。女性患者的ε４等位基因频率及Ｅ３／４基因型高于同性别对照组（Ｐ＜０．０５），且高于男性患者；男性患者的基因型分布及等位基因频率与同性别对照组无统计学差异。结论载脂蛋白Ｅ基因多态性对心肌梗死的发病有影响，女性相关非常明显，男性可能因为有其他因素的作用，如高血压、吸烟、紧张等使相关性减弱。     

烟酸类似物对急性心肌梗塞后升高的血浆游离脂肪酸的影响

急性心肌梗塞症状发作后24小时内,其血浆游离脂肪酸(FFA)升高,急性心肌缺血患者FFA升高往往与严重室性心律不齐发生率之增高有关。烟酸可抑制脂肪细胞内环磷腺苷的积聚,储存脂肪的脂解减低,使进入血浆的FFA及甘油三酯减少。理论上抑制脂解可减少室性心律不齐的发生及改善急性心肌局部缺血时心肌的功能。但烟酸能引起周围血管扩张及增加心输出量,故不适用于急性心肌梗塞患者。本文叙述了烟酸类似物5-氟-3-羟甲基嘧啶(NAA)的应用,它可代谢为5-氟烟酸,延长烟酸抑制FFA释放的作用,从而降低血浆FFA水平。不胖的正常人口服200毫克NAA后,15分钟血     

四氧嘧啶性糖尿病大鼠体内高密度脂蛋白和胆固醇的代谢

四氧嘧啶性糖尿病大鼠,血清总胆固醇(TC)、胆固醇酯(CE)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)较对照均显著上升,但极低密度脂蛋白-胆固醇(VLDL-C)和HDL-C/LDL-C则没有差别。影响血清高密度脂蛋白(HDL)水平的几个因素测定结果为脂蛋白脂酶(LPL)和肝内皮细胞脂酶(HEL)及肝细胞对~(125)I-HDL的吸收和分解能力显著低于对照;卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)活性和肝灌流液中HDL-C水平显著上升。 可见糖尿病大鼠由于体内胰岛素绝对缺乏可通过以下几个方面影响HDL和胆固醇代谢:降低肝细胞对HDL的吸收和分解;促进肝脏分泌HDL;抑制HEL和LPL的活性;升高LCAT活性;升高血清TC、CE、HDL-C和LDL-C水平,而对VLDL-C及HDD-C/LDL-C没有影响。     

秋水仙碱对日本血吸虫感染的小鼠肝葡糖胺基聚糖代谢的影响(英文)

目的:研究秋水仙碱对日本血吸虫感染的小鼠肝葡糖胺基聚糖(GAG)代谢的影响.方法:被日本血吸虫感染6—16 wk的小鼠用秋水仙 碱治疗,测量小鼠肝GAG的含量.显微镜观察感染后第6,10,13 wk小鼠肝脏组织切片.结果:感染6 wk以后,小鼠肝GAG含量显著高于未感染的对照组.GAG含量在第10 wk达到最高峰,约为正常水平的6倍:感染组为56±9 μg/g,无感染组为10 1 μg/g,10 wk后,无感染组GAG水平开始下降.秋水仙碱治疗使感染10 wk小鼠的GAG含量比感染对照组降低了约50％,即22±3 μg/g,说明在第10 wk秋水仙碱不能使GAG含量下降到正常水平以下.结论:秋水仙碱可能通过抑制肉芽组织的形成从而降低被日本血吸虫感染的小鼠肝GAG的含量.