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目的通过研究粪肠球菌脂磷壁酸(LTA)对巨噬细胞自噬功能的影响,为后续进一步深入探讨顽固性根尖周炎的发病机制提供实验依据。 方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测LTA的细胞毒性作用;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LTA作用下巨噬细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin1的表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测自噬相关基因LC3、Beclin1 mRNA表达水平的变化;构建稳定表达自噬双荧光慢病毒载体HBLV-mRFP-GFP-LC3-PURO的巨噬细胞系,激光共聚焦显微镜观察自噬情况;SPSS 20.0统计软件进行数据分析。 结果CCK-8结果表明,选用20 μg/mL LTA及其以下浓度处理巨噬细胞24 h均未见明显毒性作用(t = 2.102,P = 0.1106);Western blot结果表明,LTA刺激巨噬细胞后:LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值表达量(0.42 ± 0.04)与对照组(0.04 ± 0.02)相比显著提高,差异有统计学意义(F = 14.25,P<0.001),Beclin1蛋白表达量(0.56 ± 0.11)与对照组(0.28 ± 0.08)相比呈上升趋势(F = 3.459,P = 0.0258),均存在剂量依赖效应;实时荧光定量PCR结果表明,LTA刺激巨噬细胞后,LC3基因表达水平(5.94 ± 0.85)与对照组(1.03 ± 0.28)相比显著提高(F = 12.93,P<0.001);Beclin1基因表达水平(2.22 ± 0.21)与对照组(1.02 ± 0.28)相比呈上升趋势(F = 6.036,P<0.001),存在剂量依赖效应;成功构建稳定表达HBLV-mRFP-GFP-LC3-PURO的巨噬细胞系,激光共聚焦显微镜下观察显示,LTA作用组自噬体形成量(58 ± 6)与对照组(18 ± 8)相比差异有统计学意义(F = 12.36,P = 0.0021)。 结论粪肠球菌LTA可诱导巨噬细胞产生自噬,且存在剂量依赖效应。  相似文献   
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目的研究比较5种抛光系统处理纳米树脂后的表面粗糙度及其对细菌黏附程度的影响。 方法Filtek Z350 XT纳米树脂制作54个样本,随机平均均分为6组,每组9个。其中5组为实验组(抛光组)分别用OptiDisc、HiLusterPlus、Sof-Lex、Super-snap以及Composite Polishing Kit CA0310等5种抛光系统修整、抛光,另1组不做抛光处理为对照组。激光共聚焦扫描显微镜测定样本表面粗糙度(Ra)。将上述样本与变异链球菌于体外混合培养24 h,测定其表面细菌黏附量。采用单因素方差(One-Way ANOVA)分析方法对样本表面粗糙度和生物膜菌落计数结果进行统计学分析。 结果实验组中HiLusterPlus组的Ra值最低平均(0.196 ± 0.02)μm,与Composite Polishing Kit CA0310组相比差异有统计学意义(P= 0.016);其余各实验组间Ra值无显著差异,均能达到较低的粗糙度值。5个实验组的细菌黏附量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);5个实验组间的细菌黏附量差异无统计学意义(P>0.05)。 结论HiLusterPlus抛光系统处理纳米树脂可获得较低的表面粗糙度。系统抛光可明显降低纳米树脂材料表面细菌黏附量。  相似文献   
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健康状态下,口腔微生物、黏膜免疫细胞及上皮屏障三者相互作用,维持口腔微生态稳定.疾病状态下,口腔微生态紊乱,各种致病菌及其毒力因子、代谢产物等激惹免疫系统,直接或间接破坏上皮屏障,促进口腔黏膜病的发生发展,产生免疫炎症反应或不可逆转的"炎-癌"转化.本文从口腔稳态维持与口腔黏膜病发生两个层面,针对口腔微生物与免疫细胞及...  相似文献   
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