单顺反子表达人GM-CSF和B7.1融合基因真核表达载体的构建和鉴定

目的　构建单顺反子表达人 GM- CSF和 B7.1融合基因真核表达载体。　方法　应用巨引物 PCR技术对 h GM- CSF基因 c DNA进行定点突变 ;应用 PCR重叠延伸法 ,将 h GM- CSF和 h B7.1基因的 c DNA编码序列通过一 linker序列拼接 ,构建 h GM- CSF与 h B7.1融合基因 h GM- B7.1,将其插入 pc DNA3真核表达载体 ,测定核苷酸序列。　结果　序列分析表明 :(1) h GM- CSF突变体基因 c DNA编码序列的 178位核苷酸由 C变为 A,其余核苷酸序列均未发生变化 ;(2 ) h GM- CSF、linker、h B7.1的连接顺序、方向及序列完全正确。　结论　构建 pc DNA3- h GM- B7.1融合基因真核表达载体成功     

单顺反子表达人GM—CSF和B7．1融合基因自核表达载体的构建和鉴定

目的 构建单顺反子表达人GM-CSF和B7．1融合基因真核表达裁体。方法 应用巨引物PCR技术对hGM-CSF基因cDNA进行定点突变；应用PCR重叠延伸法，将hGM-CSF和hB7，1基因的cDNA编码序列通过一1inker序列拼接，构建hGM-CSF与hB7．1融合基因hGM-B7．1，将其插入pcDNA3真核表达裁体，测定核苷酸序列。结果 序列分析表明：(1)hGM-CSF突变体基因cDNA编码序列的178位核苷酸由C变为A，其余核苷酸序列均未发生变化；(2)hGM-CSF、1inker、hB7.1的连接顺序、方向及序列完全正确。结论 构建pcDNA3-hGM-B7.1融合基因真核表达载体成功。     

B7.1GM—CSF基因修饰的EL—4细胞激发C57BL／6小鼠抗淋巴瘤免疫反应

目前 ,恶性淋巴瘤的治疗取得了很大进步 ,许多病人经过放射治疗或联合化疗后可获完全缓解 ,但是 ,已获完全缓解的病人体内仍有数量不少的残留淋巴瘤细胞 ,这些残留的淋巴瘤细胞是淋巴瘤复发的根源。因此 ,进一步消除残留的淋巴瘤细胞、防止复发、延长生存期是人们多年来追求的目标。肿瘤免疫基因治疗是近年来基因治疗研究的热点之一。本研究希望通过免疫基因治疗激发肿瘤宿主免疫机制来杀伤肿瘤细胞 ,为今后免疫基因治疗消除淋巴瘤病人残留的淋巴瘤细胞提供动物实验依据。本文的研究内容包括以下四个部分 :1.PL XSN、PL XSNm B7、PL X…     

导入多药耐药基因提高脐血单个核细胞对柔红霉素的抗性

多药耐药基因 1(ｍｄｒ1)编码的Ｐ170是能量依赖的药物外排泵 ,是导致肿瘤细胞产生多药耐药的重要机制之一。本文将ｍｄｒ1基因导入脐血单个核细胞 ,以期能提高其对化疗药物的抗性。1　材料与方法1.1　制备逆转录病毒上清用ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ介导ｐＨａｍｄｒ1/Ａ导入ＰＡ317细胞(ｐＨａｍｄｒ1/Ａ质粒由美国国立癌症研究所ＤｒＩｒａＰａｓｔａｎ惠赠 )。经 60ｎｇ/ｍｌ秋水仙素筛选出抗性克隆。用 3Ｔ3细胞检测出病毒滴度为 1.3× 10 4 ＣＦＵ/ｍｌ[1] 。1.2　病毒感染脐血单个核细胞用比重为 1.0 63的Ｆｉｃｏｌｌ Ｈｙｐａｑｕ…     

