结直肠癌手术中不置胃管的临床意义

目的探讨应用快速康复外科(FTS)理念,在结直肠癌根治术术前不留置胃管及术后早期进食的安全性及可行性。方法对该院胃肠外科进入快速康复的结直肠癌手术患者115例,按术前是否常规安置胃管分为观察组(55例)及对照组(60例),比较两组患者吻合口瘘、肺部感染的发生率以及恶心呕吐、咽喉疼痛、肛门排气时间及术后住院时间。结果所有患者均成功完成手术,两组患者在吻合口瘘发生率及住院时间等指标方面比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组肛门排气时间缩短、咽喉疼痛、恶心呕吐及肺部感染的发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用FTS的理念,对结直肠癌根治术患者不留置胃管及术后早期进食是安全可行的,可以减少患者不适感并有利于患者早日康复。     

低氧对人结肠癌细胞HT-29体外侵袭转移潜能的影响

目的 探讨低氧与人结肠癌细胞HT-29恶性转化的关系,检测骨桥蛋白（osteopontin,OPN）、细胞核内核转录因子（NF—κB／p65）表达和MMP-2、MMP-9活性变化,以探索其恶性转化的潜在机制。方法 参照体内肿瘤的氧分压,建立低氧模型。MTT比色试验测定HT-29细胞的异质性黏附能力,Transwell侵袭试验判定其侵袭游走能力;将HT-29细胞低氧处理0、6、12、24、48h,明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2、MMP-9活性变化,RT—PCR和Western blot检测OPN mRNA和蛋白表达,提取细胞核蛋白,Western blot检测细胞核内NF—κB／065蛋白表达。结果 低氧诱导24h后,HT-29细胞的异质性黏附能力、侵袭游走能力显著增加。低氧下6h,MMP-2、MMP-9活性无明显变化,随着低氧时间的延长,其活性逐渐显著上调,24h达顶峰,48h与24h无显著性差异。HT-29细胞在低氧的诱导下,其OPN mRNA和蛋白以及细胞核内NF—κB／065蛋白的表达趋势与MMP-2、MMP-9活性变化趋势类同。结论 低氧能诱导HT-29细胞异质性黏附能力、侵袭游走能力显著增加,MMP-2、MMPO活性上调而促使其向恶性表型转化。OPN—NF—κB可能是低氧下继HIF-1之外的另一重要调节途径,该途径与低氧诱导的恶性表型有密切关系。     

一项简单易行的预测Dukes C期大肠癌切除术后肝转移的生物学指标

目的：本研究旨在探讨瘤芽在不同大肠癌病例的分布特征以及骨桥蛋白（OPN）等在原发癌灶和瘤芽的表达,以评价其可否作为简单易行的预测大肠癌术后肝转移的生物学指标。方法：将Dukes C期以上病例分成3组：A组为同时性肝转移组,B组为异时性肝转移组,C组为无肝转移组。HE染色后,重点观察位于大肠癌侵袭前沿的瘤芽的分布特征,并准确计数。应用免疫组化法分别检测OPN、NF-κB在原发癌灶和瘤芽的表达。结果：瘤芽位于肿瘤侵袭前沿,是失去极性的去分化癌细胞,呈孤立或不规则小梁状分布。瘤芽程度和OPN在大肠癌原发癌灶的强阳性表达在A与C组间的差异具有显著性（P〈0.01）。OPN在瘤芽的阳性表达在A和C组以及B和C组的差异均具有显著性（P〈0.01）。各组间NF-κB在原发癌灶、瘤芽的表达无显著差别。结论：瘤芽BD（＋）、OPN在原发癌灶的强阳性表达均提示大肠癌发生肝转移的可能性较大。如将瘤芽分布特征结合OPN在瘤芽的表达,则可提高预测的准确性,可以考虑作为预测大肠癌术后肝转移的生物学指标。     

