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运用轨道的有限单元模型,采用荷载增量法,计算了低温条件下大型养路机械维修超长无缝线路对钢轨应力和锁定轨温的影响。计算结果表明,大型机械在一次性起道时会对钢轨产生较大的应力,建议一次性起道量不超过40mm。 相似文献
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目的研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制。方法利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒载体以判定转染效率。共转染两天后用荧光定量PCR方法定量细胞内核壳体(core)相关HBV DNA水平,用Western blot检测细胞内A3G和HBcAg的表达,并对细胞内core相关HBV DNA X基因进行PCR扩增、T-A克隆和测序,分析X基因中的碱基突变。结果经EGFP判定的转染效率平均为29%。共转染0.5μgA3G和0.5μgHBV的HepG2细胞内core相关HBV DNA量平均下降为对照的8.9%,共转染2μgA3G和0.5μgHBV的平均下降为对照的0.6%。共转染A3G和HBV表达质粒后,HepG2细胞内HBV的X基因中发生G→A突变的数目明显增多,33个克隆中有9个克隆检测到了16~37个G→A突变,突变总数达254个,而对照的33个克隆中仅有2个克隆各检测到2个G→A突变。进一步的分析发现,共转染A3G后发生的G→A突变大多集中于几个热点区域,突变靶点常在GG二核苷酸中的第一个G上。结论胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过诱导。HBV DNA的X基因发生G→A超突变,抑制HBV在人肝癌细胞HepG2中的复制。 相似文献
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大肠癌相关免疫球蛋白新基因SNC73结构与表达研究 总被引:9,自引:1,他引:8
目的 研究由减式杂交方法获得的人大肠癌相关基因SNC734 结构和功能。方法 对SNC73的cDNA进行了核苷酸序列测定,分析得到全长序列,并对其编码的蛋白进行了分析及预测;采用In situ-Max荧光原位杂交方法结合荧光R带技术对SNC73在人染色体上的定位作了研究;利用Northern杂交、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了SNC73在多种肿瘤细胞系中的表达,及在大肠癌组织与这粘中膜中的表达情况;应用原位杂交/原位PCR技术检测SNC73 mRNA在肠上皮中的表达情况。结果 对SNC73序列及开放阅读框9ORF)进行分析,发现其与免疫球蛋白IgA高度同源,为一免疫球蛋白样基因。该基因定位于人染色体14q3 2。SNC73在大肠癌组织也 肠粘膜的表达有差异(P<0.05)。SNC73在肠上皮表达阳性。结论 SNC73在大肠癌中低表达,可能为一新的肿瘤标记物,并提示上皮细胞、非淋巴细胞存在IgA类的蛋白。 相似文献
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目的观察帕尼培南/倍他米隆治疗中、重度下呼吸感染的有效性及对痰分离细菌的体外抗菌活性。方法将83例中、重度下呼吸道细菌性感染患者单盲随机分为治疗组42例和对照组41例。治疗组用帕尼培南/倍他米隆1.0g静脉滴注,1次/12h,疗程5~7d。对照组使用哌拉西林/他唑巴坦钠4.5g静脉滴注,1次/12h,疗程5—7d。观察并比较2组的临床疗效及细菌培养结果。结果治疗组和对照组有效率分别为85.7%和80.5%,致病菌清除率分别为83.3%和75.9%,差异无统计学意义(均P〉0.05),用药期间未出现严重药物不良反应。结论帕尼培南/倍他米隆对中、重度下呼吸道感染有较好疗效,安全性较好。 相似文献
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目的:探讨急诊内科误诊的原因,提高诊治水平,预防医疗纠纷.方法:统计我院急诊科2008年6月至2011年6月3年中急诊内科误诊病例13例,从多方面查找可能的误诊原因.结果:疾病特点、鉴别诊断掌握不全面4例;过分依赖医疗检查设备检查结果,询问病史及体格检查不够系统全面3例;医生警惕性查,初步诊断过于武断2例,临床经验不足2例;因疾病表现不典型及属少见病1例;因患方原因不能提供系统病史和(或)体格检查欠配合2例.结论:夯实自己的基本功;不断更新知识,扩大知识面;认真询问病史、体格检查;及时请上级医师或专科医师会诊;下诊断要给自己留有回旋余地;经常总结工作中的经验和教训;均是减少误诊的对策. 相似文献
