高密度脂蛋白在宫颈鳞状细胞癌诊断中的临床价值

目的:探讨高密度脂蛋白(HDL)的表达水平以及在宫颈鳞状细胞癌早期检测中的临床价值。方法:选取169例宫颈鳞癌患者作为实验组,选取同期295例健康体检均正常的女性作为正常组(2012年04月—2017年09月)。对实验组和正常组研究对象的HDL进行检测,探讨检测肝功能指标HDL在宫颈鳞状细胞癌诊断中的应用价值。结果:与正常组比较,实验组HDL的表达显著性下降,且具有统计学差异(P0.001)。结论:HDL的表达水平在宫颈鳞状细胞癌中明显下调,可以协助宫颈鳞状细胞癌的早期诊断。     

PSMB8在人绒毛膜滋养层细胞中对细胞凋亡和自噬的影响

目的 初步探讨蛋白酶体亚基PSMB8(proteasome subunit beta 8)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)凋亡及自噬的影响。方法 将HTR-8细胞分为转染组和对照组,采用瞬时转染的方法分别将PSMB8 siRNA-1、PSMB8 siRNA-2转入转染组中,将NC siRNA转入对照组中。转染48h后用qRT-PCR进行干涉效率验证,CCK-8检测细胞增殖情况,TUNEL和流式细胞术分析细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测细胞内caspase-3(cleaved)和LC3蛋白的表达,qRT-PCR检测细胞中自噬相关基因mRNA表达水平。结果 qRT-PCR结果显示,PSMB8 siRNA-1组干扰效果较好。与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组细胞增殖能力减弱,HTR-8细胞中TUNEL(15.05±2.62 vs 33.40±2.44, P=0.000)和caspase-3(cleaved)(21.70±5.87 vs 53.29±10.29, P<0.01)阳性率增加。流式结果显示,与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组存活细胞比例减少(89.10±0.78 vs 77.00±1.68, P=0.000),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例增加(9.09±0.65 vs 10.71±0.61, P<0.05),坏死细胞比例也增加(2.49±0.73 vs 12.49±2.02,P<0.01)。与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组LC3蛋白阳性细胞率增加(19.02±3.78 vs 31.90±4.87, P<0.05),各自噬相关基因mRNA相对表达水平均上调。结论 在HTR-8细胞中沉默PSMB8基因表达可以诱导细胞凋亡并且激活自噬。     

MCP-1和CD105在稽留流产患者蜕膜组织中的表达及意义

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和CD105在稽留流产（MA）患者蜕膜组织中的表达及意义。方法选取2020年6至12月重庆医科大学附属永川医院收治住院的10例MA患者作为MA组,10例正常宫内早孕要求终止妊娠者作为对照组,提取两组蜕膜免疫细胞（DIC）,利用流式细胞术检测其MCP-1阳性细胞比例,免疫组化法观察蜕膜组织中CD105的定位及表达水平,Westernblot法检测蜕膜组织中CD105的表达水平。结果与对照组比较,MA组患者DIC中MCP-1阳性细胞比例明显升高（P＜0.05）。免疫组化结果显示,两组蜕膜基质细胞的细胞质与细胞核中均有CD105表达,MA组CD105表达水平较对照组明显升高（P＜0.05）。Westernblot结果显示,与对照组比较,MA组蜕膜组织中CD105蛋白表达水平升高（P＜0.05）。两组MCP-1阳性细胞比例与CD105蛋白表达水平均呈正相关（r=0.931和0.940,均P＜0.01）。结论MCP-1和CD105在MA患者蜕膜组织中表达水平升高,促进了MA的发生和发展。     

核因子E2相关因子2在足月胎膜早破组织中的表达及临床意义

目的: 探讨胎膜组织中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)的表达与足月胎膜早破发生发展的关系。方法: 选取30例健康孕妇(对照组)和30例胎膜早破孕妇(胎膜早破组),采用荧光定量PCR和蛋白质印迹分别检测两组胎膜组织中Nrf2 mRNA及其蛋白的表达;免疫组织化学检测胎膜组织中Nrf2定位及表达。结果： 与对照组比较,胎膜早破组Nrf2 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.01和P<0.05);Nrf2在胎膜组织各层结构的细胞核和细胞质中均可见,Nrf2在羊膜上皮层表达最高;与对照组比较,胎膜早破组Nrf2在羊膜上皮层、绒毛滋养细胞层和蜕膜层中表达明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论： 胎膜组织中Nrf2低表达可能与胎膜早破的发生发展有关。     

高密度脂蛋白在宫颈鳞状细胞癌诊断中的临床价值

目的:探讨高密度脂蛋白(HDL)的表达水平以及在宫颈鳞状细胞癌早期检测中的临床价值。方法:选取169例宫颈鳞癌患者作为实验组,选取同期295例健康体检均正常的女性作为正常组(2012年04月—2017年09月)。对实验组和正常组研究对象的HDL进行检测,探讨检测肝功能指标HDL在宫颈鳞状细胞癌诊断中的应用价值。结果:与正常组比较,实验组HDL的表达显著性下降,且具有统计学差异(P0.001)。结论:HDL的表达水平在宫颈鳞状细胞癌中明显下调,可以协助宫颈鳞状细胞癌的早期诊断。     