直肠癌患者腹腔镜手术的围手术期护理

目的探讨直肠癌患者腹腔镜手术的围手术期护理。方法对比分析直肠癌患者腹腔镜手术组（55例）与传统开腹手术组（60例）各项临床护理指标。结果两组患者术前ASA评分、Dukes分期、合并症及手术时间无统计学意义（P〉0.05）。腹腔镜组肛门排气时间、下床活动时间及住院时间较开腹组显著缩短（P〈0.05）,并发症、手术出血量明显减少（P〈0.05）。结论直肠癌患者行腹腔镜手术术后恢复快,住院时间短,并发症少。加强围手术期心理护理,术前充分的肠道准备,术后密切病情观察和及时发现处理并发症,是直肠癌患者顺利康复的重要保证。     

微缺氧对人结肠癌细胞HT-29血管生成能力及分泌基质金属蛋白酶2/9活性的影响

目的 观察HT-29细胞在微缺氧下的血管生成能力,检测OPN的表达和MMP-2/MMP-9的活性变化,以探讨其向恶性表型转化的潜在机制.方法 参照体内肿瘤的氧分压,建立微缺氧模型.内皮细胞小管形成试验检测体外促进新生血管形成的能力.将HT-29细胞微缺氧处理0、6、12、24和48 h,明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2/MMP-9活性变化,RT-PCR和Western blot检测OPN的mRNA和蛋白表达.结果 微缺氧组内皮细胞形成的管状结构数为(28.5±3.6),明显多于对照组(12.4±2.8),其差异具有显著性(P<0.01).微缺氧6h,MMP-2/MMP-9活性无明显变化,随着微缺氧时间的延长,其活性逐渐上调,24h达顶峰,48 h与24 h差异无显著性.HT-29细胞在微缺氧的诱导下,其OPN mRNA和蛋白的表达趋势与MMP-2/9活性变化趋势类同.结论 微缺氧能诱导HT-29细胞促进新生血管形成,上调MMP-2/MMP-9活性而促进其向恶性表型转化.该实验检测到在微缺氧下OPN和MMP-2/MMP-9普遍上调,且时限同步.因此,笔者推测:OPN可能是微缺氧下继HIF-1α之外的另一重要调控因子,该调控因子与微缺氧诱导的恶性表型密切相关.     

人结肠癌细胞HT-29离体缺氧模型的制备和鉴定

目的 模拟体内肿瘤不同程度的缺氧环境,建立简单、稳定可靠的离体缺氧模型,比较各梯度缺氧对HT-29细胞生长活力的影响,以筛选出最适HT-29细胞生长的微缺氧环境.方法 制作缺氧检测装置,灌注不同氧浓度的混合气体.溶解氧测定仪实时动态监测培养液氧分压的变化;RT-PCR 检测低培养液氧分压下HT-29细胞HIF-1αmRNA的表达,以检验细胞是否处于缺氧状态;倒置相差显微镜下观察缺氧各梯度组HT-29细胞的形态变化;MTT 检测各梯度缺氧对HT-29细胞增殖的影响,描绘细胞生长曲线.结果 输入7.8%、4.8%、2.4%和1.2% 氧(O2)后20min,10%FBS/RPMI-1640培养液的氧分压(PO2)分别恒定于30、20、10和5 mmHg.缺氧各梯度组HIF-1αmRNA的表达均较对照组明显上调,尤以PO220 mmHg组为著.PO230mmHg、PO220 mmHg和PO210 mmHg梯度组HT-29细胞的形态与对照组相似;而PO25 mmHg梯度组则出现损伤性形态改变,其(A570)值最低;PO220mmHg梯度组(A570)值则显著高于对照组.结论 该实验成功构建离体缺氧模型.在适度缺氧下,缺氧的应激作用,可能使相关缺氧反应基因表达上调,诱导细胞增殖加快,通过刺激增殖和细胞保护使肿瘤细胞在缺氧环境中长期生存.而严重缺氧导致增殖受到抑制,细胞形态出现损伤性改变.在对照组和缺氧的4个梯度组中,PO220mmHg组处于缺氧的应激和损伤作用的平衡点,其生长活力最好.肿瘤瘤体内PO220mmHg位于瘤体边缘,提示:位于瘤体边缘的肿瘤细胞在缺氧的诱导下增殖活性更强.这为后续深入探讨该缺氧水平下肿瘤细胞的侵袭能力及其机制奠定了基础.     