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[目的]构建表达人Maspin的基因工程细胞.[方法]提取健康人乳腺组织的总RNA,扩增出编码Maspin的全长cDNA,构建真核表达质粒pcDNA3.1( )/Maspin,然后转染到正常的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中,应用RT-PCR和Western blot方法分别验证Maspin基因在CHOI/pcDNA3.1( )/Maspin细胞中RNA水平和蛋白水平的表达,同时检测细胞培养上清中Maspin的蛋白分泌.[结果]经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒pcDNA3.1( )/Maspin.Western blot分析证明Maspin成功转染到CHO中并表达,且分泌到细胞外.[结论]人Maspin基因可在靶细胞表达,并能分泌到细胞外,为进一步了解Maspin的功能和转Maspin基因细胞成为治疗恶性肿瘤的效应细胞奠定了一定的基础. 相似文献
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目的 :研究载脂蛋白 E(Apo E)基因多态性与 2型糖尿病患者合并冠心病的关系。方法 :用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P) ,研究了 12 5例 2型糖尿病 (DM)患者和 71例健康体检者 Apo E基因型 ,分析了 Apo E基因多态性与 2型糖尿病及其合并冠心病的关系。结果 :(1)糖尿病组 (DM)、糖尿病合并冠心病组 (DC)及对照组等位基因频率分别为 5 .5 %、89.7%、4.8% ,4.1%、85 .3%、10 .6 %和 5 .6 %、86 .6 %、7.8%。相互间 P均 >0 .0 5 ,说明 Apo E基因型与中国人的 2型糖尿病及合并冠心病的发生发展无相关性。 (2 )通过对不同 Apo E基因型的血胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白 (HDL )及低密度脂蛋白 (L DL )水平比较 ,发现携ε4等位基因的个体血 TC高于携其他 ApoE等位基因的个体 ,而携ε2等位基因的个体血 TG的水平高于携ε3、ε4等位基因的个体 (P<0 .0 5 )。 (3)Apo E基因多态性与高血压 (HT)无显著相关性。 (4 )携ε2、ε3、ε4等位基因的个体之间冠心病的发生率差异无显著性。结论 :Apo E等位基因多态性不是 2型糖尿病合并冠心病的独立危险因素 相似文献
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目的 获得ST13基因cDNA5′端的未知序列.方法 应用套式PCR方法直接从cDNA文库中扩增该基因的5′端序列,然后将扩增的片段克隆到pGEM-T.easy载体,并进行序列分析.结果 第1次PCR后得到1条约550bp的片段,经套式PCR后获得1条约480bp的片段,经序列分析证实该扩增的片段是ST13基因cDNA的5′端未知序列.结论 套式PCR技术是克隆基因cDNA的5′端未知序列较简捷、有效的方法. 相似文献
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目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)CD4+T细胞亚群(Th1细胞及Th2细胞)的变化及临床意义.方法 用MK3-多功能酶标仪检测30名对照组,30例急性加重期COPD患者和22例稳定期COPD患者血浆中反映Th1细胞的γ干扰素(IFNγ)的水平及反映Th2细胞的白介素4(IL-4)的水平;用Olympus 640全自动生化分析仪检测30名对照组,30例急性加重期COPD患者和22例稳定期COPD患者血清中C反应蛋白水平;所有受试者均进行肺功能检测(pulmonary function tests,PFT).结果①COPD患者急性发作期IFN-γ的水平明显降低,稳定期升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);COPD患者急性发作期IL-4的水平明显升高,稳定期降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).②COPD患者血浆IFN-γ与FEV1%pred及FEV1/FVC%呈正相关(r=0.493,0.366,P<0.05);COPD患者血浆IL-4与FEV1% pred及FEV1/FVC%呈负相关(r=-0.356,-0.423,P<0.05).③COPD患者血清C反应蛋白水平与血浆IFN-γ、IL-4均无相关性(r=-0.041,0.039,P>0.05).结论 COPD患者急性发作期存在Th1/Th2细胞平衡紊乱. 相似文献