TG2基因修饰的鼻粘膜间充质干细胞向神经样细胞分化的研究

目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化影响。方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率。实验分组:重组TG2腺病毒转染EMSCs(ad EMSCs)组、重组GFP腺病毒转染EMSCs组(GFP-EMSCs)和空白对照组(control),诱导细胞向神经样细胞分化,倒置显微镜观察分化过程中细胞形态的变化。免疫荧光和免疫印迹方法检测诱导后EMSCs的轴突膜蛋白(GAP-43),微管相关蛋白(MAP2)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达情况。向大鼠脊髓内注射ad EMSCs,2周后取脊髓。结果:实验数据表明转染TG2腺病毒的EMSCs可稳定表达TG2。诱导7 d后,ad EMSCs组细胞呈现双极和多极的典型神经样细胞形态,并且GAP-43,MAP2和MBP的表达水平较对照组高。移植入体内2周的ad EMSCs存活良好且部分细胞表达GAP-43。结论:TG2基因修饰有利于EMSCs在体外向神经样细胞分化,并且具有良好的可移植性。     

不同镇静深度对急性冠脉综合征机械通气患者 心血管事件的影响

目的 比较不同镇静深度对急性冠脉综合征（ACS）并机械通气患者心血管事件的影响。方法 56 例需机械辅助通气ACS 患者,随机分为浅镇静组29 例（M 组,RASS 评分0 ～ -2 分）,深镇静组27 例（D 组, RASS 评分-3 ～ -4 分）,所有患者使用地佐辛镇痛,使用丙泊酚+ 右美托咪定镇静,以镇静评分目标调整药物 剂量。使用动态心电图进行48 h 连续监测,比较两组心律失常、急性心肌缺血、机械通气时间、ICU 住院时间、 谵妄发生率及28 d 生存率。结果 两组在频发室性早搏的发生率、室性心动过速阵次、快速型室上性心律失常 阵次及急性心肌缺血阵次的发生频次比较,差异有统计学意义（P <0.05）,D 组均低于M 组;两组谵妄发生率、 机械通气时间、ICU 住院时间及28 d 生存率比较差异无统计学意义（P >0.05）。结论 ACS 并机械通气患者,早 期深镇静可以有效减少心律失常（频发室性早搏、室性心动过速、快速型室上性心律失常）及急性心肌缺血的 发生率,且不增加机械通气时间和ICU 住院时间,不影响28 d 生存率。     

不同镇静药物对 NSTE-ACS 机械通气 患者心血管效应的影响

目的??观察不同镇静药物对非 ST 段抬高型急性冠脉综合征（NSTE-ACS）并机械通气患者心 血管效应的影响。方法??选取长沙市第一医院 47 例需机械辅助通气 NSTE-ACS 患者,随机分为右美托咪定 组（D 组,24 例） ,丙泊酚组（P 组,23 例） 。47 例患者均使用芬太尼镇痛,使用动态心电图及 Picco 连续监测。比较两组心律失常、急性心肌缺血、血流动力学指标、机械通气时间、ICU 住院时间、谵妄发生率及 28?d 生存率差异。结果??两组心律失常及急性心肌缺血比较差异有统计学意义,D 组在快速型室上性心律失 常 [（8.04±6.05）VS（13.48±10.44）阵次 ]、急性心肌缺血 [（3.58±3.26）VS（5.74±3.84）阵次 ] 的发生频次均低于 P 组 ; 两组窦性心动过缓、频发室性早搏、室性心动过速比较差异无统计学意义（ P >0.05） ; D 组在住 ICU 后 12?h?心指数（CI）高于 P 组 [（2.76±0.27）VS（2.59±0.19）L/（min·m） 2 ]（ P <0.05） ; 但全身血管阻力指数差异无统计学意义（ P >0.05） ; D 组谵妄发生率（12.5%?VS?34.8%） 、 ICU 住院时间 [ （8.10±1.03） VS （9.47±1.56）d] 低于 P 组（ P <0.05） ; 两组间机械通气时间、 28?d 生存率比较差异无统计学意义（ P >0.05） 。结论??在需机械通气的 NSTE-ACS 患者镇静治疗中,与丙泊酚比较,盐酸右美托咪定具有更低的快速型室上性心律失常和急性心肌缺血的发生率, 以及更小的心功能影响, 能降低ICU内谵妄发生率, 缩短ICU住院时间。     