厚朴排气合剂联合腹腔镜技术在老年人直肠癌加速康复外科中的应用研究

目的:探讨厚朴排气合剂联合腹腔镜技术在老年人直肠癌加速康复外科(ERAS)中的作用。方法:选取病例88例,根据随机数字表法分为两组。对照组采用腹腔镜技术施行手术,并予以ERAS干预; 观察组在对照组的基础上加用厚朴排气合剂治疗。对比两组患者的胃肠功能恢复和住院时间、胃泌素(GAS)和胃动素(MTL)水平、炎症反应及术后腹胀情况。结果:观察组术后规律肠鸣音出现、初次排便、初次排气、初次进流食时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05); 术后,观察组GAS和MTL水平均高于对照组,白细胞、CRP、PCT水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05); 观察组术后腹胀发生率(4.55%)明显低于对照组(18.18%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在老年人直肠癌ERAS中采用厚朴排气合剂联合腹腔镜技术,可促进患者胃肠功能恢复,减少手术对患者胃肠激素的影响,减轻炎症反应,降低术后腹胀发生率。     

骨桥蛋白反义寡核苷酸对体外微缺氧诱导的肿瘤新生血管的影响

目的 观察靶向骨桥蛋白(OPN)的反义寡核苷酸(ASODN)对微缺氧下HT-29细胞体外促进新生血管形成能力的影响,探讨OPN与微缺氧诱导的肿瘤新生血管的关系.方法 合成靶向OPN的ASODN,以Lipofectamine为载体,将其转染入微缺氧下高表达OPN的HT-29细胞.RT-PCR和Western blot分别检测转染细胞微缺氧下OPNmRNA和蛋白的表达;明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2/MMP-9活性变化;内皮细胞小管形成试验检测体外促进新生血管形成的能力.提取胞核蛋白,Western blot检测胞核内NF-kB/p65蛋白表达.结果 微缺氧诱导的OPNmRNA和蛋白表达被靶向OPN的ASODN特异性地抑制,表达量分别是对照组的35.4%和31.5%.ASODN组HT-29细胞明胶酶活性下降71.0%,内皮细胞形成管状结构的数仅为(12.4±1.8);胞核内的NF-κB/p65蛋白表达下调了61.2%.与各对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 靶向OPN的ASODN明显抑制微缺氧诱导的OPNmRNA和蛋白表达,显著下调微缺氧诱导的HT-29细胞分泌MMP-2/MMP-9的活性,显著桔抗新生血管形成.阻抑OPN的表达,胞核内NF-κB/p65表达、MMP-2/MMP-9的活性随之下调,提示NF-κB和MMP-2/MMP-9也可能参与微缺氧诱导的恶性转化,并且是OPN的下游调控基因.     

骨桥蛋白反义寡核苷酸对微缺氧下人结肠癌细胞HT-29增殖活性及侵袭力的影响

目的 观察靶向骨桥蛋白(OPN)的反义寡核苷酸(ASODN)对微缺氧下HT-29细胞增殖活性、侵袭转移潜能等的影响,探讨OPN与微缺氧诱导的肿瘤恶性表型的关系.方法 合成ASODN,以Lipofectamine为载体,将其转染入微缺氧下高表达OPN的HT-29细胞.用RT-PCR和Western blot法分别检测转染细胞微缺氧下OPN mRNA和蛋白的表达,MTT检测转染的HT-29细胞微缺氧下的增殖活性,MTT比色试验测定HT-29细胞的异质性黏附能力,明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2/9活性变化.结果 微缺氧诱导的OPN mRNA和蛋白表达被靶向OPN的ASODN特异性地抑制,表达量分别是对照组的31.5%和35.4%.ASODN组HT-29细胞的吸光度值(A570)明显低于各对照组(P<0.01),生长抑制率(IR)达(41.6±1.2)%.ASODN组HT-29细胞在各时限点的黏附率均明显降低,明胶酶活性下降71%,与各对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 靶向OPN的ASODN明显抑制微缺氧诱导的OPN mRNA和蛋白表达,显著拮抗微缺氧诱导的细胞增殖、异质性黏附,并显著下调微缺氧诱导的细胞分泌MMP2/9的活性.OPN在微缺氧促进肿瘤向恶性表型转化中起着重要作用.