CG5033基因在果蝇睾丸中调控生殖干细胞的自我更新和分化

目的:探讨CG5033基因在果蝇睾丸中对生殖干细胞自我更新和分化过程的影响。方法: 采用UAS/Gal4系统驱动果蝇睾丸生殖干细胞(nos Gal4)、分化的精原细胞（bam Gal4）和包囊细胞（tj Gal4）中UAS CG5033 RNAi的表达。在F1代果蝇中挑选单只nos>CG5033 RNAi、bam>CG5033 RNAi及tj>CG5033 RNAi基因型成年雄蝇,与3只野生型处女蝇杂交,观察是否可获得后代果蝇;通过光学显微镜和免疫荧光染色方法观察野生型和CG5033 RNAi雄性果蝇睾丸中Vasa、眼缺陷蛋白（eyes absent,Eya）、DE cad、锌指结构域1蛋白（Zn finger homeodomain 1,Zfh1）和1B1的表达模式。结果： 与野生型果蝇组比较,nos>CG5033 RNAi组和tj>CG5033 RNAi组果蝇呈雄性不育,而bam>CG5033 RNAi果蝇组生育率未受影响。光学显微镜下,与野生型果蝇组比较,用nos Gal4驱动UAS CG5033 RNAi雄性果蝇的睾丸明显变小。免疫荧光染色结果表明,与野生型果蝇组比较,用nos Gal4驱动UAS CG5033 RNAi的雄性果蝇睾丸中的生殖细胞消失,包囊细胞代偿性增多,而用tj Gal4驱动UAS CG5033 RNAi的果蝇睾丸中出现生殖细胞肿瘤;bam>CG5033 RNAi睾丸未见明显异常。 结论： CG5033基因编码的蛋白在果蝇睾丸生殖干细胞中影响细胞的自我更新能力,并可通过体细胞干细胞影响生殖干细胞的分化过程,最终导致生殖细胞肿瘤的形成。     

CG6015基因在果蝇睾丸生殖干细胞生命维持中的功能研究

目的 CG6015基因作为RNA剪接体的调控因子,是否参与调控果蝇睾丸生殖干细胞(GSCs)尚不明确.文中旨在探讨CG6015基因在果蝇睾丸GSCs生命维持中的功能,并探索其中潜在的调控机制.方法 利用UAS-Gal4系统实现CG6015基因在果蝇睾丸GSCs中的特异性敲减.以W1118品系为对照组,Nos>CG601...     

FLCN在子宫颈鳞癌组织中的表达及其对子宫颈鳞癌SiHa细胞增殖及凋亡的影响

［摘要］目的: 探讨folliculin (FLCN)基因在子宫颈鳞癌组织中的表达及其对子宫颈鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法: 采用qRT PCR和免疫组化法分别检测正常宫颈组织和子宫颈鳞癌组织中FLCN mRNA和蛋白的表达;在子宫颈鳞癌SiHa细胞中敲减或过表达FLCN后,qRT-PCR检测FLCN mRNA表达,采用CCK 8检测各组细胞增殖活力,采用TUNEL和磷酸化组蛋白H3(PH3)染色,观察各组细胞凋亡和增殖情况。结果： 与对照组相比,宫颈鳞癌组中FLCN mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P均<0.05)。FLCN siRNA 沉默后细胞增殖活力增强、凋亡减弱,PH3蛋白阳性比例增加,TUNEL阳性细胞比例减少(P<0.05或0.01)。过表达FLCN细胞增殖活力减弱、凋亡增强,PH3蛋白阳性细胞比例减少,TUNEL阳性细胞比例增加(P均<0.01)。结论： FLCN基因在宫颈鳞癌组织中呈低表达,其可抑制SiHa细胞增殖并促进其凋亡。     

剪接体蛋白SmD3在果蝇S2细胞中对U2A的影响

目的 探讨小核糖核蛋白颗粒蛋白SmD3(small ribonucleoprotein particle protein SmD3, SmD3)表达改变对果蝇Schneider 2(S2)细胞中剪接体成分U2A的影响。方法 通过转染构建敲减SmD3基因的S2细胞及其对照模型,并进行干涉效率验证。构建pUAS-attB-SmD3克隆,通过转染实现SmD3基因在S2细胞中的过表达。采用免疫荧光染色检测各组细胞模型中U2A蛋白的表达水平。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞模型中U2A mRNA的表达水平。结果 选择干涉效率最优的SmD3 siRNA-1进行实验,与对照组比较,SmD3基因敲减组U2A蛋白及mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。成功构建pUAS-attB-SmD3克隆并在S2细胞中过表达,与对照组比较,SmD3基因过表达组U2A蛋白及mRNA表达水平降低,差异均有统计学意义(P均=0.000)。结论 SmD3基因编码的剪接体核心蛋白与U2A可能在果蝇S2细胞中发挥相互拮抗的作用。