p53蛋白乳酸化促进结肠癌细胞增殖和转移

目的:探讨p53蛋白乳酸化修饰对结肠癌细胞增殖、转移的影响及其机制。方法:收集人结肠癌组织和相应癌旁组织,经HE染色确认病理形态后,通过乳酸测定试剂盒检测组织与结肠癌细胞HCT116乳酸浓度,免疫组织化学染色法检测组织乳酸化水平和p53表达水平。免疫荧光染色法观察结肠癌组织中的乳酸化和p53蛋白定位,免疫共沉淀检测组织与HCT116细胞中p53蛋白的乳酸化水平。蛋白印迹法检测HCT116细胞中p53蛋白的亚细胞定位。在内源性乳酸介导HCT116细胞的p53蛋白乳酸化修饰以及乳酸抑制剂草氨酸钠抑制p53蛋白乳酸化修饰后,采用CCK-8法检测HCT116细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell法检测HCT116细胞的迁移和侵袭能力。结果:人结肠癌组织中乳酸化水平和p53表达水平均高于癌旁组织,并且存在明显的p53蛋白乳酸化修饰。内源性乳酸介导HCT116细胞中p53蛋白乳酸化修饰后,在抑制p53入核的同时促进细胞的增殖、侵袭和迁移。结论:乳酸化p53蛋白通过抑制p53的入核促进结肠癌细胞的增殖和转移。     

重症监护室呼吸机相关性肺炎120例临床分析 FREE

目的了解重症监护室（ICU）机械通气患者呼吸机相关性肺炎(VAP)的临床特点及相关危险因素。方法回顾性分析2007年5月-2009年5月入住某院ICU行机械通气发生VAP患者的临床资料及呼吸道分泌物细菌培养结果。结果120例VAP患者病原学检查均获得阳性结果,共分离263株病原菌,其中革兰阴性(G-) 杆菌占58.56%,革兰阳性(G+) 球菌占25.09%, 真菌占16.35%;铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和光滑假丝酵母菌是VAP的主要病原菌。2 种及以上病原菌混合感染的患者95例 （79.17 %）。病原菌对抗菌药物的耐药率较高。机械通气时间越长,VAP发生率越高（P<0.05）;呼吸机管路消毒更换不及时、留置胃管均可使VAP发生率显著增高（P<0.001）。结论 VAP 的主要病原菌为G- 杆菌,混合感染率高,耐药性不断增加,对机械通气患者应针对危险因素进行全面预防, 加强监护。     

血必净联合乌司他丁治疗感染性休克临床效果观察

目的观察血必净联合乌司他丁治疗感染性休克的临床效果。方法选取长沙市第一医院自2016年6月至2018年6月收治的98例感染性休克患者为研究对象,按照随机数字表法将患者分为A组和B组,每组49例。在常规的化痰、止咳、吸氧、维持水电解质/酸碱平衡、适量糖皮质激素等治疗基础上,A组患者接受血必净治疗,B组患者接受血必净联合乌司他丁治疗。比较两组患者血流动力学指标、炎症因子指标以及存活率。结果与治疗前比较,两组患者治疗后的氧合指数、平均动脉压升高,心率降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,B组患者的氧合指数、平均动脉压、心率均低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后的白细胞介素-6、超敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α水平均低于治疗前,且B组低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组、B组患者治疗30 d后的存活率分别为83.67%(41/49)、91.84%(45/49),两组存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论血必净联合乌司他丁治疗感染性休克可维持患者血流动力学稳定,显著改善炎症因子水平。     

