跑步对早期APP/PS1转基因阿尔茨海默病小鼠海马CA1区和齿状回神经元数量的影响

目的:应用体视学方法定量研究跑步对早期APP/PS1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠海马CA1和齿状回区域内神经元的影响。方法:将6月龄雄性APP/PS1转基因AD小鼠,随机分为跑步组和未跑步对照组。用Morris水迷宫检测2组小鼠的空间学习记忆能力,然后用体视学方法定量研究海马CA1和齿状回区域的体积和神经元的数量。结果:与对照组相比,跑步组AD小鼠Morris水迷宫的逃避潜伏期明显缩短,平台所在象限时间百分比和穿越平台次数均显著增加。体视学研究显示,跑步组AD小鼠海马CA1和齿状回的体积分别比对照组显著增大42.8%和27.3%,并且跑步组AD小鼠海马CA1和齿状回区域内的神经元数量分别比对照组显著增加61.8%和62.2%。结论:跑步能延缓早期AD小鼠空间学习记忆能力的下降;并且可降低AD小鼠海马CA1和齿状回区域内神经元的死亡。     

雌激素替代治疗对卵巢切除大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响

目的：探讨雌激素替代治疗（estrogen replacement treatment,ERT）对卵巢切除（ovariectomy,OVX）大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响。方法：对10~11月龄的雌性SD大鼠进行双侧卵巢切除术,术后1月将成功切除卵巢的大鼠随机分为安慰剂对照组（OVX+O组）和雌激素替代治疗组（OVX+E组）,前者给予连续4周安慰剂（芝麻油）处理,后者给予连续4周17β-雌二醇替代治疗,4周后采用Morris水迷宫对2组大鼠的空间学习能力进行测试,用化学发光法测定2组大鼠体内循环雌激素浓度,用透射电子显微镜和体视学方法对两组大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘进行定量研究。结果：OVX+E组大鼠体内循环雌激素浓度明显高于OVX+O组（t=5.688,P=0.000）;OVX+E组大鼠空间学习能力明显提高（F=9.645,P=0.006）。2组大鼠CA1区体积（t=1.451,P=0.181）、有髓神经纤维体积（t=－1.158,P=0.294）、有髓神经纤维髓鞘体积（u=－0.642,P=0.521）、有髓神经纤维平均直径（t=0.630,P=0.545）和有髓神经纤维髓鞘厚度（u=－1.746,P=0.081）均不存在统计学差异,但是OVX+E组直径在0.6~0.7 μm的有髓神经纤维髓鞘厚度比OVX+O组大鼠增加14.1%（t=2.428,P=0.038）,OVX+E组直径在0.8~0.9 μm的有髓神经纤维直径与轴突直径差比OVX+O组大鼠增加18.2%（t=2.432,P=0.038）。结论：短期雌激素替代治疗可以改善大鼠空间学习能力并对海马CA1区有髓神经纤维髓鞘具有保护作用。     

氟西汀对抑郁模型大鼠海马CA1区少突胶质细胞作用的研究

目的：探讨抗抑郁药物氟西汀对抑郁症慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）模型大鼠海马CA1区内CNPase+少突胶质细胞的作用。方法：选用青年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠（4~6周龄）,随机分为对照组（12只）和模型组（38只）,给予模型组大鼠连续4周的CUS干预。随后依据大鼠的糖水偏好百分比筛选出模大鼠,随机分为CUS组（12只）和CUS+fluoxetine组（FLX组）（12只）,第5~7周CUS组和FLX组继续给予慢性应激,同时FLX组大鼠给予5 mg/（kg·d）氟西汀腹腔注射,对照组和CUS组给予等量生理盐水腹腔注射。干预结束后利用免疫组织化学方法结合现代体视学对大鼠海马CA1区CNPase+少突胶质细胞的数量进行精确的三维定量研究。结果：实验发现,CUS模型组大鼠的体质量（251.4±15.9） g较对照组（323.3±25.9） g明显下降（P=0.00）,但与FLX组大鼠的体质量（257.9±22.7） g相比无差异（P=0.473）。CUS组大鼠的糖水偏好百分比（62.0±14.2）%明显低于对照组（89.2±4.8）%（P=0.000）及FLX组（78.2±12.8）%（P=0.020）。CUS组大鼠海马CA1区CNPase+细胞数量（18 650.7±1 812.0）明显低于对照组（33 606.9±4 471.4）（P=0.007）及FLX组（29 080.7±2 877.5）（P=0.042）。结论：大鼠海马CA1区内少突胶质细胞在抑郁症发病过程中可能起着重要作用,氟西汀治疗可防止抑郁症模型大鼠海马CA1区的CNPase+少突胶质细胞的丢失。本研究结果为探索新的抗抑郁策略提供了形态学基础。     