连理汤加减治疗溃疡性结肠炎31例

目的:观察连理汤加减治疗溃疡性结肠炎的临床疗效。方法:将62例溃疡性结肠炎患者随机分为对照组和治疗组,每组31例。对照组给予柳氮磺胺吡啶治疗,治疗组给予连理汤加减治疗。结果:治疗组有效率为80.65%,对照组有效率为74.19%,治疗组优于对照组(P0.05)。结论:连理汤加减治疗溃疡性结肠炎疗效显著。     

白血病并脑出血后15天行自体骨髓移植1例

白血病患者在近期脑出血后行自体骨髓移植(ABMT)国内外文献尚未见报道,我们进行了1例,现报告如下。病例报告　女,15岁,学生,体重38kg。入院前7个月,因面色苍白、黑便2周第1次住院,经检查确诊为急性淋巴细胞白血病(L2)用VDP方案[长春新碱(VCR)、柔红霉素(DNR)、泼尼松(P)]诱导2疗程后达完全缓解(CR1),予原方案巩固治疗3疗程,并鞘内注射甲氨蝶呤(MTX)10mg,2次后出院。3个月前第1次复发,又予VAAP方案[长春新碱、阿糖胞苷(Ara-C)、阿柔比星(aclarubicin,ACR)、泼尼松]3个疗程后达第2次完全缓解(CR2)。1996年5月28日因血象检验发现…     

SLE患者血清中IL-18和sFas及sFasL的变化

目的　通过了解不同疾病时期系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清中白介素 - 18(IL - 18)和可溶性Fas(sFas)及可溶性Fas配体 (sFasL)的变化 ,探讨本病中IL - 18与细胞凋亡的关系。方法　根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分法 ,将 5 8例SLE患者分为轻、中、重三组 ;应用ELISA方法测定 5 8例SLE患者及 30例正常对照血清IL - 18和sFas及sFasL水平。结果　SLE患者血清中IL - 18和sFas水平明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ,在疾病活动度轻、中、重三组之间有显著的统计学差异 (P <0 0 1)。SLE患者血清中sFasL与正常对照组相比明显增高 (P <0 0 1) ,但各组间无显著差异 (P >0 0 5 )。患者血清IL - 18水平的增高与sFas增高呈正相关 (γ =0 4 96 ,P <0 0 1) ,与sFasL无明显相关 (γ =0 12 6 ,P >0 5 )。结论　SLE患者血清IL - 18的增高可引起sFas和sFasL增高 ,二者在SLE发病机制中起重要作用。     

应用PCR技术检测急性淋巴细胞白血病T细胞受体γ基因重排

目的寻找可作为急性淋巴细胞白血病恶性克隆的基因标记。方法应用ＰＣＲ技术扩增Ｔ细胞受体γ链基因重排，选用四种限制性核酸内切酶消化扩增产物。结果初诊或复发１０例急性淋巴细胞白血病病人中，有５例出现清晰扩增带，约４００ｂｐ，扩增物经四种限制性核酸内切酶消化后形成的限制性核酸内切酶图谱各具特色；５例处于缓解期的急性淋巴细胞白血病病人，有４例被检出清晰扩增带。结论应用ＰＣＲ扩术扩增Ｔ细胞受体γ链基因重排，能用于检测急性淋巴细胞白血病微小残留病，如果结合限制性核酸内切酶图谱分析，则能用于研究白血病细胞的克隆演化     

系统性红斑狼疮患者转移生长因子-β和白细胞介素-10水平的变化

目的　探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清转移生长因子 β(TGF β)和白细胞介素 10 (IL 10 )的变化。方法　根据SLEDAI评分法 ,将 38例SLE患者分为疾病活动度轻、中、重度三组 ;应用ELISA方法测定 38例SLE患者及 30名正常对照组血清TGF β及IL 10水平。 结果　SLE患者血清TGF β水平明显低于对照组 ( P <0 .0 5 ) ,但在疾病活动度轻、中、重三组之间比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;与对照组比较 ,SLE组血清IL 10水平显著升高 (P <0 .0 1) ,并且与疾病活动度指数成明显正相关 (r =0 .496 ,P <0 .0 1)。结论　临床上联合检测SLE患者血清TGF β和IL 10水平 ,对指导临床治疗及病情的评估具有实际意义。