氯倍他索对大鼠神经干细胞自发分化的影响

目的:研究氯倍他索(Clo)对神经干细胞自发分化的影响,为Clo治疗中枢性神经损伤提供医学理论基础。方法:利用无血清悬浮法分离培养及鉴定大鼠NSCs;选取第三代NSCs,以含10%胎牛血清完全培养基贴壁诱导分化7 d,培养基中各加入同体积二甲基亚砜、2. 5、5μmol/L的Clo;免疫荧光染色和Western Blot方法检测NSCs分化后轴突膜蛋白(GAP-43)、酸性胶质蛋白(GFAP)、髓磷脂碱性蛋白(MBP)表达情况,进一步探讨Clo的作用机制。结果:分离培养的NSCs高表达Nestin; Clo作用组表达GAP-43和MBP较对照组明显提高(P 0. 05),GFAP表达水平低于对照组(P 0. 05),Clo作用组表达音猬因子(SHH)和锌指蛋白(Gli 1)均高于对照组(P 0.05)。结论:Clo可在体外通过SHH信号通路促进NSCs向神经元细胞和少突胶质细胞分化,与此同时Clo可抑制NSCs向星形胶质细胞分化。     

前列腺癌患者年龄与临床病理特征的相关性分析

目的 分析前列腺癌患者年龄与临床病理特征的相关性。 方法 对 2017 年 1 月至 2019 年 10 月确诊的 96 例前列腺癌患者的临床资料进行回顾性分析,依据其年龄大小分成中老年组(≦70 岁,45 例)与高龄组(>70 岁者,51 例)进行比较。 观察比较两组患者的血压、血糖、胆固醇、甘油三酯、前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺体积、G1eason 评分、癌症分期等临床资料,探讨患者年龄与临床病理特征的相关性。 结果 高龄组患者的 G1eason 评分、前列腺体积、PSA 水平均高于中老年组(P<0.05);高龄组中,Ⅲ~Ⅳ期患者、低未分化患者及有远处转移患者的占比高于中老年组(P<0.05);高龄组患者的舒张压、胆固醇、甘油三酯水平均低于中老年组,血糖水平高于中老年组(P<0.05),差异有统计学意义。 结论 前列腺癌患者的年龄与临床病理特征有密切联系,高龄患者的癌症分级、PSA、G1eason 评分与中年患者有显著差异,其病情更为严重,分化程度更低,临床需予以重视。     

阿司匹林可降低急性呼吸窘迫综合征发生率的meta分析

目的 血小板在急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome, ARDS）的发病机制中起到重要的作用,前期的基础试验也证实血小板抑制剂阿司匹林在ARDS的发生及进展中起到重要作用,本研究在于通过meta分析研究阿司匹林是否可降低患者ARDS发生率。方法 全面搜索2011-2016年PubMed、EMbase、Cochrane、万方数据库和中国期刊网全文数据库,全面获取关于阿司匹林对ARDS发生率影响文献,按照纳入及排除标准筛选文献,提取资料,使用Stata15.0软件对数据进行meta分析。结果 共纳入4篇文献,其中3篇为观察研究性文献,1篇为多中心随机对照试验,共入选具有ARDS高危因素患者5 555例,其中服用阿司匹林患者有1 537例。结果发现：服用与未服用阿司匹林者相比,阿司匹林可以显著降低ARDS的发生率（OR=0.709, 95%CI=0.562 0.896,P=0.004）。结论 本研究发现服用阿司匹林可明显降低ARDS的发生率,但仍需大量的多中心随机对照试验证实。     

氯倍他索促进鼻粘膜间充质干细胞成神经样细胞分化

目的:研究氯倍他索(Clo)对鼻粘膜外胚层间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法:贴壁筛选法分离培养EMSCs,免疫荧光法鉴定体外扩增的EMSCs;MTT法检测Clo对EMSCs增殖能力的影响;成神经样细胞诱导实验分为Clo组、音猬因子(SHH)组和空白对照组,采用全反式维甲酸(ATRA)诱导各组细胞向神经样细胞分化;倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫荧光和免疫印迹方法检测神经元细胞相关蛋白。结果:体外分离培养的EMSCs高表达间充质干细胞和神经嵴源干细胞标志物Vimentin和Nestin。各组EMSCs成神经样细胞诱导7 d后,Clo组和SHH组EMSCs呈现双极和多极的典型神经样细胞形态并且高表达神经元细胞相关蛋白。Clo组EMSCs表达SHH和SMO的水平明显高于空白对照组,与SHH组比较差异无统计学意义(P0.05);Clo可促进EMSCs分泌内源性脑神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)。结论:Clo可通过激活SHH信号通路和上调内源性神经营养因子水平促进EMSCs向神经样细胞分化。