汉滩病毒S片段基因cDNA 3′端非编码区对核蛋白在大肠杆菌中表达的影响

为了探讨汉滩病毒Ｓ片段ｃＤＮＡ３′端非编码区基因对核蛋白表达的影响，先后构建了两个核蛋白的表达质粒（ｐＢＶＳ２２和ｐＢＶＳＸ），其中ｐＢＶＳ２２不含非编码区基因，ｐＢＶＳＸ含有３′端非编码区基因。比较两者在大肠杆菌中表达核蛋白的水平后发现３′端非编码区对核蛋白的表达有明显的负调控作用，表达量下降近５０％。可能的原因是非编码区中含有非常丰富的ＡＴ碱基。该研究结果为进一步提高汉滩病毒核蛋白的表达量积累了经验，也为高效表达其它病毒结构蛋白提供了有益的资料。     

人源性抗汉坦病毒抗体VH基因噬菌体表面展示文库的构建与筛选

目的 构建人抗汉坦病毒（HV）抗体重链可变区（VH）基因噬菌体表面展示文库,筛选人源性抗HV单克隆抗体（mAb）。方法 从HV吸附筛选的特异性人外周血B淋巴细胞中,用RT－PCR扩增VH基因,与噬菌粒pHEN1连接,构建VH基因噬菌体表面展示文库。经3轮吸附－洗脱－扩增的亲和筛选后,用ELISA鉴定抗HV噬菌体抗体的活性。结果 HV吸附筛选的特异性人外周血B淋巴细胞中,成功扩增出VH基因,并构建了VH基因噬菌体表面展示文库。经3轮亲和筛选,获得24个具有与HV结合活性的重组噬菌粒克隆。对其中一个克隆的VH基因（VH－D10）的序列分析表明,该基因的全长为363bp,编码121个氨基酸,与EMBL和GenBank中所有已知免疫球蛋白（Ig）基因进行同源性比较,其同源序列均人为IgVH原因。结论 成功地构建了人抗HV抗体VH基因噬菌体表面展示文库,并筛选到有HV结合活性的重组噬菌体克隆,为制备人源性抗HVmAb奠定了基础。     

流行性出血热病毒在患者外周血淋巴细胞亚群中的定位

现已证明流行性出血热病毒(EHFV)对宿主免疫系统的感染侵害具有极重要的发病学意义。但病毒对淋巴细胞不同亚群感染的特点尚未见报道。作者采用双标记的免疫细胞化学技术,研究了     

肾综合征出血热病毒大鼠单克隆抗体制备及其对病毒抗原特性的鉴定

用肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）免疫Ｌｏｕ／ｃ大鼠脾细胞与ＩＲ９８３Ｆ骨髓瘤细胞融合，获得１１株能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞系。用放射免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ及免疫酶技术等对这一组大鼠单克隆抗体（单抗）进行了特性鉴定和病毒抗原性分析。发现１１株单抗中，９株为抗核壳蛋白（ＮＰ）特异性，２株为抗Ｇ２糖蛋白。大多数抗ＮＰ单抗无中和活性及血凝抑制（ＨＩ）活性，但有２株例外，具有一定程度的中和或（和）ＨＩ活性。而抗Ｇ２单抗均只有一定程度的中和或（和）ＨＩ活性。在ＨＦＲＳＶ抗原性分析方面，可初步将１１株大鼠单抗分成组、亚组、野鼠型及亚型特异性单抗，并对上述单抗特性进行了讨论。     

流行性出血热患者白细胞介素-2活性的测定及其临床意义

采用活化小鼠脾细胞微量培养~3H-TdR参入法,对流行性出血热(EHF)患者外周血单个核细胞(PBMC)产生白细胞介素-2(IL-2)的能力及其意义作了初步探讨。     

流行性出血热患者外周血淋巴细胞产生免疫干扰素能力的研究

免疫干扰素(IFNγ)是免疫活性细胞产生的一类重要的细胞因子,它不仅具有抗病毒作用,而且具有重要的免疫调节功能。本研究对流行性出血     

中国部分地区人群血清TTV部分序列变异的研究

目的 了解我国不同地区人群血清中所存在的新型肝炎病毒ＴＴＶ的序列变异情况。方法 从山东、北京、深圳、南京等地的ＴＴＶ ＰＣＲ阳性血清中随机挑选６例患血清，用单管一步法从血清中提取其ＴＴＶ ＤＮＡ，然后用气流 引物进行ＰＣＲ护增，并对其中的部分ＯＲＦ－１序列（３０９ｂｐ）进行克隆测序，利用网上软件ＢＬＡＳＴ和ＧＯＬＤＫＹ将所测序列结果与日本所的序列进行比较。结果 在３０９个所测碱基中有少数碱基存在     

特异性免疫球蛋白治疗44例流行性出血热临床分析

采用随机分组法用流行性出血热(EHF)特异性免疫球蛋白(SIG)治疗44例早期EHF患者,观察其特异性抗体水平、循环免免疫复合物(CIC)及补体C_3含量的动态变化,以探讨SIG对体液免疫应答的影响与作用。结果表明:应用SIG后,能明显降低EHF抗体及CIC水平,促进C_3水平回升。治疗组与对照组相比,差异显著及非常显著,P<0.05和P<0.01。提示早期应用SIG,可能有中和体内游离病毒,减轻病毒血症的作用,从而使由此激发的体液免疫水平降低,对减轻继发的免疫病理损害,阻止病情发展有一定的疗效     

汉滩病毒西安分离株84 FLi的S片段全基因序列测定及分析

目的：测定我国陕西西安出血热肾病综合征(HFRS)患者流产胎儿肝分离的病毒84FLi株的全S片段基因序列，了解其分子特征，并确定其在汉坦病毒(HV)种系发生中的位置。方法：采用逆转录．聚合酶链式反应(RT-PCR)，扩增出S基因的cDNA，直接用PCR产物或克隆入pMD18-T载体中测序。结果：84FLi株的全S基因共由1688个核苷酸组成，四种核苷酸的比例分别为A31．39％、C19．25％、G23．04％和T26．30％，GC含量为42．29％，AT含量为57．71％。最大开放读码框为37～1326，共编码429个氨基酸。核苷酸序列同源性分析表明，84FLi株与汉滩病毒(HTN)型同源性高于与其他型HTV的同源性。84FLi株与中国毒株Chen4和RG9同属于一个进化分支，而与HTN型国外毒株距离较远，属于不同的进化分支。结论：84FLi株属于HTN，并与国内分离的HTN同源性较高。