抑郁症易感性差异与海马CA3区及DG内树突棘数量变化的相关性研究

目的：探讨在慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）模型中压力耐受大鼠海马结构CA3及海马齿状回（dentate gyrus,DG）内树突棘数量的改变情况,以期深入了解抑郁症发病的结构基础。方法：选用4~5周龄雄性sprague-dawley（SD）大鼠,将糖水偏好稳定的大鼠随机分为空白对照组和CUS造模组,造模组采取孤养并给予4周的CUS干预。根据糖水偏好结果筛选出CUS敏感组和CUS耐受组。利用免疫组织化学结合体视学方法对每组抽选出的5只大鼠海马结构CA3和DG内的树突棘数量进行精确的三维定量研究。结果：与空白对照组、CUS耐受组相比,CUS敏感组的糖水偏好百分比均明显下降（P=0.000,P=0.000）,而空白对照组与CUS耐受组的糖水偏好百分比无明显差异（P=0.262）;与空白对照组和CUS耐受组相比较,CUS敏感组大鼠海马结构CA3区内的树突棘数量明显下降（P=0.008,P=0.004）,CUS敏感组大鼠海马结构DG区内的树突棘数量也明显下降（P=0.001,P=0.001）;而在大鼠海马结构CA3及DG内,CUS耐受组与空白对照组的树突棘总数目无明显差异（P=0.656,P=0.950）。结论：CUS耐受组大鼠海马结构CA3及DG内树突棘的数量不受CUS干预的影响,提示海马结构内树突棘数量可能是抑郁症易感性差异的关键因素之一,为抑郁症的治疗提供了新的方向。     

早期APP/PS1转基因阿尔茨海默病小鼠海马结构内有髓神经纤维改变的体视学研究

目的 探讨早期APP/PS1转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠海马结构内有髓神经纤维及髓鞘的改变.方法 运用Morris水迷宫方法测试10月龄APP/PS1转基因AD小鼠和同月龄野生型小鼠的空间学习和记忆能力改变的情况;运用无偏体视学方法结合透射电子显微镜技术对各组小鼠海马结构总体积,CA1和齿状回(dentate gyrus,DG)内有髓神经纤维的总长度和总体积,以及有髓神经纤维髓鞘总体积进行三维定量研究.结果 ①与野生型小鼠相比,10月龄APP/PS1转基因AD小鼠的逃避潜伏期显著性增加(P＜0.05),所在象限游泳时间百分比显著减少(P＜0.01),而穿台次数差异无统计学意义(P＞0.05);②与野生型小鼠相比,10月龄APP/PS1转基因AD小鼠海马体积、CA1体积、DG体积均显著性减小(P ＜0.05,P＜0.01);③与同月龄野生型小鼠相比,10月龄APP/PS1转基因AD小鼠海马CA1区和DG内有髓神经纤维的总长度差异没有统计学意义(P＞0.05),但是海马CA1区和DG内有髓神经纤维的总体积显著性减小(P＜0.05),髓鞘总体积也显著减小(P ＜0.05,P＜0.01).结论 10月龄时APP/PS1转基因AD小鼠海马CA1和DG内均存在脱髓鞘改变,可能是引起AD早期空间学习记忆能力减退的结构基础之一.     

Nω硝基左旋精氨酸甲酯对大鼠海马CA1区毛细血管的影响

目的 探讨Nω硝基左旋精氨酸甲酯(Nω-nitro-左旋精氨酸methyl ester,L-NAME)对大鼠空间学习、记忆能力和海马CA1区毛细血管的影响.方法 内导管成功埋植后,阻断剂组(L-NAME组)大鼠每日给予5 μL的1μmol/μL L-NAME侧脑室注射,对照组(Sham组)每日给予5μL生理盐水侧脑室注射,持续4周.然后用Morris水迷宫测试大鼠空间学习和记忆能力,用试剂盒检测海马组织中NOS活性及NO含量,用体视学方法测定海马和海马CA1区总体积、海马CA1区毛细血管总长度、总表面积和总体积.结果 水迷宫实验中L-NAME组的潜伏期显著长于Sham组(P =0.006);L-NAME组海马组织中的NOS活性及NO含量均显著低于Sham组(P＜0.01);L-NAME组海马体积、CA1区体积与Sham组比较差异无统计学意义(P＞0.05);L-NAME组CA1区毛细血管总长度、毛细血管总表积、毛细血管总体积均较Sham组显著减少(P＜0.05).结论 L-NAME可以导致大鼠空间学习、记忆能力下降和大鼠海马CA1区毛细血管总长度、总表面积以及总体积减少.     

