候选HCVE1蛋白疫苗在健康志愿者中的耐受性和免疫原性

比利时Ghent大学和医院的Leroux-Roels等在Vero细胞中表达了1b丙型肝炎病毒（HCV）的E1蛋白，即羧基端截短的重组E1蛋白（192～326位氨基酸）。它装配形成20nm的病毒样颗粒后，在免疫小鼠中显示了良好的免疫原性。他们以之为候选疫苗，在20名男性志愿者中进行Ⅰ期临床试验。     

siRNA抑制survivin的表达诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的研究

目的筛选能有效抑制survivin基因表达的小干扰RNA(siRNA),探讨survivin基因抑制对人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的影响。方法设计3段survivin siRNA靶位点,用PCR扩增siRNA表达框,与survivin-绿色荧光蛋白融合基因表达质粒共转染293T细胞,再构建有效siRNA的表达载体,转染卵巢癌SKOV-3细胞,分析sur-vivin基因的表达及细胞凋亡情况。结果筛选出了1段能高效抑制survivin表达的siRNA,能显著下调SKOV-3细胞内的survivin表达,并导致SKOV-3细胞凋亡。结论利用RNA干扰能有效抑制survivin基因表达并诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡,为进一步的靶向survivin分子的体内抗肿瘤研究奠定了基础。     

地震前后汶川映秀镇居民卫生防疫意识调查

目的:研究地震前和地震后15 d、30 d汶川映秀镇居民卫生防疫意识的变化,为开展震后群众防疫工作提供科学依据.方法:自行设计卫生防疫意识调查表,对灾民进行问卷调查,应用χ2检验决定差异显著性. 结果:完成有效问卷121份.统计表明震后映秀灾民接受卫生宣教的人数显著增加(P=0.000).理想的饮用水源由震前的山泉水和自来水转变为瓶装水和山泉水.认为粪便应该灭蝇处理的人比例显著上升(P=0.001).认为生活垃圾应该掩埋或焚烧的比例以及便后应洗手的比例都显著上升.当可能出现疫情时,选择提醒他人注意或积极上报的意识较震前显著上升(P=0.001).多数居民选择使用药物喷洒进行蚊蝇防制.对自身疾病关注度加大,等待医疗队送医送药或自己随意服药的意识加强. 结论:映秀镇居民在震后经过卫生宣教后卫生防疫意识较震前提高,但对医疗和消毒服务有过度依赖.     

中医证侯量表的研制进展

随着近年来中医证侯规范化的不断进展,中医证侯量表作为对中医临床诊治的一个量化评价的重要手段,将会在今后中医改革扮演越来越重要的角色。本文旨在阐述中医量表研制的具体方法,为中医证侯量表的设计者提供方法学,并提出对中医量表制定的一些建议。     

个体化延续护理在急诊高血压病患者健康教育中的应用

目的观察个体化延续护理在急诊高血压病患者健康教育中的应用效果。方法将患者随机分为两组,对照组实施常规护理,观察组将个体化延续护理应用到患者的健康教育中。结果观察组护理后SBP(110.25±7.25)mmHg、DBP(82.36±3.84)mmHg、饮食知识(95.81±2.49)分、运动(94.72±1.73)分、用药(90.66±2.18)分、监测(93.49±2.05)分、1年内再次就诊率为2.33%。对照组护理后SBP(131.48±2.50)mmHg、DBP(94.37±3.49)mmHg、饮食知识(80.19±3.16)分、运动(82.33±2.24)分、用药(84.17±3.04)分、监测(83.50±1.40)分、1年内再次就诊率为23.26%。两组对比,差异显著(P0.05)。结论将个体化延续护理应用到急诊高血压病患者的健康教育中,能够有效降低血压指标,提高患者的各项知识掌握水平,预防再次入院。     

