基因转移FasL治疗人黑素瘤的实验研究

目的探讨体内外基因转移F as配体(F as-ligand,F asL)对恶性人黑素瘤细胞凋亡的影响。方法用携带人F asL cDNA的缺陷型重组腺病毒(A d-F asL),在体外转导两株黑素瘤细胞,并使其表达;通过流式细胞仪、RT-PCR法进行F as/F asL表达检测,TUNEL法及荧光显微镜相关凋亡检测、分析。建立人黑素瘤裸鼠模型,并对其进行体内疗效观察及病理学检查。结果流式细胞仪和RT-PCR检测两株黑素瘤细胞表面均表达F as,不表达F asL,而A d-F asL转导的两株黑素瘤细胞均能表达F asL;A d-F asL能显著诱导两株黑素瘤细胞在体外凋亡或抑制其生长。体内疗效观察黑素瘤荷瘤鼠模型治疗组瘤重(0.48±0.16)g与对照组瘤重(1.02±0.19)g相比,差异有显著性(P<0.05)。肿瘤组织形态学检查,治疗组可见肿瘤细胞凋亡坏死区及炎性细胞浸润。结论F asL基因重组腺病毒在体内外均具有显著诱导人黑素瘤细胞凋亡的效果。     

颅内椎－基底动脉夹层动脉瘤二例

颅内椎－基底动脉夹层动脉瘤二例孙林泉，杜子威，松本清，岩田隆信例１男，６５岁。入院前二周觉头晕并逐渐加重。体检未见明显阳性体征。头颅平扫ＣＴ见右小脑半球订一低密度灶，未见明显占位效应，脑血管造影示右椎动脉呈梭形膨大，提示夹层动脉瘤可能。ＭＲＩ提示右椎...     

抗人脑胶质瘤细胞系SHG-44单克隆抗体的研究

自杂交瘤技术建立以来,抗各类肿瘤的单克隆抗体(McAb)陆续建立。对颅内最常见的恶性肿瘤——人脑胶质瘤McAb除国外有少量报道外,国内尚未见报道。我们采用本研究室建立的我国第一株人脑胶质瘤细胞系SHG 44为抗原,制备了抗人脑胶质瘤McAb。应用SHG-44完整细胞免疫BaLb/C小鼠,经加强免疫后,第4天取脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞系NS-1融合,96孔培养板232个孔中,93孔出现杂交瘤细胞克隆。经用酶联免疫吸附     

人脑恶性胶质瘤细胞体外长期传代培养的研究

报告SHG-44(星形细胞瘤Ⅱ～Ⅲ级)细胞的建系经过。该系的细胞生长旺盛,每7～10天传代一次,每8天细胞数增加8～9倍。细胞的形态有星形和梭形两种。动物异种移植成功率在60%以上,移植瘤经光镜和电镜证实与原来的人脑恶性胶质瘤相似。生化学提示培养细胞和移植瘤的LDH同功酶呈M形。培养细胞中存在胶质细胞标记蛋白S-100蛋白。染色体以超三倍体为主。从移植能、形态学、生化学等提示SHG-44细胞较好地保持了人脑恶性胶质瘤细胞的特征,为我国进一步研究人脑恶性胶质瘤提供了一个工具。     

~3H-TdR掺入法测定NHG-1脾淋巴细胞转化功能

本文报告用~3H-TdR掺入法测定本室的NC系正常裸小鼠和荷人脑胶质瘤裸小鼠(NHG-1)的脾淋巴细胞转化功能。结果提示:正常的纯合子(nu/nu)T细胞缺乏,B细胞功能均正常;杂合子(nu/ )的T和B细胞功能均正常;荷瘤鼠(NHG-1,30代)除了T细胞缺乏,B细胞功能亦受到抑制。     

人脑恶性胶质瘤细胞体外长期传代培养成功的报告

我们于1979年开始进行人脑恶性胶质细胞瘤体外培养,其中命名为SHG-44(Suzhou Human Glioma)的细胞已培养了二年半,生长旺盛,现传至80代。其LDH同功酶呈M型,并检出S-100蛋白。裸鼠及大白鼠的移植成功率分别为60%和69%,病理学所见与原来的人脑胶质瘤细胞形态相似。本文报告其建系过程和有关特征。     

神经组织特异S-100蛋白的分离和提纯

1965年Moore自牛脑分离出一种高度酸性蛋自质,因其在中性饱和硫酸铵中可溶,故命名为S-100蛋白(S代表可溶的,100指硫酸铵的饱和度)。这种蛋白质特异地存在于神经组织中,另一方面,它广泛分布于爬虫类到哺乳类已研究过的各种动物脑以及人脑中。因其具有高度神经组织特异性和无种属特异性,故而推测它与神经系统的特异功能可能有某种联系。     

人脑胶质瘤组织中RNA分离方法的改良

采用改进的异硫氰酸胍／氯化铯超离心法，从人脑恶性胶质瘤组织中分离总ＲＮＡ，ＯＤ２６０ｎｍ／ＯＤ２８０ｎｍ为２．０２。甲醛变性凝胶电泳、溴化淀染色显示，２８ｓ和１８ｓｒＲＮＡ条带清晰，且２８ｓ条带的荧光强度约为１８ｓ条带的２倍。再经Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ亲和层析纯化得到ｍＲＮＡ。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ转移印迹分析表明，用该方法所分离得到的ｍＲＮＡ无降解，完整性好，核酸纯度完全符合进一步实验研究（如进行反转录合成ｃＤＮＡ等）的要求。     

神经特异烯醇化酶

烯醇化酶(enolose)是糖酵解途径中提供能量的酶,它催化2-磷酸甘油酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸。在自然界中有着广泛的分布。哺乳类动物组织中的烯醇化酶以三种亚基型存在,免疫学上定义为α、β、γ亚基,分布各异。1965年Moore使用DEAE-纤维素层析与淀粉凝胶电泳相结合的方法在神经组织中发现了二种高酸性的蛋白:14-3-2蛋白和S-100蛋白。前者即为后来认定的神经特异性烯醇化酶(NeuronSpecilic Enolase简称NSE)。因其组织特异性及与神经组织和相关肿瘤的发生、分展及     

下调RNF138基因对胶质瘤细胞株U251增殖、凋亡及细胞周期影响的研究

目的探讨RNA干扰下调胶质瘤细胞株高表达基因RNF138对胶质瘤细胞株U251体外增殖、凋亡以及细胞周期的影响。方法构建下调RNF138基因的siRNA,通过慢病毒转染导入胶质瘤细胞株U251,设立阴性干扰对照组及空白对照组,荧光显微镜观察转染效率;实时荧光定量PCR检测敲减效率;运用Cellomics仪器连续检测U251体外增殖情况;流式细胞仪检测U251凋亡及细胞周期变化情况。结果慢病毒载体高效、稳定转染U251细胞,靶向RNF138的siRNA有效抑制RNF138基因表达,使RNF138mRNA表达减少60%,U251体外增殖明显减缓,凋亡明显增加,细胞阻滞在G2/M期。结论 RNA干扰抑制RNF138基因表达可以明显抑制胶质瘤细胞株U251体外增殖,促进其凋亡,影响细胞周期,阻滞细胞分裂。