抑郁症大鼠海马CA1区及齿状回毛细血管的体视学研究

目的：研究慢性不可预见性刺激（chronically unpredicted stress,CUS）所致抑郁症模型大鼠海马CA1区和齿状回（den－tate gyrus,DG）体积及毛细血管的改变。方法：选取Sprague Dawley（SD）大鼠,经筛选后随机分为对照组10只和模型组10只。模型组采取慢性不可预见刺激建立抑郁症模型,共给予应激35 d,对照组不给予应激。利用糖水偏好实验和开场实验检测模型是否建立成功。建模成功后,分别从模型组和对照组中各随机选取5只SD大鼠,运用体视学和免疫组化染色相结合的方法对大鼠海马CA1区和DG毛细血管进行定量研究,剩余5只进行相关分子生物学研究。结果：模型组大鼠和对照组大鼠在体质量[（314.81±31.52） g,（349.18±28.23） g,t=2.569,P=0.019]、糖水偏好实验[（82.37±8.44）%,（89.33±3.97）%,t=2.359,P=0.03]、开场实验结果[（48.30±39.49）分,（87.70±38.32）分,u=-1.988,P=0.047]具有统计学差异,模型组较对照组大鼠海马总体积[（88.84±7.51） mm3,（99.89±12.55） mm3,t=2.388,P=0.028]、海马CA1区[（27.78±1.84） mm3,（32.38±3.69） mm3,t=3.522,P=0.004]和DG[（21.02±2.61） mm3,（24.20±3.33） mm3,t=2.377,P=0.029]体积明显减少,模型组较对照组大鼠海马CA1区毛细血管总长度[（8.454±1.010） m,（11.012±1.642） m,t=2.967,P=0.018]、总体积[（0.104±0.019） mm3,（0.151±0.021） mm3,t=3.720,P=0.006]、总表面积[（1.025±0.113） cm2,（1.589±0.313） cm2,t=3.794,P=0.013]、平均直径[（3.884±0.458） μm,（4.580±0.419） μm,t=2.509,P=0.036]下降以及DG毛细血管的总体积[（0.078±0.021） mm3,（0.117±0.024） mm3,t=2.716,P=0.026]、总表面积[（0.838±0.184） cm2,（1.133±0.074） cm2,t=3.32,P=0.011]、平均直径[（3.611±0.493） μm,（4.630±0.635） μm,t=2.834,P=0.022]下降,结果具有统计学意义。结论：抑郁症模型大鼠大脑海马萎缩,CA1区、DG毛细血管改变,海马结构与毛细血管的改变可能参与了抑郁症的发病机制。     

抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马DG区少突胶质细胞作用的研究

目的：探讨抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马齿状回（dentate gyrus,DG）区少突胶质细胞的作用。方法：4~6周清洁级雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组（10只）和建模组（60只）,建立慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）抑郁症模型,为期4周。利用糖水偏好实验筛选出成模大鼠（23只）,随机分为CUS组（12只）及Anti-Lingo-1组（11只）。运用Morris水迷宫评估对照组,CUS组和抗Lingo-1组的行为学水平,采用体视学方法计算各组大鼠海马DG区的少突胶质细胞数量。结果：应激4周和抗Lingo-1抗体治疗3周后,Morris水迷宫实验中,与对照组（3.4±0.2）相比,CUS组（2.4±0.2）大鼠Morris水迷宫第6天穿越平台次数明显降低（F=20.049, P=0.004）;与CUS组比较,抗Lingo-1组（4.3±0.3）大鼠穿台次数明显增加（F=20.049, P=0.000）。体视学研究结果表明,与对照组[（4.9±1.1）×104]比较,CUS组[（3.1±1.3）×104]大鼠海马DG区少突胶质细胞数量明显减少（F=8.747, P=0.026）;与CUS组比较,Anti-Lingo-1组[（6.1±1.1）×104]大鼠海马DG区少突胶质细胞数量明显增加（F=8.747, P=0.001）。结论：抗Lingo-1抗体可以改善抑郁症大鼠的认知障碍,抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马DG区少突胶质细胞的作用可能是抗Lingo-1抗体改善抑郁症大鼠认知障碍的重要形态学基础之一。