应用蛋白质组学技术筛选乙型肝炎病毒X蛋白作用相关蛋白质

目的 应用比较蛋白质组学方法寻找HBV X蛋白(HBx)作用相关蛋白,揭示HBx在肝细胞痛发生、发展中作用的分子机制.方法 以转染HBx基因的人肝癌细胞株HepG2-Px和转染空白载体的人肝癌细胞株HepG2-P.为研究对象,应用二维凝胶电泳技术分离2种细胞的总蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱及电喷雾电离串联质谱对差异表达的蛋白质点进行鉴定,蛋白质免疫印迹法验证部分差异表达的蛋白质在2株细胞中的表达水平.数据比较采用t检验.结果 得到分辨率较高、重复性较好的2株细胞系的二维凝胶电泳图谱,质谱分析共鉴定32个HBx作用相关蛋白,包括25个在HepG2-Px中表达上调的蛋白质,如热休克蛋白90AB1、Bcl-2相关抗原-2,细胞核磷酸化蛋白、细胞内氯离子通道-1、基质金属蛋白酶-3和黑色素瘤相关抗原-12等,7个表达下调的蛋白质,如Wnt-5a等.蛋白质印迹验证了部分差异表达蛋白在2株细胞中的表达水平.结论 筛选出的差异表达蛋白主要涉及宿主细胞的基囚转录、信号转导、细胞生长和增殖、细胞周期、细胞凋亡、DNA修复和细胞代谢、免疫应答等过程.提示这些与HBx相互作用的蛋白质可能与肝细胞癌的发生、发展相关,为揭示HBx的作用机制提供了线索.     

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达

目的;研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法：ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ ＮＳ５基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃ ＨＴａ,转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞,３７℃振荡培养４ｈ使发生转座,于三抗选择平皿筛选重组ｂａｃｍｉｄ。脂质体介导转染ｓｆ９细胞,将转染上清再次感染ｓｆ细胞,以批量表达ＮＳ５重组蛋白。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分析,检测重组蛋白。结果：序     

核酸探针在结核病实验室诊断中的应用进展

核酸探针杂交技术在结核分枝杆菌的分子生物学研究、细菌分类与鉴定、流行病学调查等方面具有十分重要的作用。本文综述了同位素标记核酸探针（包括全染色体探针、克隆重DNA片段探针、cDNA探针）和非同位素标记核酸探针（包括AP－DNA探针、AAF－DNA探针、AE－DNA探针、Dig－DNA探针）在结核病实验室诊断中的应用进展。     

基于16S rDNAs的快速检测血液细菌污染的荧光定量PCR研究

目的 探讨快速筛选血液及血液制品中细菌污染的方法.方法 对20余种常见致病性细菌的16S rDNAs进行多序列比对,设计扩增细菌16S rDNAs基因的荧光定量PCR(FQ-PCR)通用引物.以12种致病菌、2种真菌、1种支原体、1种病毒和人基因组DNA为模板,验证通用引物检测细菌的特异性.通用引物扩增金黄色葡萄球菌16S rDNA靶片段,构建标准质粒pMDT-Bfr,并建立FQ-PCR定量标准曲线.分别以金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌作为革兰阳性和革兰阴性细菌代表菌,以其不同浓度的DNA为模板进行FQ-PCR反应,检验该方法的敏感性.抽提梯度稀释的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌模拟血液细菌污染标本的总DNA作为FQ-PCR反应模板,检验基于16S rDNAs的FQ-PCR作为血液细菌污染检测方法的敏感性.结果 设计的FQ-PCR通用引物有较高的特异性,仅能检测出细菌的16S rDNAs;用该方法检测革兰阳性和革兰阴性菌,对于浓度在103拷贝/μl以上的16S rDNAs基因都可以准确定量;以该方法检测血液细菌污染模拟标本,灵敏度可达到105CFU/ml.结论 初步建立了以16S rDNAs作为FQ-PCR靶基因快速检测血液细菌污染的方法.该方法特异性强、灵敏度高、成本低廉,具有很好的研究价值与应用前景.     

芍药甘草汤对哮喘大鼠STAT6与IL-13水平的影响

目的观察芍药甘草汤对哮喘大鼠信号传导和转录激活因子6(STAT 6)与白介素-13(IL-13)水平的干预作用,探讨其防治支气管哮喘的作用机制。方法 60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(NULL组)、模型组(OVA组)、地塞米松组(DXM组)及芍药甘草汤高(SG10组)、中(SG5组)、低(SG2.5组)剂量组,每组10只。除正常对照组外均行支气管哮喘造模,相应药物灌胃。检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞和嗜酸性粒细胞计数,免疫组化法测肺组织中STAT 6蛋白表达,ELISA法检测血浆中IL-13含量。结果与NULL组比较,OVA组哮喘大鼠肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、嗜酸性粒细胞计数及气道上皮STAT 6表达和血浆IL-13水平均明显升高(P0.01)。DXM组及各剂量芍药甘草汤组BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞计数、气道上皮STAT 6表达和血浆IL-13水平较OVA组降低(P0.01),但仍高于NULL组(P0.01)。结论芍药甘草汤防治大鼠支气管哮喘的作用机制可能与抑制哮喘大鼠肺组织STAT 6表达,降低血浆IL-13水平,降低哮喘大鼠BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞计数有关。