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目的 初步建立抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体规模化制备技术平台,为制备抗人细胞色素P450(CYP450)亚型蛋白的单克隆抗体奠定基础.方法 按常规方法进行细胞融合,以酶联免疫吸附测定法(ELISA)筛选杂交瘤,以ELISA、免疫组化(IH)、免疫印迹(Western Blot)、免疫沉淀(IP)对单克隆抗体加以鉴定.结果 融合后筛出杂交瘤,其分泌抗体类型为IgG1、IgG2a、IgG2b及IgM.免疫组化(IH)图片上,人肝细胞浆内均可见阳性颗粒.免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WesternBlot)结果显示,所制备抗体与人肝微粒体蛋白有特异性结合.结论 筛选制备的单克隆抗体杂交瘤能分泌特异性较强的抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体. 相似文献
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目的;观察胰岛素对IDDM患者红细胞变形能力(RCD)的保护效果,初步探讨IDDM微血管并发症发病机理。方法;动态检测我院IDDM患者RCD、膜唾液酸(SA)含量、红细胞膜ATP酶活性及红细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。通过胰岛素满意治疗后,重复检测上述指标。结果:糖尿病患者RCD降低;红细胞膜ATP酶活性明显下降,SA含量均显著减少;红细胞中SOD活性降低及MDA水平明显增高;胰岛素有效治疗后上述指标明显改善。结论:I型糖尿病患者RCD明显降低,胰岛素有效治疗可以改善RCD及有效预防微血管并发症的发生。 相似文献
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目的:研究大鼠脊髓损伤后不同时间点坐骨神经兴奋阈值、动作电位(AP)幅度和传导速度,以及损伤脊髓GAP-43蛋白表达的改变。方法:采用改良的Allen′s重物坠落致大鼠脊髓损伤实验模型、电生理学和免疫组织化学染色。结果:大鼠SCI后1、3、7d时,坐骨神经兴奋阈值升高,AP幅度和传导速度降低,呈时间依赖性改变;SCI后14d,AP产生阈值、幅度和传导速度较SCI第7d有所恢复。正常大鼠脊髓灰质神经元的胞浆和轴突中有少量GAP-43蛋白表达;SCI后第1、3、5、7d时损伤脊髓周围区灰质GAP-43蛋白表达逐渐增强;在SCI后第14d其阳性表达开始减弱。结论:大鼠SCI后能够导致坐骨神经电生理学兴奋性和传导性的降低,以及神经结构重构蛋白GAP-43表达增加。 相似文献
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新西兰兔骨髓基质细胞构建组织工程膀胱的实验研究 总被引:4,自引:2,他引:4
目的:研究骨髓基质细胞(MSCs)在兔组织工程膀胱中的应用.方法:按献改进方法制作膀胱无细胞基质(BAMG),从兔胫骨中分离出MSCs,体外扩增后接种于BAMG外表面,在低糖DMEM(LG—DMEM)培养12h,与BAMG复合成组织工程膀胱,对同一兔实施膀胱次全切术,用组织工程膀胱替代.20只兔实施了保留三角区的膀胱次全切术.实验随机分为3组.A组6只直接缝闭三角区;B组7只用膀胱形状的BAMG进行重建;C组7只用复合自体MSCs的组织工程膀胱进行替代手术.术前术后分别记录膀胱测压和放射线造影资料.12wk时无痛处死动物,进行大体解剖和组织染色分析.结果:体外扩增时间平均为21d.A,B和C组膀胱容积分别为术前的22%,85%和95%,顺应性分别为术前的11%,104%和107%.大体解剖显示A组仅有很小的储水能力,而B,C组具有正常膀胱形态,组织染色分析A,B组显示上皮层正常,粘膜下纤维组织增生而肌层较薄;C组则显示了与自体膀胱相似的正常的3层组织结构.结论:膀胱次全切除后原位缝合膀胱容积和顺应性均不能恢复,单纯应用BAMG膀胱容积和顺应性能够恢复正常,但逼尿肌层较薄,应用BAMG复合自体ASCs或MSCs的组织工程膀胱替代,术后12wk膀胱容积和顺应性能够恢复正常,膀胱壁组织结构与正常膀胱相似.提示膀胱次全切除后应用BAMG复合自体MSCs的组织工程膀胱替代可以获得良好功能和组织结构. 相似文献
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大鼠皮层神经元原代培养方法的改进 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立一种简单、较理想的新生大鼠皮层神经元体外原代培养方法.方法:采用低浓度、短时间胰酶消化和机械分离相结合的方法制备皮层神经元悬液,进行培养.结果:在体外培养条件下神经元结构特征明显,并能形成典型的神经元网络.结论:本方法适合普通实验室进行大鼠皮层神经元体外培养. 相似文献
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开放式医学机能学实验教学体系的探索与实践 总被引:1,自引:1,他引:1
机能学实验是基础医学实验教学的重要组成部分,是培养学生实践能力和创新精神的重要环节。近年来我校以构建新型实验教学体系为目标,积极探索机能实验室的开放式管理,并对开放式实验教学体系进行了试点改革。实践证明,建立在开放实验室基础上的开放式实验教学体系,有利于培养学生学习的主体意识,进一步提高其实践能力和创新意识,是培养高素质专业医学人才的有效途径之一。 相似文献
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自2003年1月至2004年1月,我院采用胞二磷胆碱与克拉瑞啶联合治疗多发性梗塞性痴呆20例,临床效果满意,报告如下。 相似文献
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生长曲线拟合及细胞群体倍增时间的简化计算 总被引:7,自引:1,他引:6
0 引言 目前细胞群体倍增时间的计算方法有两种 ,而我们基于计数法绘制细胞生长曲线所获数据 ,利用 SPSS软件进行理论推导而得的理论倍增时间计算方法计算相对简单实用 ,现介绍如下 .1 材料和方法 指数函数拟合模型 (Exponential)中 ,Y=b0 × 2 b1 ×t要比 Y=b0 × eb1 × t更符合细胞的生物学特性 ,因为细胞增殖为二分裂生长 .Y=b0 × 2 b1 ×t在 SPSS的曲线模拟功能选项中并没有此函数拟合模型 ,故将原始数据的自变量时间变量作一转换 ,即将原自变量乘以 ln2即可 ,理论依据为Y=b0 × 2 b1 × t=b0 × eb1 × tln2 =b0 × eb1 ×… 相似文献